Derivados de 2-indolil imidazo[4,5-d]fenantrolina y su uso en el tratamiento del cáncer.

Un compuesto de fórmula (I):**Fórmula**

o una sal del mismo.

en la que:

R1, R3, R4, R5, y R7 son hidrógeno

R2 es halógeno, y .

R6 es alquilo C1-C4.

Derivados de 2-indolil imidazo[4, 5-d]fenantrolina y su uso en el tratamiento del cïncer

Campo de la invenciïn La presente invenciïn se refiere al campo de las terapias del cïncer y, en particular, al uso de derivados de 2-indolil imidazo[4, 5-d]fenantrolina en el tratamiento del cïncer.

Antecedentes de la invenciïn Se han desarrollado quelantes de metales para el tratamiento de enfermedades causadas por sobrecarga de metales. Mïs recientemente, sin embargo, los compuestos capaces de quelar hierro se estïn estudiando como potenciales terapias anticancerosas, ya que el hierro tiene un papel importante en los sitios activos de una amplia gama de proteïnas implicadas en el metabolismo energïtico, la respiraciïn y la sïntesis de ADN. Una de estas proteïnas, la ribonucleïtido reductasa (RR) , es una proteïna que contiene hierro que es esencial para la conversiïn de ribonucleïtidos en desoxirribonucleïtidos para la sïntesis de ADN y, por lo tanto, un objetivo para las terapias contra el cïncer. Muchos quelantes de hierro son potentes inhibidores de la RR debido a su capacidad para unirse a hierro (Richardson, D. R. (2002) Crit Rev Oncol Hematol 42 (3) : 267-81.) . Por ejemplo, el quelante de hierro deferoxamina (DFO) , que se ha aprobado clïnicamente para el tratamiento de enfermedades de sobrecarga de hierro, incluyendo la º-talasemia (Buss, J. L., B. T. Greene, J. Turner, F. M. Torti and S. V. Torti (2004) Curr Top Med Chem 4 (15) : 1623-35) , tambiïn se ha demostrado que es un inhibidor de la RR. Ademïs, se ha demostrado que algunos tumores agresivos son sensibles a la quelaciïn del hierro por la DFO. Sin embargo, el uso de la DFO sin embargo, es costoso, requiere una prolongaciïn de la administraciïn subcutïnea y el compuesto presenta una semivida corta. Ademïs de la DFO, otros quelantes del hierro con actividad antiproliferativa se encuentran en desarrollo, incluyendo Triapina (actualmente en fase II) , 311, tachpiridina, y O-Trensox (Richardson, ant.) . No obstante, la triapine puede tener una utilidad limitada como terapia contra el cïncer, ya que presenta una baja solubilidad en agua.

La patente de EE.UU. 6.589.966 describe una nueva familia de quelantes de metales caracterizados como compuestos quïmicos hexadentados, que se unen al hierro y que tienen actividad antiproliferativa contra las cïlulas tumorales. Ademïs, la solicitud de patente de EE.UU. 2002/0119955 describe compuestos adicionales basadas en 3-AP (estructuralmente relacionado con Triapina) que pueden exhibir una utilidad terapïutica adecuada en el tratamiento de neoplasias, incluyendo el cïncer.

La quelaciïn de cinc tambiïn puede ser un importante, pero relativamente inexplorado, determinante de los efectos biolïgicos de los quelantes de hierro. Por ejemplo, el quelante del hierro tacpiridina, que se encuentra en investigaciïn preclïnica como potencial agente contra el cïncer, quela el cinc ademïs del hierro, y esto puede desempeïar un papel en su citotoxicidad (Zhao, R., et al. (2004) Biochem Pharmacol 67 (9) : 1677-88.) . El cinc tiene funciones catalïticas y estructurales en cientos de enzimas dependientes de cinc y motivos en dedo de cinc de proteïnas implicadas en la interacciïn ADN-proteïna o proteïna-proteïna. En consecuencia, la deficiencia, asï como la sobrecarga de cinc, causan una amplia variedad de alteraciones en el metabolismo de los mamïferos. Depletion of zinc in vitro has been shown to cause apoptosis (McCabe, M. J., Jr., S. A. Jiang and S. Orrenius (1993) Lab Invest 69 (1) : 101-10) , para disminuir significativamente la proliferaciïn celular de las cïlulas de carcinoma de colon HT-29 (Kindermann, B., F. Doring, M. Pfaffl y H. Daniel (2004) J Nutr 134 (1) : 57-62) , y para alterar la progresiïn del ciclo celular (Chen, X., et al. X., et al. (2001) J Biol Chem 276 (32) : 30423-8.) .

Como alternativa, otros quelantes de metales pueden ejercer efectos antineoplïsicos a travïs de la formaciïn de complejos de quelato citotïxicos Esto ocurre predominantemente con los metales activos en rïdox, hierro y cobre. Por ejemplo, las bleomicinas son una familia de antibiïticos glucopeptïdicos con actividad antitumoral. Se utilizan clïnicamente en la quimioterapia de combinaciïn contra linfomas, carcinomas de cïlulas escamosas y tumores de cïlulas germinales. Contienen un dominio de uniïn a ADN y un dominio de uniïn a metal, que se une a Fe (II) o Cu (I) . La presencia de oxïgeno y un reductor conduce a la escisiïn del ADN a travïs de la formaciïn de radicales intermedios (Chen, J. and J. Stubbe (2005) Nat Rev Cancer 5 (2) : 102-12) . La triapina quelante del hierro, que inhibe la RR a travïs de la quelaciïn del hierro, tambiïn puede daïar la RR y otras molïculas vitales mediante la generaciïn de radicales libres tras la formaciïn del complejo de hierro (Chaston, T. B., et al. (2003) Clin Cancer Res 9 ( 1) : 402-14) . El uso de conjugados de bleomicina dirigiendo un compuesto a un tumor del cuerpo se describe en la patente de EE.UU. Nï

4.758.421.

La citotoxicidad del quelante de metales, 10-fenantrolina (OP) se ha atribuido a su capacidad para funcionar tanto como quelante como de tipo quelato. Como un quelante, se ha demostrado que combina con cinc o hierro y, por lo tanto, inhibe las enzimas que requieren cinc o hierro para su actividad. Como alternativa, se ha informado que los complejos de quelatos de 1, 10-fenantrolina con iones metïlicos divalentes son citotïxicos (Shulman, A. y G. A. Laycock (1977) Chem Biol Interact 16 (1) : 89-99.) y el quelato de cobre estimula la degradaciïn del ADN (Downey, K. M., B. G. Que y A. G. So (1980) . Biochem Biophys Res Commun 93 (1) : 264-70) . ) . Los complejos de cobre-OP pueden unirse no covalentemente a la ranura menor del ADN y catalizar la escisiïn de la cadena sencilla de los ïcidos nucleicos en presencia de perïxido de hidrïgeno y un reductor (Sigman, , D. S., et al. (1979) J Biol Chem 254 (24) : 12269-72) .

Los complejos de cobre-OP se utilizan frecuentemente como nucleasas quïmicas y se han generado agentes de 5 escisiïn de ADN de alta especificidad mediante la uniïn a las proteïnas de uniïn a ADN especïficas desecuencia (Pan,

C. Q., R. Landgraf and D. S. Sigman (1994) Mol Microbiol 12 (3) : 335-42.) . OP tambiïn se usa ampliamente como inhibidor de metaloproteasas de la matriz (Spring-man E. B., et al. (1995) Biochemistr y 34 (48) : y se ha demostrado que inhiben la sïntesis de los anclajes de glicofosfatidilinositol ( (Mann, K. J. and D. Sevlever (2001) Biochemistr y 40 (5) : 1205-13) mediante quelaciïn de cinc.

La alteraciïn de la regulaciïn de los genes supresores de tumores se ha implicado en el desarrollo de cïncer, pero el papel exacto de estos genes supresores de tumores en el desarrollo de cïncer todavïa no estï claro. La familia de genes del factor de tipo Krïppel (KLF) es una familia de factores de transcripciïn que contienen dedo de cinc conservado evolutivamente que tienen diversos papeles reguladores en el crecimiento, proliferaciïn diferenciaciïn y 15 embriogïnesis de las cïlulas (Ghaleb, A. M., et al. (2005) Cell Res 15 (2) : 92-6) . ) . Los KLF pueden funcionar como activadores de la transcripciïn o como represores o como ambos, dependiendo de su interacciïn con los coactivadores o los correpresores a travïs de determinados dominios en el extremo amino, los promotores a los que se unen y el contexto celular de su funciïn (Kaczynski, J., T. Cook y R. Urrutia (2003) Genome Biol 4 (2) : 206) . Se piensa que varios miembros de la familia de KLF son supresores tumorales y estïn implicados en la carcinogïnesis. Por ejemplo, se encuentra regulaciïn por disminuciïn de KLF4 en cïncer de colon (Dang DT, et al. (2000) FEBS Lett,

476: 203-7) and down-regulation of KLF5 and KLF10 occurs in breast cancer (Chen C, et al. (2002) Oncogene, 21: 6567-72) . Subramaniam M, et al. (1998) J Cell Biochem, 68: 226-36) . Tambiïn se ha sugerido que KLF6 es un candidato al gen supresor tumoral en la localizaciïn cromosïmica 10p15 y se observan frecuentes mutaciones en el adenocarcinoma de prïstata. Ademïs, Ademïs, tambiïn se ha mostrado que KLF6 transactiva WAF1, que codifica un inhibidor de quinasa dependiente de ciclina del ciclo celular a travïs de una vïa independiente de p53 (Narla G, et al. (2001) Science, 294: 2563-6) .

La alteraciïn de a regulaciïn de KLF4 se ha relacionado con otros cïnceres distintos al cïncer de colon tanto in vitro and in vivo, lo que sugiere que KLF4 puede tener un efecto supresor tumoral. En el cïncer colorrectal, el nivel de ARNm de KLF4 se reduce en comparaciïn con tejidos equivalentes normales (Dang et al. ( (2000) , citado anteriormente) , y la reexpresiïn de KLF4 en una lïnea celular de cïncer colorrectal tiene como resultado una disminuciïn de... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto de fïrmula (I) :

o una sal del mismo. en la que:

R1, R3, R4, R5, y R7 son hidrïgeno R2 es halïgeno, y . R6 es alquilo C1-C4.

2. El compuesto de acuerdo con la reivindicaciïn 1, en el que dicho compuesto se selecciona del grupo que consiste en 3. El compuesto de acuerdo con la reivindicaciïn 2, en el que dicho compuesto es:

4. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dicha sal es una sal de HCl. 5

5. Una composiciïn farmacïutica que comprende el compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 y un vehïculo farmacïuticamente aceptable.

6. La composiciïn farmacïutica de acuerdo con la reivindicaciïn 5, en el que dicha composiciïn es una formulaciïn 10 liposomal o de micelas de lïpidos.

7. La composiciïn farmacïutica de acuerdo con la reivindicaciïn 5 o 6, en la que dicha composiciïn se formula para la administraciïn intravenosa.

8. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para uso en el tratamiento de cïncer en un sujeto que lo necesite.

9. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para uso en la inhibiciïn de la proliferaciïn de cïlulas de cïncer en un sujeto que lo necesite. 20

10. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para uso en la inducciïn de la apoptosis en una cïlula de cïncer.

11. El compuesto para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 8 a 10, en el que dicho cïncer es un 25 tumor sïlido.,

12. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicaciïn 11, en el que dicho tumor sïlido se selecciona del grupo de: tumor de pulmïn macrocïtico, tumor de colon tumor de prïstata, tumor de mama, y melanoma.

13. El compuesto para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 8 a 10, en el que dicho cïncer es la leucemia.

14. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para uso en el aumento de expresiïn del

factor de tipo Krïppel 4 (KLF4) en una cïlula de cïncer. 35

15. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicaciïn 14, en el que dicho cïncer es la leucemia. cïncer de vejiga o cïncer del tracto gastrointestinal.

16. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicaciïn 15, en el que dicho cïncer del tracto gastrointestinal es 40 cïncer de colon o cïncer colorrectal.

17. Uso de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 en quelantes de iones de metales de transiciïn en una aplicaciïn no terapïutica.

18. El uso de acuerdo con la reivindicaciïn 17, en el que dichos iones de metales de transiciïn son: iones de cinc, iones de hierro o iones de cobre.

19. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 8 a 16, en el que dicho compuesto se formula como una formulaciïn liposomal o de micelas de lïpidos. 50

20. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 8 a 16 y 19, en el que dicho compuesto se formula para administraciïn intravenosa.