Vacunas inyectables contra múltiples serogrupos de meningococos.

Una composición inmunógena inyectable que comprende sacáridos capsulares de los serogrupos A,

C, W135 e Y de la Neisseria meningitidis, en donde (i) dichos sacáridos capsulares están conjugados de forma separada a una proteína portadora con un grupo de enlace y después mezcladas; (ii) los conjugados tienen una proporción sacárido:proteína (p/p) con exceso de proteína; y (iii) la composición comprende al menos 10 μg y ≤ 25 μg de sacárido capsular meningococo por dosis.

Vacunas inyectables contra múltiples serogrupos de meningococos

CAMPO TECNICO

La presente invención pertenece al campo de las vacunas, particularmente frente a la meningitis bacteriana.

TECNICA ANTECEDENTE

Neisseria meningitidis es un patógeno humano gramnegativo [1] que provoca meningitis bacteriana. Está estrechamente emparentado con N. gonorrhoeae, auNOue una característica que diferencia claramente a los meningococos es la presencia de una capsula de polisacáridos que está presente en todos los meningococos patógenos.

Basándonos en el polisacárido capsular de los organismos, se han identificado doce serogrupos de N. meningitidis (A, B, C, H, I, K, L, 29E, W135, X, Y & Z) . EI serogrupo A ('MenA') es la causa más habitual de enfermedades epidémicas en el África subsahariana. Los serogrupos B & C son responsables de la mayoría de los casos en los países desarrollados, mientras que los casos restantes están causados por los serogrupos W135 & Y.

AI igual que se usa para la clasificación, los polisacáridos capsulares se han utilizado para la vacunación. Durante muchos añoes se ha conocido una vacuna tetravalente inyectable de polisacáridos capsulares de los serogrupos A, C, Y & W135 [2, 3] y está autorizada para su uso en seres humanos. AuNOue es eficaz en adolescentes y adultos, induce una respuesta inmunitaria pobre y de corta duración y protección, y no puede usarse en niños [por ejemplo, 4]. Los polisacáridos de esta vacuna no están conjugados y están presentes en una proporción ponderal de 1:1:1:1 [5]. Mencevax ACWYTM y MenomuneTM contienen ambos 50 μg de cada polisacárido purificado una vez reconstituidos a partir de sus formas liofilizadas. Los sacáridos de la capsula de los serogrupos A, C, W135 & Y también se han combinado en forma de conjugados [6-9] para dar vacunas tetravalentes, por ejemplo, el producto no coadyuvado MenactraTM.

Los oligosacáridos conjugados del serogrupo C se han aprobado para su uso en seres humanos, incluyendo Menjugate™ [10, 11], Meningitec™ y NeisVac-CTM. Los productos Menjugate™ y MeniNOitec™ tienen antígenos de 25 oligosacáridos conjugados con un portador CRM197 , mientras que NeisVac-CTM usa el polisacárido completo (des-O-acetilado) conjugado con un portador toxoide tetánico,

Permanece sin embargo, la necesidad de mejoras en las vacunas conjugadas frente a los serogrupos A, W 135 e Y, y en su elaboración. Esa necesidad es abordada por los productos, procesos y usos desvelados en la referencia 7, pero aun queda ámbito para modificaciones y mejoras adicionales.

DIVULGACION DE LA INVENCION

La invención se refiere a una composición inmunógena inyectable que comprende sacáridos capsulares de al menos dos de los serogrupos A, C, W135 e Y de la N.meningitidis, en donde los mencionados sacáridos capsulares están conjugados con proteína (s) portadora (s) y/o son oligosacáridos, y en donde la composición comprende º50 μg de sacáridos meningococos por dosis. Esta invención proporciona específicamente la composición inmunógena inyectable de la reivindicación 1.

La invención también proporciona dicha composición inmunógena inyectable, en la que la composición comprende adicionalmente un antígeno de uno o más de: (a) serogrupo B de N. meningitidis; (b) Haemophilus influenzae de tipo B; y/o (c) Streptococcus pneumoniae.

Los antígenos incluidos en ocho composiciones preferidas de la invención son: (1) serogrupos A, C, W135 &Y de N. meningitidis; (2) serogrupos A, B, C, W135 & Y de N. meningitidis; H. influenzae de tipo B y serogrupos A, C, W135 &Y de N. meningitidis; H. influenzae de tipo B y serogrupos A, B, C W135 & Y de N. meningitidis; S. pneumoniae y serogrupos A, C, W135 & Y de N. meningitidis; S. pneumoniae y serogrupos A, B, C, W135 & Y de N. meningitidis; H. influenzae de tipo B, S. pneumoniae y serogrupos A, C, W135 &Y de N. meningitidis H. influenzae de tipo B, S. pneumoniae y serogrupos A, B, C, W135 &Y de N. meningitidis.

Los antígenos de sacáridos de las composiciones de la invención son preferiblemente oligosacáridos. Los antígenos de sacáridos de las composiciones de la invención son muy preferiblemente oligosacáridos conjugados.

Mezclas de sacáridos de meningococos Las composiciones de la invención comprenden sacáridos capsulares de los serogrupos A, C, W135 e Y de N. meningitidis. Se prefiere que la eficacia protectora de los antígenos sacáridos individuales no se elimine mediante su combinación, auNOue puede reducirse la inmunogenicidad real (por ejemplo, los títulos de ELISA) .

La proporción (p/p) de sacárido MenA: sacárido MenC puede ser mayor de 1 (por ejemplo, 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 10:1 o más alta) .

La proporción (p/p) de sacárido MenY: sacárido MenW135 puede ser mayor de 1 (por ejemplo, 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 10:1 o más alta) y/o la proporción de sacárido MenY. sacárido MenC puede ser menor de 1 (por ejemplo, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5 o más baja) .

Una cantidad típica de cada antígeno de sacáridos de meningococo por dosis está entre 1 μg y 20 μg, por ejemplo, alrededor de 1 μg, alrededor de 2, 5 μg, alrededor de 4 μg, alrededor de 5 μg, o alrededor de 10 μg (expresado como sacárido) .

Las proporciones preferidas (p/p) para sacáridos de los serogrupos A:C:W135:Y son 1:1:1:1; 1:1:1:2; 2:1:1:1; 4:2:1:1; 8:4:2:1; 4:2:1:2; 8:4:1:2; 4:2:2:1; 2:2:1:1; 4:4:2:1; 2:2:1:2; 4:4:1:2; y 2:2:2:1. Las proporciones preferidas (p/p) para sacáridos de los serogrupos C:W135:Y son: 1:1:1; 1:1:2; 1:1:1; 2:1:1; 4:2:1; 2:1:2; 4:1:2; 2:2:1; and 2:1:1. Se prefiere usar una masa sustancialmente igual de cada sacárido.

Purificación de los polisacáridos capsulares Los polisacáridos capsulares de los meningococos se preparan típicamente mediante un proceso que comprende las etapas de precipitación del polisacárido (por ejemplo, usando un detergente catiónico) , fraccionamiento con etanol, extracción fría con fenol (para eliminar la proteína) y ultracentrifugación (para eliminar el LPS) [por ejemplo ref. 15].

Un proceso más preferido [7], implica sin embargo la precipitación del polisacárido seguido de una solubilización del polisacárido precipitado usando un alcohol inferior. La precipitación puede conseguirse usando un detergente catiónico tal como sales de tetrabutilamonio y de cetiltrimetilamonio (por ejemplo, las sales de bromuro) ,

o bromuro de hexadimetrina y sales de miristiltrimetilamonio. Particularmente se prefiere el bromuro de cetiltrimetilamonio (Cetyltrimethylammonium bromide, 'CTAB') [16]. La solubilización del material precipitado puede conseguirse usando un alcohol inferior tal como metanol, propan-t-ol, propan-z-ol, butan-t-ol, butan-z-ol, 2-metilpropan-1-01, 2-metilpropan-z-ol, dioles, etc., pero el etanol es particularmente adecuado para solubilizar complejos de CTAB-polisacárido. EI etanol se añade preferiblemente al polisacárido precipitado para dar una concentración final de etanol (basada en el contenido total de etanol y agua) de entre el 50% y el 95%.

Después de la resolubilización, el polisacárido puede tratarse adicionalmente para eliminar contaminantes. Esto es particularmente importante en situaciones en las que no es aceptable siquiera una contaminación menor (por ejemplo, para la producción de vacunas humanas) . Esto implicará típicamente una o más etapas de filtración, por ejemplo, puede usarse filtración profunda, filtración a través de carbona activo, filtración por tamaños y/o ultrafiltración.

Una vez filtrado para eliminar contaminantes, el polisacárido puede precipitarse para un tratamiento y/o procesado adicionales. Esto puede conseguirse convenientemente mediante el intercambio de cationes (por ejemplo, mediante la adición de sales de calcio 0 de sodio) .

Como altemativa a la purificación, los sacáridos capsulares de la presente invención pueden obtenerse mediante una síntesis total o parcial, por ejemplo, la síntesis de Hib se desvela en la ref. 17, y la síntesis de MenA en la ref. 18.

EI polisacárido puede modificarse químicamente. Por ejemplo, puede modificarse para sustituir uno o más grupos hidroxilo por grupos bloqueantes. Esto es particularmente útil para reducir la hidrólisis del serogrupo A [19] (véase a continuación) . También puede realizarse una des-O-acetilación de los sacáridos,

Serogrupo B de N. meningitidis Algunas composiciones de la invención incluyen un antígeno del serogrupo B de N. meningitidis. AI contrario que los serogrupos A, C, W135 e Y, el sacárido capsular de MenB no es adecuado para su uso como inmunógeno en seres humanos debido a su similitud con los antígenos propios.... [Seguir leyendo]

1. Una composición inmunógena inyectable que comprende sacáridos capsulares de los serogrupos A, C, W135 e Y de la Neisseria meningitidis, en donde (i) dichos sacáridos capsulares están conjugados de forma separada a una proteína portadora con un grupo de enlace y después mezcladas; (ii) los conjugados tienen una proporción sacárido:proteína (p/p) con exceso de proteína; y (iii) la composición comprende al menos 10 μg y 25 μg de sacárido capsular meningococo por dosis.

2. La composición de la reivindicación 1, en donde dentro de cada dosis los antígenos sacáridos del serogrupo individual A, C, W135 5 e Y tienen una proporción de peso de 1:1:1:1 ó 2:1:1:1.

3. La composición de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el sacárido capsular del serogrupo A está modificado para reemplazar uno o más grupos hidroxilo con grupos de bloqueo.

4. La composición de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, comprendiendo además un antígeno no meningococo, no neisserial.

5. La composición de la reivindicación 4, en donde el antígeno es de neumococo, virus de la hepatitis A, virus de la hepatitis B, B. pertussis difteria, tétano, polio y/o H.influenzae.

6. La composición de las reivindicaciones 1-3, comprendiendo además un antígeno de proteína meningococo.

7. La composición de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde los sacáridos capsulares en la composición son oligosacáridos.

8. La composición de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, comprendiendo además un coadyuvante de sal de aluminio.

9. La composición de cualquiera de las reivindicaciones anteriores, para el uso en elevar una respuesta inmune en un paciente.

10. El uso de sacáridos capsulares de los serogrupos A, C, W135 e Y de la Neisseria meningitidis en la fabricación de un medicamento de composición inmunógena inyectable para elevar una respuesta inmune protectora contra la enfermedad del meningococo en un paciente, en donde: (i) dichos sacáridos capsulares están conjugados de forma separada a una proteína portadora con un grupo de enlace y después mezcladas; (ii) los conjugados tienen una proporción sacárido:proteína (p/p) con exceso de proteína; y (iii) la composición comprende al menos 10 μg y 25 μg de sacárido capsular meningococo por dosis.

11. El uso de la reivindicación 10, en donde el medicamento es una composición de cualquiera de las reivindicaciones 2 a 8.