Uso de polipéptidos de aprotinina como portadores en conjugados farmacéuticos.

Un conjugado, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, que comprende:

(a) un polipéptido que comprende Angiopep-2 (SEQ ID NO:97), y

(b) un compuesto seleccionado del grupo que consiste en un fármaco, una proteína, un marcador y unpéptido, donde dicho compuesto está conjugado con dicho polipéptido, con la condición de que dichoconjugado no sea un conjugado de:

(a) un polipéptido que consiste en la SEQ ID NO:97 o SEQ ID NO:74, y

(b) 125yodo.

Uso de polipéptidos de aprotinina como portadores en conjugados farmacéuticos

Campo de la Invención La presente invención se refiere a conjugados portadores de Angiopep-2 y composiciones farmacéuticas y su uso para incrementar la potencia de fármacos y modificar la farmacocinética de compuestos. De manera más particular, la presente invención se refiere a conjugados que comprenden el portador descrito en la presente y su uso en el tratamiento del cáncer.

Antecedentes de la Invención El progreso clínico en el tratamiento de tumores primarios ha sido lento y uno de los problemas asociados con estos tumores es su débil respuesta a los fármacos contra el cáncer. La efectividad de la quimioterapia y la inmunoterapia ha sido afectada por el fenotipo inherente o adquirido de resistencia a fármacos múltiples (MDR, por sus siglas en inglés) de las células cancerosas. Un mecanismo implicado en el fenotipo MDR es ocasionado por la expresión de la P-glicoproteína (P-gp) , un transportador de membrana que bombea hacia afuera diversos fármacos anticancerosos de células que expresan MDR1. También se expresa P-gp en un gran número de tejidos secretores normales, tales como riñón, hígado e intestino. Esta bomba de eflujo es expresada fuertemente en capilares del cerebro donde su expresión estuvo localizada principalmente en la membrana luminal de las célula endoteliales que recubren los capilares. En seres humanos, P-gp es codificada por dos genes MDR: MDR1 y MDR3. P-gp codificada por el gen MDR1 humano confiere el fenotipo de resistencia, mientras que P-gp codificada por el gen MDR3 humano no lo hace. De esta manera, P-gp puede considerarse como un guardián que limita la entrada de fármacos expulsándolos fuera del cerebro o fuera de las células cancerosas, impidiendo que alcancen concentraciones citotóxicas.

Las células cancerosas que forman metástasis del cerebro se originan en su mayoría a partir de cánceres de pulmón o de mama, carcinoma colorrectal, melanoma y tumores de los órganos urinarios. Estas metástasis, que a menudo ocurren después de cirugía, tratamiento de quimioterapia primaria o radioterapia, son quimiorresistentes. La quimioterapia contra metástasis en el cerebro puede ser efectiva únicamente si fuese efectiva para sus tumores originarios correspondientes. Por ejemplo, se demostró que las metástasis en el cerebro originarias de carcinomas de pulmón de células pequeñas y células germinales responden con tasas similares a las metástasis en otros sitios.

La resistencia a fármacos puede ser una propiedad intrínseca de las células tumorales o puede ser adquirida después del tratamiento. La presencia de la bomba de eflujo de P-gp codificada por MDR1 (también denominada en la presente glicoproteína P, P-gp MDR1 o MDR1) ha sido reportada en la mayoría de los tumores de cerebro primarios donde la mayoría de los gliomas y más particularmente células endoteliales de capilares recién formados fueron teñidos positivos para P-gp MDR1. De esta manera, diversos estudios apoyan la idea de que el fenotipo de resistencia a fármacos múltiples puede ser ocasionado no solamente por la expresión de P-gp en células cancerosas, sino también a partir de su expresión en las células endoteliales recién formadas en los tumores. También se descubrió que los niveles de MDR1 eran significativamente inferiores en metástasis de cerebro a partir de melanomas y de adenocarcinomas de pulmón. Además, se demostró que los tratamientos previos a la cirugía no tienen un impacto importante sobre los niveles de MDR1 en metástasis de cerebro a partir de melanomas, pues eran idénticos en pacientes que recibieron radioterapia, quimioterapia, o ambos tratamientos. En metástasis de pulmón, solamente se detectó MDR1 en pacientes que recibieron quimioterapia, indicando que estos tratamientos previos pueden haber inducido su expresión, dando como resultado un fenotipo MDR adquirido. La falta de expresión de MDR1 en tumores de pulmón primarios y en sus metástasis de cerebro correspondientes indica también que estas metástasis no adquieren los mismos niveles de expresión de P-gp durante su crecimiento que las encontradas en tejido normal del cerebro. Estos resultados también indican que los niveles de MDR1 en células endoteliales de capilares en metástasis de cerebro difieren de los de los tumores de cerebro primarios. La falta de expresión de MDR1 en algunas metástasis de cerebro puede explicar en parte porqué algunas de ellas son más sensibles a los fármacos quimioterapéuticos que los tumores de cerebro primarios.

Los métodos para transportar un compuesto a través de la barrera hematoencefálica han sido descritos en la solicitud de patente internacional PCT/CA2004/000011, publicada el 22 de julio de 2004 bajo la publicación WO 2004 060403. Brevemente, en este documento, aprotinina, fragmentos y análogos de aprotinina fueron presentados como un sistema de entrega de fármacos para el sistema nervioso central (CNS, por sus siglas en inglés) y para tratar enfermedades relacionadas con el CNS.

Continúa existiendo una necesidad para incrementar la potencia de los fármacos contra el cáncer.

La presente invención busca satisfacer estas y otras necesidades.

Compendio de la Invención La presente invención se refiere, en un aspecto de esta, a un conjugado, o sal farmacéuticamente aceptable de este, que comprende:

(a) un polipéptido que comprende Angiopep-2 (SEQ ID NO:97) , y

(b) un compuesto seleccionado del grupo que consiste en un fármaco, una proteína, un marcador y un péptido, donde dicho compuesto está conjugado con dicho polipéptido, con la condición de que dicho conjugado no sea un conjugado de: (a) un polipéptido que consiste en la SEQ ID NO:97 o SEQ ID NO:74, y

(b) 125yodo.

El polipéptido puede tener de 19 a 50 aminoácidos de longitud. Los polipéptidos de la presente invención pueden estar amidados, es decir, pueden tener una secuencia de aminoácidos amidada.

La patente de EE. UU. N.o 5, 807, 980 describe un polipéptido que es identificado en la presente como la SEQ ID NO.:102.

La patente de EE. UU. N.o 5, 780, 265 describe un polipéptido que es identificado en la presente como la SEQ ID NO.:103.

La secuencia de aminoácidos de aprotinina (SEQ ID NO.:98) , la secuencia de aminoácidos de Angiopep-1 (SEQ ID NO.:67) , así como algunas secuencias de análogos biológicamente activos pueden encontrarse, por ejemplo, en la solicitud de patente internacional PCT/CA2004/000011, publicada el 22 de julio de 2004 bajo publicación internacional WO 2004/060403. De manera adicional, la publicación internacional WO 2004/060403 describe un polipéptido que es identificado en la presente como SEQ ID NO.:104.

La patente de EE. UU. N.o 5, 118, 668 describe un polipéptido que tiene la secuencia ilustrada en la SEQ ID NO.:105.

De acuerdo con la presente invención, el portador puede comprender el péptido 97 (es decir, SEQ ID NO.: 97 (Angiopep-2) ) .

La presente invención se refiere particularmente a un conjugado o una composición de acuerdo con las reivindicaciones que es útil para modificar y/o mejorar la farmacocinética (in vivo) de un compuesto.

De acuerdo con la presente invención, el compuesto puede ser seleccionado, por ejemplo, del grupo que consiste en un marcador, una proteína, un péptido y un fármaco.

También de acuerdo con la presente invención, el fármaco puede ser, por ejemplo, un fármaco contra el cáncer.

De acuerdo con la presente invención, el fármaco contra el cáncer puede ser conjugado con el portador de Angiopep-2, con ello formando un conjugado. El conjugado puede comprender, por ejemplo, al menos una molécula de fármaco contra el cáncer para cada molécula portadora. El conjugado puede comprender, por ejemplo, al menos dos moléculas de fármaco contra el cáncer por cada molécula portadora. El conjugado puede comprender, por ejemplo, al menos tres moléculas de fármaco contra el cáncer por cada molécula portadora.

El portador puede promover la acumulación del fármaco en un tejido tal como, por ejemplo, un riñón (tejido de riñón) , un hígado (tejido de hígado) , un ojo (tejido de ojo) , y los pulmones (tejido de pulmón) , de un individuo.

El portador puede modificar o mejorar la bio-disponibilidad del compuesto.

El portador puede también cambiar la (habitual) distribución en tejido del compuesto.

El portador puede también promover la acumulación del fármaco en el cerebro (tejido de cerebro) de un individuo, el cerebro puede ser un cerebro tumoral.

El cerebro puede comprender una célula cancerosa de pulmón.

El portador puede promover la acumulación del fármaco en... [Seguir leyendo]

1. Un conjugado, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, que comprende:

(a) un polipéptido que comprende Angiopep-2 (SEQ ID NO:97) , y

(b) un compuesto seleccionado del grupo que consiste en un fármaco, una proteína, un marcador y un

péptido, donde dicho compuesto está conjugado con dicho polipéptido, con la condición de que dicho conjugado no sea un conjugado de:

(a) un polipéptido que consiste en la SEQ ID NO:97 o SEQ ID NO:74, y

(b) 125yodo.

2. El conjugado de la reivindicación 1, donde dicho polipéptido es de 19 a 50 aminoácidos de longitud.

3. El conjugado de la reivindicación 1 o 2, donde dicho polipéptido consiste en Angiopep-2 (SEQ ID NO:97) .

4. Un conjugado, o sal farmacéuticamente aceptable de este, que comprende:

(a) un polipéptido que comprende Angiopep-2 (SEQ ID NO:97) , y

(b) un fármaco contra el cáncer seleccionado del grupo que consiste en Taxol, vinblastina, vincristina, etopósido, doxorrubicina, ciclofosfamida, Taxotere, melfalán y clorambucil, o un anticuerpo, un fragmento de anticuerpo, o un fármaco peptídico o a base de proteína, donde dicho fármaco contra el cáncer, dicho anticuerpo, dicho fragmento de anticuerpo, o dicho fármaco peptídico o a base de proteína está conjugado con dicho polipéptido.

5. El conjugado de la reivindicación 4, donde 1, 2 o 3 moléculas de Taxol están conjugadas con dicho polipéptido.

6. El conjugado de la reivindicación 5, donde dichas moléculas de Taxol están conjugadas a través del grupo amino 20 N-terminal y a través de los grupos amino en las lisinas en las posiciones 10 y 15 de la secuencia de Angiopep-2.

7. El conjugado de la reivindicación 4, donde dichas molecúlas de Taxol están conjugadas con dicho polipéptido tal como se muestra a continuación:

8. El conjugado de la reivindicación 7, donde:

(a) dicho polipéptido consiste en Angiopep-2 (SEQ ID NO:97) , 25 (b) tres (3) moléculas de Taxol están conjugadas con dicho polipéptido, y

(c) dichas moléculas de Taxol están cada una conjugadas a través del grupo amino N-terminal y a través de los grupos amino en las lisinas en las posiciones 10 y 15 de la secuencia de Angiopep-2.

9. Una composición que comprende el conjugado de las reivindicaciones 1-8.

10. Una composición que comprende:

(a) .

(i) . un conjugado o sal farmacéuticamente aceptable de este, comprendiendo dicho conjugado:

(A) . un polipéptido que comprende Angiopep-2 (SEQ ID NO:97) , y

(B) . un compuesto seleccionado del grupo que consiste en un fármaco, una proteína, un marcador y un péptido, donde dicho compuesto está conjugado con dicho polipéptido, o (ii) . Un conjugado de las reivindicaciones 1-8; y (b) . un éster polioxietilénico de un ácido graso.

11. La composición de la reivindicación 10, donde el éster polioxietilénico es Tween 20 o Tween 80.

12. La composición de la reivindicación 10, donde el éster polioxietilénico es Solutol®HS-15.

13. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 9, 10 o 12 que comprende además manitol o un tampón.

14. Una composición farmacéutica que comprende el conjugado de cualquiera de las reivindicaciones 1-8 o la composición de cualquiera de las reivindicaciones 9, 10 o 12 y un portador farmacéuticamente aceptable.

15. Un conjugado que comprende:

(a) un polipéptido que comprende Angiopep-2 (SEQ ID NO:97) , y

(b) un compuesto seleccionado del grupo que consiste en un fármaco, una proteína, un marcador y un péptido, donde dicho compuesto está conjugado con dicho polipéptido; o el conjugado de cualquiera de las reivindicaciones 1-8; o

la composición de cualquiera de las reivindicaciones 9-13 para utilizar en un método para tratar el cáncer o cáncer metastásico.

16. El conjugado o la composición para utilizar como se describe en la reivindicación 15, donde dicho cáncer es resistente a fármacos múltiples.

17. El conjugado o la composición para utilizar como se describe en la reivindicación 15 o 16, donde dicho cáncer es un cáncer de cerebro, preferentemente un glioblastoma o un glioma.

18. El conjugado o la composición para utilizar como se describe en la reivindicación 15 o 16, donde dicho cáncer está ubicado fuera del cerebro.

19. El conjugado o la composición para utilizar como se describe en la reivindicación 18, donde dicho cáncer es un tumor de pulmón, un tumor de mama, un tumor de riñón, un tumor de ojo, un tumor de hígado, un tumor colorrectal,

o un tumor de un órgano urinario.

20. El conjugado o la composición para utilizar como se describe en cualquiera de las reivindicaciones 15-19, donde dicho cáncer es un cáncer metastásico de un tumor de mama, un tumor de pulmón, un melanoma o un tumor de cerebro.

21. El conjugado o la composición para utilizar como se describe en cualquiera de las reivindicaciones 15-20, donde dicho polipéptido promueve la acumulación de la proteína o agente contra el cáncer en dicha célula cancerosa.

22. El conjugado o la composición para utilizar como se describe en cualquiera de las reivindicaciones 15-21, donde dicho cáncer incluye una célula que expresa un receptor relacionado con lipoproteína de baja densidad (LRP) , Pglicoproteína (P-gp) o ambos.

23. El conjugado o la composición para utilizar como se describe en cualquiera de las reivindicaciones 15-22, donde dicho método para tratar el cáncer implica la administración intraarterial, intranasal, intraperitoneal, intravenosa, intramuscular, subcutánea, transdérmica o per os.