Portador de fármacos y kit portador de fármacos para la inhibición de la fibrosis.

Medicina que comprende un portador de fármacos que comprende un retinoide como componente,

yun fármaco para controlar la actividad o el crecimiento de las células estrelladas,

en la que el fármaco para controlar la actividad o el crecimiento de las células estrelladas se elige de entre(i) el grupo que consiste en un ARNic, una ribozima, un ácido nucleico antisentido o un polinucleótido quimérico deADN/ARN, o un vector que expresa los mismos,

que se dirige a una molécula constituyente de la matriz extracelular producida por las células estrelladas o a una omás moléculas con la función de producir o de secretar la molécula constituyente de la matriz extracelular,(ii) el grupo que consiste en una ribozima o en un ARNic

que inhibe específicamente el TIMP,y

(iii) un inhibidor de la producción del TIMP que es un ácido nucleico antisentido del TIMP.

Portador de fármacos y kit portador de fármacos para la inhibición de la fibrosis Campo técnico La presente invención se refiere a una medicina que contiene un portador de fármacos usado en un sistema de administración de fármacos (DDS) para células estrelladas, y a un kit para preparar dicha medicina que comprende un retinoide como componente y un fármaco para controlar la actividad o el crecimiento de las células estrelladas, que es un fármaco dirigido a una molécula constituyente de la matriz extracelular secretada por células estrelladas, o a una o más moléculas con la función de producir o de secretar una molécula constituyente de la matriz extracelular, según se especifica en la reivindicación anexa 1.

Antecedentes de la técnica La fibrosis hepática está provocada por, aunque no se limita a, la activación de las células estrelladas hepáticas (HSC) como resultado de, por ejemplo, una enfermedad hepática vírica debida al virus de la hepatitis B o C, una esteatohepatitis no alcohólica, una diabetes relacionada con malnutrición, parásitos, enfermedades infecciosas tales como tuberculosis o sífilis, congestión intrahepática debida a una cardiopatía o a la curación de una herida de una lesión tisular, etc. dentro del hígado que acompaña a una alteración en el paso de la bilis, etc., y un exceso de producción y de secreción de la matriz extracelular (ECM) , tal como una pluralidad de tipos de moléculas de colágeno y de fibronectina depositándose en el tejido intersticial. La etapa final de la fibrosis hepática es la cirrosis hepática, y dado que provoca fallo hepático, carcinoma hepatocelular, etc., con objeto de evitarlos y/o de inhibir el progreso de los mismos, existe un deseo de desarrollar un portador de fármacos y un kit portador de fármacos para inhibir al menos la fibrosis hepática.

Adicionalmente en el páncreas se desarrolla una pancreatitis crónica como resultado de la fibrosis pancreática por el mismo mecanismo que el de la fibrosis hepática (Madro A y col., Med Sci Monit., julio de 2004; 10 (7) : RA166-70; Jaster R, Mol Cancer, 6 de octubre de 2004; 3 (1) : 26) . Sin embargo, todavía no se han encontrado medios eficaces para inhibir el progreso de la fibrosis pancreática o de la pancreatitis crónica.

Como medio eficaz para inhibir la fibrosis hepática o pancreática, existe la posibilidad de que las células estrelladas sean uno de los objetivos candidatos importantes (Fallowfield J A, Iredale J P, Expert Opin Ther Targets, octubre de 2004; 8 (5) : 423 -35; Pinzani M, Rombouts K. Dig Liver Dis., abril de 2004; 36 (4) : 231 -42) . En el proceso de la fibrosis, las células estrelladas son activadas por las citocinas de las células de Kupffer o células infiltrantes, y transformadas en células activadas, y existe una notable producción de matriz extracelular (ECM) . Las células estrelladas se conocen como las células de almacenamiento de la vitamina A, y pertenecen a la familia de los miofibroblastos. Por otro lado, las células estrelladas producen metaloproteinasa de la matriz (MMP) , su factor inhibidor (TIMP) , una citocina tal como TGF-β o PDGF, y un factor de crecimiento tal como HGF, y pueden jugar un papel importante en la fibrosis hepática. Las células estrelladas activadas aumentan la capacidad contráctil y están implicadas en la regulación del flujo sanguíneo, y adicionalmente, aumentan la expresión de varios tipos de receptores de citocinas y se vuelven muy sensibles a las citocinas.

Con respecto a los procedimientos terapéuticos de la fibrosis que se han intentado hasta la fecha actual, pueden 45 citarse el control del metabolismo del colágeno, la promoción del sistema de degradación del colágeno, la inhibición de la activación de las células estrelladas, etc. Incluyen la inhibición del TGFβ (conocido como un factor para la activación de las células estrelladas y la promoción de la producción de matriz extracelular (ECM) ) usando un receptor truncado de tipo II del TGFβ (Qi Z y col., Proc Natl Acad Sci EE.UU., 2 de marzo de 1999; 96 (5) : 2345 -9) , un receptor soluble de tipo II del TGFβ (George J y col., Proc Natl Acad Sci EE.UU., 26 de octubre de 1999; 96 (22) : 12719 -24) , HGF (traducción japonesa publicada 5-503076 de una solicitud PCX; Ueki K y col., Nat Med., febrero de 1999 Feb; 5 (2) : 226 -30) , etc., La promoción de la producción de metaloproteinasa de la matriz (MNP) mediante un vector que contiene el gen de HGF o de MMP (Iimuro Y y col., Gastroenterology 2003; 124: 445 -458) , la inhibición del TIMP, que es un inhibidor de la MMP, mediante un ARN antisentido, etc. (Liu W B y col., World J Gastroenterol., febrero de 2003; 9 (2) : 316 -9) , el control de la activación de las células estrelladas mediante un ligando de PPAR!

(Marra F y col., Gastroenterology, agosto de 2000; 119 (2) : 466 -78) o un antagonista del receptor de la angiotensina-II de tipo I (Yoshiji H y col., Hepatology, octubre de 2001; 34 (4 Pt 1) : 745 -50) , la inhibición del crecimiento de las células estrelladas mediante la inhibición de la acción del PDGF mediante un inhibidor de la cinasa de tirosina del PDGF, etc. (Liu X J y col., World J Gastroenterol., agosto de 2002; 8 (4) : 739 -45) y la inhibición del canal de sodio mediante amilorida (Benedetti A y col., Gastroenterology, febrero de 2001; 120 (2) : 545 -56) , etc., y la inducción de apoptosis en las células estrelladas mediante el Compuesto 861 (Wang L, y col., World J Gastroenterol., 1 de octubre de 2004; 10 (9) : 2831 -2835) , gliotoxina (Orr J G y col., Hepatology, julio de 2004; 40 (1) : 232 -42) , etc. Sin embargo, en todos los casos, dado que la especificidad de acción y/o la especificidad de órgano son bajas, existen problemas con los efectos y con los efectos secundarios.

Con respecto a la síntesis proteica de colágeno, existen muchos puntos sin clarificar con respecto a la vía metabólica, y un procedimiento terapéutico que use un fármaco que inhiba esto no ha sido establecido como un procedimiento terapéutico que sea eficaz y seguro con respecto a un cuerpo vivo en términos de efectos secundarios. Esto es, en un procedimiento dirigido a las moléculas implicadas en la producción de colágeno, la especificidad por el objetivo no puede mejorarse debido a la diversidad de la función de las moléculas, y la posibilidad de provocar efectos secundarios es alta. Si el colágeno, que es el producto final, pudiera ser inhibido directamente, esto sería razonable como procedimiento terapéutico común para procesos de fibrosis, y con objeto de hacer esto sería necesario controlar todos los diversos tipos de colágeno representados por los Tipos I a IV al mismo tiempo.

Como un medio eficaz para controlar simultáneamente la síntesis de los diversos tipos de moléculas de colágeno sin perder la especificidad por el colágeno, puede considerarse un procedimiento para controlar la función de la HSP47. La HSP47 es una chaperona molecular específica de colágeno que es esencial para el transporte intracelular y la maduración molecular, que son comunes a los procesos sintéticos de los diversos tipos de colágeno. Por lo tanto, si puede controlarse específicamente la función de la HSP47 en las células estrelladas, existe una posibilidad de inhibir la fibrosis hepática, pero no hay informes de que se haya intentado dicho procedimiento terapéutico.

Los presentes inventores prepararon una ribozima que controla específicamente la función de la HSP47 en un sistema celular, y demostraron que la producción y la secreción de los colágenos puede ser controlada por la ribozima al mismo tiempo (Sasaki H, y col. Journal of Immunology, 2002, 168: 5178 -83; Hagiwara S, y col. J Gene Med. 2003, 5: 784 -94) . Con objeto de controlar específicamente la síntesis de la HSP47, puede emplearse un ARNic, que es más fácil de optimizar que la ribozima. El ARNic (ARN interferente corto) usado en la presente memoria descriptiva es un término general para el ARN bicatenario usado en el ARNi (RNA interferente) . El ARNi es un fenómeno en el que el ARN bicatenario (ARN bicatenario; ARNbc) , que está formado a partir de ARN sentido y ARN antisentido, y es homólogo de un gen dado, destruye un segmento homólogo de un transcrito (ARNm) del gen. Originalmente fue mostrado en un experimento que usa un nematodo (Fire A, y col: Nature (1998) 391: 806 -811) , y

se ha demostrado que en las células de mamífero hay presente un mecanismo de inducción similar (Ui-Tei K, y col: FEBS Lett (2000) 479: 79 -82) . Adicionalmente, Elbashir y col. han demostrado que un ARNbc corto con una longitud del orden de 21 a 23 pb puede inducir un ARNi en un sistema celular de mamífero sin mostrar citotoxicidad (Elbashir S M, y col: Nature (2001) 411: 494 -498) . Sin embargo, con objeto de que... [Seguir leyendo]

1. Medicina que comprende un portador de fármacos que comprende un retinoide como componente, y un fármaco para controlar la actividad o el crecimiento de las células estrelladas,

en la que el fármaco para controlar la actividad o el crecimiento de las células estrelladas se elige de entre

(i) el grupo que consiste en un ARNic, una ribozima, un ácido nucleico antisentido o un polinucleótido quimérico de ADN/ARN, o un vector que expresa los mismos,

que se dirige a una molécula constituyente de la matriz extracelular producida por las células estrelladas o a una o más moléculas con la función de producir o de secretar la molécula constituyente de la matriz extracelular,

(ii) el grupo que consiste en una ribozima o en un ARNic

que inhibe específicamente el TIMP,

y

(iii) un inhibidor de la producción del TIMP que es un ácido nucleico antisentido del TIMP. 20

2. La medicina según la Reivindicación 1, en la que el componente retinoide se elige de entre vitamina A, tretinoina, adapaleno o palmitato de retinol, y Fenretinida (4-HPR) .

3. La medicina según una cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 2, en la que el portador de fármacos es 25 uno cualquiera de las formas micela polimérica, liposomas, emulsión, microesfera y nanoesfera.

4. La medicina según una cualquiera de las Reivindicaciones 1 a 3, en la que la molécula con la función de producir o de secretar la molécula constituyente de la matriz extracelular es la HSP47.

5. Una medicina para su uso en el tratamiento de una alteración relacionada con las células estrelladas, que comprende la composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que la alteración se elige del grupo formado por fibrosis, hepatitis y pancreatitis.

6. La medicina para su uso según la Reivindicación 5, en la que la fibrosis se elige de entre el grupo formado por fibrosis hepática, cirrosis hepática, fibrosis pancreática, fibrosis de las cuerdas vocales, fibrosis de la mucosa de las cuerdas vocales y fibrosis laríngea.

7. La medicina para su uso según la Reivindicación 5 ó 6, en la que la molécula con la función de producir o de secretar la molécula constituyente de la matriz extracelular es la HSP47. 40

8. La medicina para su uso según una cualquiera de las Reivindicaciones 5 a 7 en la que el componente retinoide se elige de entre vitamina A, tretinoina, adapaleno o palmitato de retinol, y Fenretinida (4-HPR) .

9. La medicina para su uso según una cualquiera de las Reivindicaciones 5 a 8, en la que el portador de 45 fármacos es uno cualquiera de las formas micela polimérica, liposomas, emulsión, microesfera y nanoesfera.

10. Un kit de preparación para la medicina según las reivindicaciones 5 a 9, comprendiendo el kit uno o más recipientes que contienen uno o más del fármaco para controlar la actividad o el crecimiento de las células estrelladas según se especifica en la reivindicación 1, un retinoide y un constituyente portador de fármacos distinto al

retinoide.