PACAP como marcador para el cáncer.

Un método para evaluar el cáncer de pulmón in vitro que incluye la medición en una muestra de la concentración de

(a) una proteína adaptadora de caspasa proapoptótica (PACAP) y/o los fragmentos de la misma,

y

(b) la utilización del resultado de la medición del paso (a) en la evaluación del cáncer, en la que dicha muestra es suero o plasma, y en la que una concentración aumentada de una proteína PACAP y/o los fragmentos de la misma, en comparación con controles normales, indica la presencia de cáncer de pulmón.

PACAP como marcador para el cáncer

La presente invención hace referencia a un método que facilita la evaluación del cáncer. Ésta describe la utilización de la proteína adaptadora de caspasas proapoptóticas (= PACAP) como marcador universal de diferentes tipos de cáncer. La PACAP facilita la evaluación del cáncer de pulmón (CP) , particularmente del carcinoma pulmonar de células no pequeñas (CPCNP) , pero también de otros tipos específicos de cáncer. Tales tipos específicos de cáncer son, por ejemplo, el cáncer de colon, vejiga, cérvix, ovario, endometrio, cabeza y cuello, mama, melanoma, páncreas, riñón, próstata, esófago, estómago o conducto biliar. Además, la presente invención hace especial referencia a un método para evaluar el cáncer a partir de una muestra líquida de suero o plasma, derivada de un individuo, mediante la medición de PACAP en dicha muestra. La medición de PACAP puede utilizarse, por ejemplo, en la detección precoz del cáncer o en la vigilancia de los pacientes que se someten a cirugía.

El cáncer sigue siendo un problema principal de salud pública pese al progreso en la detección y la terapia. Las células cancerosas se caracterizan por un crecimiento atípico e ilimitado que ya no está sometido a los mecanismos de control del crecimiento del cuerpo. La desdiferenciación y el crecimiento neoplásico de las células tumorales pueden conducir a la producción de las proteínas marcador asociadas a cáncer. Tales proteínas asociadas a cáncer pueden encontrarse tanto en los tejidos como en los fluidos corporales de un individuo que presenta células cancerosas. Habitualmente, sus niveles son bajos en los estadios precoces del progreso carcinogénico y aumentan durante la progresión de la enfermedad o, en algunos casos raros, las proteínas asociadas a cáncer muestran una disminución de su nivel en el curso de la progresión de la enfermedad. La identificación de nuevas proteínas asociadas a cáncer y su detección sensible es un reto tanto para los expertos técnicos como para los sistemas de salud pública. Los tipos de cáncer más prevalente son el cáncer de mama (CM) , el cáncer de pulmón (CP) y el cáncer colorrectal (CCR) .

Los enfoques terapéuticos más importantes para los tumores sólidos son:

a) la resección quirúrgica del tumor, b) la quimioterapia, c) la radioterapia d) el tratamiento con fármacos biológicos, como los anticuerpos antitumorales o los anticuerpos antiangiogénicos y e) una combinación de los métodos anteriores.

La resección quirúrgica de los tumores está ampliamente aceptada como tratamiento de primera línea para el Estadío precoz de los tumores sólidos. No obstante, la mayoría de los cánceres se detecta sólo cuando se vuelven sintomáticos, es decir, cuando los pacientes presentan un Estadío bastante tardío de progresión de la enfermedad.

La estadificación del cáncer es la clasificación de la enfermedad en términos de extensión, progresión ygravedad. Ésta agrupa los pacientes de cáncer para que se puedan realizar generalizaciones sobre el pronóstico y la elección de la terapia.

Hoy en día, el sistema TNM es la clasificación más utilizada en relación a la extensión anatómica del cáncer. Representa un sistema de estadificación uniforme y aceptado internacionalmente. Incluye tres variables básicas: T (la extensión del tumor primario) , N (el estado de los nódulos linfáticos regionales) y M (la presencia o ausencia de metástasis a distancia) . Los criterios TNM están publicados en la UICC (International Union Against Cancer) , Sobin, L.H., Wittekind, Ch. (editores) : Classification TNM of Malignant Tumours, sexta edición, 2002) . Cuando se determina el estatus TNM, los pacientes se agrupan en estadios de enfermedad que se denominan mediante números romanos que van del I al IV, y IV es el Estadío de enfermedad más avanzado. La estadificación TNM y los estadios de enfermedad de la UICC se corresponden entre sí tal y como se muestra en la siguiente tabla de Sobin L.H. y Wittekind (editores) , visto con anterioridad.

Interrelación de la estadificación TNM y los estadios de enfermedad de la UICC

Estadío de enfermedad de la UICC Estadío T Estadío N Estadío M

Estadío 0 Tis N0 M0

Estadío I T1, T2 N0 M0

Estadío IIA T3 N0 M0

Estadío IIB T4 N0 M0

Estadío IIIA T1, T2 N1 M0

Estadío IIIB T3, T4 N1 M0

Estadío IIIC Cualquier T N2 M0

Estadío IV Cualquier T Cualquier N M1

El diagnóstico precoz del cáncer, por ejemplo del cáncer colorrectal (CCR) , es especialmente importante ya que se traduce en un pronóstico mucho mejor. Los tumores malignos del CCR aparecen sobre tumores benignos, es decir a partir de un adenoma. Por consiguiente, el mejor pronóstico lo presentan aquellos pacientes diagnosticados en el estadío de adenoma. Los pacientes diagnosticados tan precozmente como en los estadios Tis, N0, M0 o T1-3; N0; M0, si se tratan adecuadamente presentan más del 90% de posibilidades de supervivencia tras 5 años del diagnóstico en comparación con la tasa de supervivencia a 5 años de tan sólo el 10% para los pacientes diagnosticados cuando ya presentan metástasis a distancia.

En teoría, los métodos de detección actuales, que incluyen los métodos por imagen tales como los rayos X o la resonancia magnética nuclear, pueden sr apropiados, al menos parcialmente, para su utilización como herramienta de cribado general. No obstante, son muy caros y los sistemas de salud no se pueden permitir una utilización general y amplia en los cribados en masa de grandes números de sujetos, particularmente en los sujetos que no presentan síntomas tumorales.

Un objetivo de la presente invención es la proporción de un procedimiento simple y coste-eficiente para la evaluación de tumores, por ejemplo para identificar individuos sospechosos de presentar un cáncer. Para este fin, sería deseable un marcador tumoral general detectable en muestras de tejido o fluidos corporales, por ejemplo sangre, suero o plasma, o un panel de tales marcadores.

Actualmente, se utilizan varios marcadores tumorales séricos en la clínica. Por ejemplo, el fragmento soluble de 30 kDa de la citoqueratina 19 (CYFRA 21-1) , el antígeno carcinoembriogénico (CEA) , la enolasa específica neuronal (NSE) , y el antígeno de carcinoma de célula escamosa (CCE) son los marcadores más importantes de CP. Sin embargo, ninguno de ellos cumple los criterios requeridos de sensibilidad y especificidad para una herramienta de cribado (Thomas, L., Labor und Diagnose (2000) , TH Books Verlagsgesellschaft, Frankfurt/Main, Alemania) .

Para que un marcador diagnóstico sea de utilidad clínica como marcador único debe ser comparable o mejor que otros marcadores conocidos en la materia. Un nuevo marcador debería conducir a un progreso en la sensibilidad y/o especificidad diagnóstica, tanto si se utiliza sólo o en combinación con uno o más marcadores, respectivamente. La sensibilidad y/o especificidad diagnósticas de un ensayo se evalúa mejor con sus características operativas de receptor, que se describirán en detalle más adelante.

La sangre total, el suero o el plasma son las fuentes de muestra más utilizadas en la rutina clínica. La identificación de un marcador tumoral precoz que sea de facilite la detección fiable del cáncer o proporcione información pronóstica precoz puede llevar a un método que sea de gran ayuda en el diagnóstico y en el manejo de esta enfermedad. Por consiguiente, existe una necesidad urgente para mejorar la evaluación in vitro del cáncer y en particular del CP. Esto es especialmente importante para mejorar el diagnóstico precoz del cáncer, por ejemplo del CP, dado que las probabilidades de supervivencia de los pacientes diagnosticados precozmente son mucho mayores en comparación con las de aquellos diagnosticados en un estadío avanzado de la enfermedad.

La utilidad clínica de los marcadores bioquímicos establecidos en el cáncer de pulmón se ha revisado, por ejemplo, por Duffy, M.J. (Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. 38 (2001) 225-262) y debería discutirse brevemente.

Se considera que, actualmente, CYFRA 21-1 es el mejor de los marcadores tumorales conocidos para el cáncer de pulmón. Pese a que no es específico de órgano, éste se encuentra predominantemente en el tejido pulmonar. Se describe que la sensibilidad de CYFRA 21-1 para el cáncer de pulmón es de entre el 46 y el 61%, con una especificidad del 95% frente a otras enfermedades pulmonares benignas. Los niveles séricos aumentados de CYFRA 21-1 también se asocian a enfermedades hepáticas benignas pronunciadas, a insuficiencia renal y a cáncer vesical invasivo. La evaluación del CYFRA 21-1 se recomienda en la vigilancia... [Seguir leyendo]

1. Un método para evaluar el cáncer de pulmón in vitro que incluye la medición en una muestra de la concentración de

(a) una proteína adaptadora de caspasa proapoptótica (PACAP) y/o los fragmentos de la misma, y

(b) la utilización del resultado de la medición del paso (a) en la evaluación del cáncer, en la que dicha muestra es suero o plasma, y en la que una concentración aumentada de una proteína PACAP y/o los fragmentos de la misma, en comparación con controles normales, indica la presencia de cáncer de pulmón.

2. El método de acuerdo con la reivindicación 1, en el que además se mide uno o más marcadores adicionales de cáncer.

3. El método de acuerdo con la reivindicación 2, que también se caracteriza porque dicho uno o más marcadores adicionales se seleccionan a partir del grupo que incluye el CYFR.

2. 1, el CEA, el CA 19-9, el CCE, el CA 125, la NSE y/o el proGRP.

4. El método de acuerdo con cualquiera de la reivindicaciones 1-3, que también se caracteriza porque la concentración se mide mediante un método inmunológico.

5. La utilización de la proteína PACAP y/o los fragmentos de la misma en la evaluación del cáncer de pulmón, en la que una concentración aumentada de una proteína PACAP y/o los fragmentos de la misma en una muestra de suero o plasma, en comparación con controles normales, indica la presencia de cáncer de pulmón.

6. La utilización de acuerdo con la reivindicación 5 en la evaluación del cáncer de pulmón, particularmente el cáncer de pulmón de célula no pequeña (CPCNP) .

7. La utilización de un anticuerpo dirigido frente a una proteína PACAP y/o los fragmentos de la misma en la evaluación del cáncer de pulmón, en la que una concentración aumentada de una proteína PACAP y/o los fragmentos de la misma en una muestra de suero o plasma, en comparación con controles normales, indica la presencia de cáncer de pulmón.

8. La utilización de un panel de marcadores que incluye una proteína PACAP y/o los fragmentos de la misma, y uno o más marcadores adicionales de cáncer en la evaluación del cáncer de pulmón, en la que una concentración aumentada de una proteína PACAP y/o los fragmentos de la misma en una muestra de suero o plasma, en comparación con controles normales, indica la presencia de cáncer de pulmón.

9. La utilización del panel de marcadores de acuerdo con la reivindicación 8, que también se caracteriza porque dicho uno o más marcadores adicionales se seleccionan a partir del grupo que incluye el CYFR.

2. 1, el CEA, el CA 19-9, el CCE, el CA 125, la NSE y/o el proGRP.

10. La utilización del panel de marcadores de acuerdo con las reivindicaciones 8-9 en la evaluación del cáncer de pulmón, particularmente el CPCNP.