Medio y método para detectar furfurales.
Medio para la detección de furfurales, caracterizado porque el medio se compone de una tira de prueba que fueimpregnada con una solución ácida,
la cual contiene al menos 0,1 a 20% en peso de un derivado de 4-aminofenazonay 0,05 a 5% en peso de un derivado del ácido barbitúrico en un disolvente acuoso ácido con un valor pH.de entre 2 y 5.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2005/009984.
Solicitante: MERCK PATENT GMBH.
Nacionalidad solicitante: Alemania.
Dirección: FRANKFURTER STRASSE 250 64293 DARMSTADT ALEMANIA.
Inventor/es: WAGNER, BERTHOLD, BEIL-SEIDLER,STEFANIE.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C07D231/46 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07D COMPUESTOS HETEROCICLICOS (Compuestos macromoleculares C08). › C07D 231/00 Compuestos heterocíclicos que contienen ciclos de diazol-1,2 o diazol-1,2 hidrogenado. › Atomo de oxígeno en posición 3 ó 5 y átomo de nitrógeno en posición 4.
- C12Q1/28 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › una peroxidasa.
- G01N31/22 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 31/00 Investigación o análisis de materiales no biológicos mediante el empleo de los métodos químicos especificados en los subgrupos; Aparatos especialmente adaptados a tales métodos. › Utilización de reactivos químicos (G01N 31/02 tiene prioridad).
PDF original: ES-2440193_T3.pdf
Fragmento de la descripción:
Medio y método para detectar furfurales La presente invención hace referencia a un medio y a un método para detectar furfurales, en particular de las sustancias químicas marcadoras 5- (hidroximetil) - furano- 2- carbaldehído (hidroximetilfurfural, HMF) y furano- 2- carbaldehído (furfural) .
El tratamiento térmico es la vía más utilizada para conservar los alimentos y mantenerlos comestibles. Bajo condiciones controladas de forma precisa, los alimentos mantienen sus propiedades particulares, organolépticas y fisiológicamente nutritivas durante el tratamiento térmico. Un tratamiento térmico que exceda el dimensionamiento requerido puede modificar los componentes de los alimentos, influenciando con ello de forma negativa el sabor y el valor nutritivo de los mismos. Debido a esto, con frecuencia se utilizan sustancias químicas marcadoras para evaluar la calidad de los alimentos y para controlar la optimización de procesos durante la elaboración de los alimentos.
El hidroximetilfurfural (HMF) es un marcador conocido para la detección de pérdida de calidad debido a un tratamiento o almacenamiento excesivos de alimentos que contengan azúcar.
El contenido de HMF en zumos de fruta frescos, no tratados, es prácticamente nulo y la determinación del contenido de HMF es un método de uso común para evaluar la efectividad de un tratamiento térmico para inactivar microorganismos no deseados en confituras y preparaciones de frutas.
El HMF es un producto principal de la reacción de Maillard y se forma durante la reacción de azúcares reductores con aminoácidos en función de la temperatura y del valor del pH. En ensayos de diferentes alimentos se hallaron concentraciones mayores a 1g /kg de HMF en frutos secos, productos de caramelo y zumos que fueron producidos a partir de ciruelas pasas.
La “International Federation of Fruit Juice Processors” (IFFJP) recomienda una concentración máxima de 5-10 mg/l HMF en zumos de fruta y de 25 mg/kg en concentrados de zumos de fruta.
En zumos de tomate y puré de tomates, en función del contenido de azúcar y de sólidos (valor de Brix) , se hallaron de 1, 3 a 186 mg/ kg de HMF.
En las mieles frescas, el HMF puede detectarse con contenidos menores a 1 mg/kg y la miel, a partir de un contenido de 15 mg/kg, sólo puede aprovecharse como miel industrial.
También en el procesamiento de la leche, en particular en la ultrapasteurización, el contenido de HMF se considera importante. Sin embargo, en ese caso deben observarse los contenidos fluctuantes de HMF en la leche cruda.
El contenido de HMF, junto con su importancia como parámetro durante el tratamiento térmico en los alimentos, ejerce una influencia directa sobre el olor y el sabor de los alimentos, a la cual debe prestarse atención.
La determinación del contenido de HMF en alimentos y sustancias crudas para la elaboración de alimentos forma parte de los análisis de rutina en los laboratorios donde se efectúan controles de calidad. Se emplean diferentes métodos, donde todos ellos requieren una preparación de las muestras, como por ejemplo una destilación o una extracción. Entre éstos figuran la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidos de alto rendimiento o HPLC (por sus siglas en inglés) , o detección espectrofotométrica con el método según Winkler (Winkler, 1955, Z. Lebensm. Untersuch. Forsch., 102, 161) , así como de acuerdo con el método A.O.A.C.
Todos estos métodos requieren una gran inversión en cuanto a los aparatos o instrumentos utilizados, así como también personal capacitado para ejecutarlos de forma segura.
Además, estos métodos no son adecuados para realizar los análisis rápidamente in situ, lo cual garantizaría un control de los procesos de elaboración de forma rápida con respecto a los análisis.
El método para la determinación de HMF que se aplica con más frecuencia según Winkler (recomendado en las Directrices de la U.E y del O.I.V.) se realiza con p-toluidina tóxica (Nº de registro CAS 106-49-0) , donde junto con el riesgo para la salud que implica para un usuario no experimentado y el problema del desecho de las sustancias residuales que produce, se excluye la posibilidad de utilizarla en las proximidades del lugar en donde se elaboran los alimentos. Además, en el método conforme a Winkler se presenta el problema de que la coloración formada es estable sólo durante un período breve, dificultando de este modo la evaluación.
Se le atribuye una gran importancia a la sustitución del método de determinación de HMF según Winkler y a la posibilidad de realizar pruebas más rápidas, convenientes en cuanto a los costes y más fáciles de utilizar para efectuar los análisis de HMF, en particular en los alimentos.
Por tanto, es objeto de la presente invención proporcionar un medio para la detección de HMF que pueda aplicarse directamente en el lugar sin grandes inversiones en cuanto a aparatos e instrumentos.
Se ha comprobado que una combinación de reactivos en base a un derivado de 4-aminofenazona, en particular 4aminofenazona (4-aminoantipirina, Nº de registro CAS 83- 07- 8) y a un derivado del ácido barbitúrico, en particular ácido barbitúrico (Nº de registro CAS 67- 52- 7) o ácido tiobarbitúrico (Nº de registro CAS 504- 17- 6) produce un coloración roja-violeta en los ácidos en presencia de HMF. Esta coloración puede evaluarse de forma visual o fotométrica. En especial, la combinación de reactivos puede presentarse también en forma de una tira de prueba, de manera que es posible realizar la detección de HMF de modo particularmente sencillo.
Se comprobó además que con la misma combinación de reactivos puede realizarse también la detección de otros furfurales, como por ejemplo de derivados de furfural sustituidos en la quinta posición y del mismo furfural. Asimismo, puede diferenciarse entre HMF y furfural, puesto que al utilizarse ácido 4-aminobenzoico en presencia de furfural se produce una coloración azul, mientras que el HMF, por el contrario, no produce ninguna coloración.
Por tanto, es objeto de la presente invención un medio para la detección, del modo definido en la reivindicación 1.
En una forma de ejecución preferente, el medio contiene 4-aminofenazona como derivado de 4-amino-fenazona.
En otra forma de ejecución preferente, el medio contiene ácido barbitúrico y/o ácido tiobarbitúrico como derivado del ácido barbitúrico.
En otra forma de ejecución preferente, el medio contiene ácido cítrico.
En una forma de ejecución especialmente preferente, el medio se compone de una tira de prueba que fue impregnada con una solución ácida que contiene al menos de 0, 1 a 20% en peso de 4-aminofenazona y de 0, 05 a 5% en peso de ácido barbitúrico y/o de ácido tiobarbitúrico.
En otra forma de ejecución, el medio se compone de una tira de prueba que adicionalmente presenta una zona que fue impregnada con una solución ácida, la cual contiene al menos ácido 4-aminobenzoico y un derivado del ácido barbitúrico.
Es objeto de la presente invención también un método para detectar furfurales, caracterizado por los siguientes pasos del método:
a) provisión de una solución acuosa de muestra b) puesta en contacto del medio conforme a la invención, del modo definido en la reivindicación 1, con la solución de muestra del paso a)
c) evaluación visual y/o fotométrica de la coloración formada.
En otra forma de ejecución preferente, la evaluación se efectúa en el paso c) mediante reflectometría.
Además, es objeto de la presente invención la utilización del medio conforme a la invención para detectar 5 (hidroximetil) - furano- 2- carbaldehído en alimentos.
También es objeto de la presente invención un kit para detectar furfurales, el cual contiene al menos un medio conforme a la invención según la reivindicación 1.
En una forma de ejecución, el kit contiene de forma adicional una tira de prueba que fue impregnada con una solución ácida que contiene al menos ácido 4-aminobenzoico y un derivado del ácido barbitúrico.
El aspecto central de la invención se basa en el hecho de que una combinación de un derivado del ácido barbitúrico y un derivado de 4- amino- fenazona, en una solución ácida, en presencia de furfurales, en particular de 5 (hidroximetil) - furano- 2- carbaldehído y/o furano- 2- carbaldehído, produce una coloración intensa, por lo general de color rojo a violeta-azulada. En presencia de 5- (hidroximetil) - furano- 2- carbaldehído se produce una coloración roja-violeta, mientras que en presencia de furano- 2- carbaldehído se produce una cloración más bien azul-violeta. El
color... [Seguir leyendo]
Reivindicaciones:
1. Medio para la detección de furfurales, caracterizado porque el medio se compone de una tira de prueba que fue impregnada con una solución ácida, la cual contiene al menos 0, 1 a 20% en peso de un derivado de 4-aminofenazona y 0, 05 a 5% en peso de un derivado del ácido barbitúrico en un disolvente acuoso ácido con un valor pH de entre 2 y 5.
2. Medio conforme a la reivindicación 1, caracterizado porque el medio contiene 4-aminofenazona como derivado de 4-amino-fenazona.
3. Medio conforme a la reivindicación 1 ó 2, caracterizado porque el medio contiene ácido barbitúrico y/o ácido tiobarbitúrico como derivado del ácido barbitúrico.
4. Medio conforme a una o a varias de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque el medio contiene ácido cítrico.
5. Medio conforme a una o a varias de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque el medio se compone de una tira de prueba que fue impregnada con una solución ácida, la cual contiene al menos 0, 1 a 20% en peso de 4aminofenazona y 0, 05 a 5% en peso de ácido barbitúrico y/o de ácido tiobarbitúrico.
6. Medio conforme a una o a varias de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque el medio se compone de una tira de prueba que adicionalmente presenta una zona que fue impregnada con una solución ácida, la cual contiene al menos ácido 4- aminobenzoico y un derivado del ácido barbitúrico.
7. Método para la detección de furfurales, caracterizado por los siguientes pasos del método:
a) provisión de una solución acuosa de muestra b) puesta en contacto de un medio conforme a una o a varias de las reivindicaciones 1 a 6 con la solución de muestra del paso a)
c) evaluación visual y/o fotométrica de la coloración formada.
8. Método conforme a la reivindicación 7, caracterizado porque la evaluación se efectúa en el paso c) mediante reflectometría.
9. Utilización de un medio conforme a una o a varias de las reivindicaciones 1 a 6 para detectar 5- (hidroximetil) furano- 2- carbaldehído en alimentos.
10. Kit para detectar furfurales, el cual contiene al menos un medio correspondiente a una o a varias de las reivindicaciones 1 a 6.
11. Kit conforme a la reivindicación 10, caracterizado porque el kit contiene de forma adicional una tira de prueba que fue impregnada con una solución ácida que contiene al menos ácido 4-aminobenzoico y un derivado del ácido barbitúrico.
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