Detección de dianas usando marcas de masa y espectrometría de masas.

Un procedimiento que comprende:

(a) proporcionar una muestra de tejido fijado con formol e incluido en parafina que comprende una pluralidad de dianas;



(b) poner en contacto la muestra de tejido con un primer resto de unión específica que puede reconocer y unirse a una primera diana en la muestra de tejido y un segundo resto de unión específica que puede reconocer y unirse a una segunda diana en la muestra de tejido;

(c) poner en contacto la muestra de tejido con un primer conjugado que comprende una primera enzima y un primer anticuerpo que puede reconocer y unirse al primer resto de unión específica;

(d) poner en contacto la muestra de tejido con un primer resto de sustrato enzimático y un primer precursor de marca de masa, en el que el primer resto de sustrato enzimático reacciona con la primera enzima y el primer precursor de marca de masa para producir y depositar una primera marca de masa en la primera diana;

(e) desactivar la primera enzima;

(f) poner en contacto la muestra de tejido con un segundo conjugado que comprende una segunda enzima y un segundo anticuerpo que puede reconocer y unirse al segundo resto de unión específica;

(g) poner en contacto la muestra de tejido con un segundo resto de sustrato enzimático y un segundo precursor de marca de masa, en el que el segundo resto de sustrato enzimático reacciona con la segunda enzima y el segundo precursor de marca de masa para producir y depositar una segunda marca de masa en la segunda diana, en el que el primer y segundo restos de sustrato enzimático tienen la misma estructura química, el primer y segundo precursores de marcas de masa tienen la misma estructura química y al menos uno del primer precursor de marca de masa o segundo precursor de marca de masa está radiomarcado de modo que la primera marca de masa y la segunda la marca de masa difieren en masa;

(h) ionizar la primera marca de masa y la segunda marca de masa para producir un primer código de masa y un segundo código de masa, en el que cada código de masa tiene la misma estructura química pero difiere en masa de cualquier otro código de masa producido a partir de cualquier otra marca de masa;

(i) detectar cada código de masa usando un espectrómetro de masas; y

(j) cuantificar relativamente cada diana cuantificando una cantidad de cada código de masa midiendo un pico de espectrometría de masas que tiene una proporción m/z correspondiente a una proporción m/z esperada de ese código de masa.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2011/042853.

Solicitante: VENTANA MEDICAL SYSTEMS, INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 1910 E. INNOVATION PARK DRIVE TUCSON, ARIZONA 85755 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: BIENIARZ, CHRISTOPHER, MILLER, PHILLIP, WANG,HONG, LEFEVER,MARK, KELLY,BRIAN DANIEL, HONG,RUI, FROEHLICH,JAN.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • A61K49/00 SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE.A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L;   composiciones a base de jabón C11D). › Preparaciones para examen in vivo.
  • C12Q1/28 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › una peroxidasa.
  • G01N33/532 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Producción de compuestos inmunoquímicos marcados.
  • G01N33/543 G01N 33/00 […] › con un soporte insoluble para la inmovilización de compuestos inmunoquímicos.
  • G01N33/58 G01N 33/00 […] › en los que intervienen sustancias marcadas (G01N 33/53 tiene prioridad).
  • G01N33/68 G01N 33/00 […] › en los que intervienen proteínas, péptidos o aminoácidos.

PDF original: ES-2676183_T3.pdf

 

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