Material biológico adecuado para la terapia de la osteoartrosis, el daño de ligamento y para el tratamiento de trastornos articulares.

Un material biológico que comprende:

a) un vehículo líquido compuesto por una solución viscosa que contiene al menos un polisacárido natural y/o semisintético y que tiene una viscosidad dinámica medida a 20 °C y a una velocidad de cizallamiento de D ≥

350 s-1, comprendida entre 0.1 y 0.25 Pa.s (100 y 250 cPoise) y/o una viscosidad cinemática comprendida entre 0.99 x 10-4 y 2.48 x 10-4 m2/s (99 y 248 cSt) medida en las mismas condiciones;

b) un cultivo o una preparación extemporánea de células madre mesenquimales, y/o

c) un hemoderivado rico en plaquetas donde dicha solución viscosa del componente (a) se selecciona del grupo que consiste en: I) una solución acuosa de un ácido hialurónico o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables, preferentemente la sal sódica, con un peso molecular promedio comprendido entre 450 y 730 kDa en una concentración comprendida entre 5 y 15 mg/ml, II) una solución acuosa de un ácido hialurónico o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables, preferentemente la sal sódica, con un peso molecular promedio comprendido entre 1000 y 1800 KDa medido después de la esterilización, en una concentración comprendida entre 2 y 12 mg/ml; III) una solución acuosa de la octilamida del ácido hialurónico, con un peso molecular promedio comprendido entre 450 y 730 kDa, en una concentración comprendida entre 1 y 10 mg/ml; IV) una solución acuosa de la hexadecilamida del ácido hialurónico, con un peso molecular promedio comprendido en el rango de 450 a 730 kDa, en una concentración comprendida entre 0.2 y 1.5 mg/ml.

Material biológico adecuado para la terapia de la osteoartrosis, el daño de ligamento y para el tratamiento de trastornos articulares Campo de la invención La presente invención se refiere a un material biológico en forma líquida viscosa adecuado para la terapia de la osteoartrosis, el daño en los tendones y los ligamentos, para el tratamiento de los trastornos articulares y los tejidos conectivos en general y la piel dañada.

Estado anterior de la técnica El cartílago articular es particularmente adecuado para resistir la compresión, no tiene irrigación sanguínea ni drenaje linfático y carece por completo de terminaciones nerviosas. Esto implica que no es capaz de autorregenerarse para compensar una lesión superficial, a menos que la capa subcondral subyacente no esté involucrada.

Por lo tanto, si la lesión del cartílago no es profunda, no habrá ninguna respuesta regenerativa. Por el contrario, si el daño es profundo y penetra en el hueso subcondral desencadena un proceso de autorreparación, de ese modo las células madre de la médula ósea inician un proceso de diferenciación de condrocitos que puede conducir a una reparación parcial del cartílago dañado.

Los síntomas como dolor e inflamación de la articulación (como por ejemplo de la rodilla) , pueden ser el resultado de un cartílago dañado y la degeneración progresiva del mismo puede producir osteoartrosis.

Este tipo de lesión puede aparecer con frecuencia en atletas profesionales (que están más expuestos a traumatismos) , o en pacientes ancianos, debido a traumatismo articular y defectos posturales o al desgaste normal del cartílago relacionado con la edad del sujeto.

En realidad, en las lesiones condrales de la articulación de la rodilla, los tratamientos no quirúrgicos de este tipo, que incluyen fisioterapia y medicación, no permiten una cura completa del defecto del cartílago la cual en cambio se ha logrado, con buenos porcentajes de éxito, después de la realización de operaciones particularmente innovadoras de implante quirúrgico intraarticular.

Las principales técnicas quirúrgicas de reparación del cartílago conocidas en el estado anterior de la técnica son:

1. Trasplante autólogo de condrocitos a través de al menos dos procedimientos quirúrgicos diferentes en secuencia: el primero, menos invasivo, permite la extracción del paciente (mediante artroscopia) de un tejido normal de cartílago de otras áreas no lesionadas de la articulación o de un cartílago no articular. La muestra obtenida se envía así a un laboratorio para la proliferación celular in vitro. Una vez multiplicados los condrocitos, le sigue la operación quirúrgica real que consiste en injertar, directamente en el sitio de la lesión, los condrocitos producidos (vehiculizados en soluciones salinas) que posiblemente se puedan "fijar in situ" con tejido autólogo perióstico. Este proceso es extremadamente costoso puesto que requiere 2 intervenciones quirúrgicas y el proceso de multiplicación in vitro de los condrocitos. Por lo tanto, esto implica el doble ingreso del paciente en el hospital, siendo el paciente por ende sometido dos veces a anestesia y dos veces a tratamiento farmacológico.

2. Un segundo método más simple consiste en realizar perforaciones en la superficie articular para alcanzar el tejido subcondral de la zona lesionada y así permitir la formación de un coágulo sanguíneo mesenquimal capaz de alcanzar la superficie del defecto del cartílago, donde las células se pueden diferenciar parcialmente en condrocitos. Sin embargo, el tejido del cartílago recién formado era principalmente fibroso y no hialino como el cartílago inicial y, por consiguiente, no tendrá las mismas características físicas y mecánicas de la articulación nativa.

3. Es conocida la inserción de implantes quirúrgicos o andamios poliméricos que contienen condrocitos y/o células madre mesenquimales para el tratamiento de lesiones osteocartilaginosas. En este caso, el material que constituye el andamio puede ser un polisacárido semisintético como, por ejemplo, un derivado del ácido hialurónico (1) , o consistir en matrices de colágeno. Incluso este procedimiento era particularmente costoso y requería el doble ingreso del paciente en el hospital y una doble operación, como se describió previamente.

Otro tipo muy común de lesión o inflamación de los tejidos conectivos es la lesión de los ligamentos o tendones, y en particular la del tendón de Aquiles, especialmente entre los atletas profesionales, generalmente tratada (en sus formas más graves) incluso quirúrgicamente debido a la necesidad de la reconstrucción parcial o total del tejido lesionado. Hasta la fecha, las técnicas quirúrgicas utilizadas para reparar los ligamentos se basaban en el injerto de tejidos y en prótesis sintéticas, los cuales sin embargo tienen una eficacia limitada en el tiempo. En cambio, publicaciones científicas recientes demostraron la capacidad de las células madre para reconstruir el tejido de los tendones y ligamentos dañados: las células mesenquimales obtenidas de las mismas células madre introducidas en el tendón de Aquiles lesionado, se transformaron de hecho en tenocitos (las células típicas del tendón) . El tendón se reparó por lo tanto debido a un aumento de la producción de colágeno que torna los ligamentos flexibles y resistentes.

Recientemente, tanto en cirugía maxilofacial como ósea (2) pero también (y sobre todo) en la cirugía de tejidos conectivos (y particularmente en la reconstrucción/regeneración de tendones/ligamentos y piel) , el uso de hemoderivados ricos en plaquetas se ha vuelto cada vez más común, en cuanto este tipo de material es rico en factores tróficos como AGF (concentrado de factor de crecimiento autólogo) y en particular PDGF-AB y TGFβ etc. (3) ,

(4)

.

De hecho, estos hemoderivados se utilizan para estimular los procesos reparadores de la piel dañada tras la presencia de úlceras venosas, principalmente en pacientes diabéticos.

Normalmente, la estimulación se activa con diferentes metodologías, como por ejemplo:

a) estimulación mecánica,

b) aplicación local de factores de crecimiento,

c) aplicación local de productos de ingeniería de tejidos.

La estimulación mecánica consiste en la abrasión de la parte inferior y los bordes de la lesión con una gasa estéril seca o con un bisturí, hasta el sangrado. La aplicación local de factor del crecimiento con un concentrado de plaquetas disuelto en plasma permite la liberación de PDGF (con acción mitógena y angiogénica) , TGF-B (para la estimulación de los fibroblastos) EGF (para la estimulación de las células epidérmicas y mesenquimales) e IGF (como promotor de la duplicación celular) . La experimentación ha demostrado un aumento en la vascularización de los tejidos, aunque estos hemoderivados son difíciles de manipular y su permanencia in situ tiene una duración muy corta.

Los productos de ingeniería de tejidos son más recientes y están en forma de fibroblastos heterólogos y queratinocitos en un soporte biocompatible o en forma de fibroblastos autólogos en un soporte de ácido hialurónico.

Esto implica el uso de la práctica quirúrgica para tomar las células del paciente a fin de cultivarlas in vitro antes de cargarlas en el soporte. El documento WO 01/80865 A2 da a conocer: un material biológico, adecuado para ser inyectado, utilizado para la reparación meniscal que comprende: a - un vehículo líquido compuesto por una solución viscosa que contiene 4 mg/mL de hialuronato de sodio de alto peso molecular; b - una preparación extemporánea de células madre mesenquimales.

Teniendo en cuenta el estado anterior de la técnica descrito previamente, tanto respecto a la administración intraarticular como intradérmica del componente celular y el tratamiento - con productos de plaquetas - de las regiones lesionadas de los tendones/ligamentos o la piel (tanto los componentes celulares como los hemoderivados ricos en plaquetas se administran por medio de jeringas especiales) , surge la necesidad de proporcionar un "vehículo" que sea lo suficientemente líquido pero también capaz de asegurar simultáneamente:

• una buena consistencia física/mecánica, para permitir que la administración citada previamente salvaguarde la vitalidad, la morfología de las membranas celulares y, al mismo tiempo, la capacidad de proliferación y diferenciación de las células vehiculizadas, pero que, además,

• permita mantener las células mencionadas en el sitio de la lesión sin necesidad de una fijación adicional que requiera una sutura posterior y medicamentos.

Por razones similares, es necesario proporcionar... [Seguir leyendo]

1. Un material biológico que comprende:

a) un vehículo líquido compuesto por una solución viscosa que contiene al menos un polisacárido natural y/o semisintético y que tiene una viscosidad dinámica medida a 20 °C y a una velocidad de cizallamiento de D = 350 s-1, comprendida entre 0.1 y 0.25 Pa.s (100 y 250 cPoise) y/o una viscosidad cinemática comprendida entre 0.99 x 10-4 y 2.48 x 10-4 m2/s (99 y 248 cSt) medida en las mismas condiciones; b) un cultivo o una preparación extemporánea de células madre mesenquimales, y/o c) un hemoderivado rico en plaquetas donde dicha solución viscosa del componente (a) se selecciona del grupo que consiste en:

I) una solución acuosa de un ácido hialurónico o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables, preferentemente la sal sódica, con un peso molecular promedio comprendido entre 450 y 730 kDa en una concentración comprendida entre 5 y 15 mg/ml, II) una solución acuosa de un ácido hialurónico o de una de sus sales farmacéuticamente aceptables, preferentemente la sal sódica, con un peso molecular promedio comprendido entre 1000 y 1800 KDa medido después de la esterilización, en una concentración comprendida entre 2 y 12 mg/ml; III) una solución acuosa de la octilamida del ácido hialurónico, con un peso molecular promedio comprendido entre 450 y 730 kDa, en una concentración comprendida entre 1 y 10 mg/ml; IV) una solución acuosa de la hexadecilamida del ácido hialurónico, con un peso molecular promedio comprendido en el rango de 450 a 730 kDa, en una concentración comprendida entre 0.2 y 1.5 mg/ml.

2. El material biológico de acuerdo con la reivindicación 1, donde cuando la solución acuosa se selecciona de (I) la concentración del ácido hialurónico es de 10 mg/ml.

3. El material biológico de acuerdo con la reivindicación 1, donde cuando la solución acuosa se selecciona de (II) la concentración del ácido hialurónico está comprendida entre 6 y 8 mg/ml.

4. El material biológico de acuerdo con la reivindicación 1, donde cuando la solución acuosa se selecciona de (III) la concentración de la octilamida del ácido hialurónico está comprendida entre 2 y 3 mg/ml.

5. El material biológico de acuerdo con la reivindicación 1, donde cuando la solución acuosa se selecciona de (IV) la concentración de la hexadecilamida del ácido hialurónico está comprendida entre 0.5 y 1 mg/ml.

6. El material biológico de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que las células madre mesenquimales son del tipo autólogo y se seleccionan de la clase que consiste en: células madre mesenquimales de médula ósea, células madre mesenquimales de sangre periférica, células madre mesenquimales de periostio, células madre mesenquimales de cordón umbilical o las células del tejido adiposo.

7. El material biológico de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, donde los hemoderivados ricos en plaquetas se seleccionan entre, plasma rico en plaquetas, concentrado de plaquetas y gel de plaquetas.

8. El material biológico de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, para el tratamiento de la osteoartrosis, el daño de cartílago, el daño de tendón, el daño de ligamento, los trastornos articulares, las lesiones de piel o las úlceras de piel.

9. El material biológico de acuerdo con la reivindicación 8, en el que el daño de tendón es un daño en el tendón de Aquiles.

10. El material biológico de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, que se selecciona de la clase que consiste en:

material biológico que contiene los componentes (a) y (b) , material biológico que contiene los componentes (a) y (c)

o material biológico que contiene los tres componentes (a) , (b) y (c) .

11. Composiciones farmacéuticas que contienen el material biológico de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, adecuadas para la administración intraarticular, la administración intradérmica o para aplicar directamente en el sitio de la lesión.

12. Composiciones farmacéuticas de acuerdo con la reivindicación 11, donde el hemoderivado rico en plaquetas y/o las células madre mesenquimales son de origen autólogo.

13. Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 11 y 12, para el tratamiento de defectos cartilaginosos y óseos, tendón dañado, ligamento dañado o piel dañada.