Ligandos de oxadiazolina para modular la expresión de genes exógenos a través de un complejo de receptor de ecdisona.

Compuesto de fórmula general:**Fórmula**

en la que:

X es O o S,

y X' es O;

R1 es

a) H, alquilo (C1-C6), haloalquilo (C1-C6), cianoalquilo (C1-C6), alcoxicarbonil (C1-C6)-alquilo (C1-C6), alcoxilo (C1-C6) obenciloxilo;

b) fenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 5 H; halo; nitro; ciano;hidroxilo; amino (-NRaRb); alquilo (C1-C6); haloalquilo (C1-C6); cianoalquilo (C1-C6); hidroxialquilo (C1-C6); alcoxilo(C1-C6); fenoxilo; haloalcoxilo (C1-C6); alcoxi (C1-C6)-alquilo (C1-C6); alcoxi (C1-C6)-alcoxilo (C1-C6); alcanoiloxi (C1-C6)-alquilo (C1-C6); alquenilo (C2-C6) opcionalmente sustituido con halo, ciano, alquilo (C1-C4) o alcoxilo (C1-C4);alquinilo (C2-C6) opcionalmente sustituido con halo o alquilo (C1-C4); formilo; carboxilo; alquil (C1-C6)-carbonilo;haloalquil (C1-C6)-carbonilo; benzoílo; alcoxi (C1-C6)-carbonilo; haloalcoxi (C1-C6)-carbonilo; alcanoiloxilo (C1-C6) (-OCORa); carboxamido (-CONRaRb); amido (-NRaCORb); alcoxicarbonilamino (-NRaCO2Rb); alquilaminocarbonilamino(-NRaCONRbRc); mercapto; alquiltio (C1-C6); alquil (C1-C6)-sulfonilo; alquil (C1-C6)-sulfóxido (-S(O)Ra); sulfamido (-SO2NRaRb); o fenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo,nitro, alcoxilo (C1-C6), alquilo (C1-C6) o amino; o cuando dos posiciones adyacentes en el anillo de fenilo estánsustituidas con grupos alcoxilo, estos grupos, junto con los átomos de carbono a los que están unidos, puedenunirse como una unión (-OCH2O-) o (-OCH2CH2O-) para formar un anillo heterocíclico dioxolano o dioxano de 5 ó 6miembros;

c) naftilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alcoxilo(C1-C6), alquilo (C1-C6) o amino;

d) benzotiofen-2-ilo, benzotiofen-3-ilo, benzofuran-2-ilo o benzofuran-3-ilo sustituido o no sustituido en el que lossustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, hidroxilo, alquilo (C1-C6), alcoxilo (C1-C6), carboxilo oalcoxi (C1-C6)-carbonilo (-CO2Ra);

e) 2, 3 ó 4-piridilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, ciano,nitro, hidroxilo, alquilo (C1-C6), alcoxilo (C1-C6) o haloalcoxilo (C1-C6);

f) heterociclo de 5 miembros sustituido o no sustituido seleccionado de furilo, tiofenilo, triazolilo, pirrolilo, isopirrolilo,pirazolilo, isoimidazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, oxazolilo o isooxazolilo en el que los sustituyentes sonindependientemente de 1 a 3 halo, nitro, hidroxilo, alquilo (C1-C6), alcoxilo (C1-C6), carboxilo, alcoxi (C1-C6)-carbonilo(-CO2Ra) o fenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, nitro,alquilo (C1-C6), haloalquilo (C1-C6), alcoxilo (C1-C6), haloalcoxilo (C1-C6), carboxilo, alcoxi (C1-C4)-carbonilo (-CO2Ra)o amino (-NRaRb);

g) fenilalquilo (C1-C6), fenilalcoxi (C1-C6)-alquilo (C1-C6) o fenoxialquilo (C1-C6) sustituido o no sustituido poraromático en el que los sustituyentes aromáticos son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alcoxilo (C1-C6),alquilo (C1-C6) o amino; o

h) fenilamino, fenilalquil (C1-C6)-amino o fenilcarbonilamino sustituido o no sustituido por aromático en el que lossustituyentes aromáticos son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alcoxilo (C1-C6), alquilo (C1-C6) o amino.

Ligandos de oxadiazolina para modular la expresión de genes exógenos a través de un complejo de receptor de ecdisona Esta solicitud reivindica prioridad sobre la solicitud provisional estadounidense n.º 60/449.467 presentada el 21 de febrero de 2003.

Campo de la invención Esta invención se refiere al campo de la biotecnología o ingeniería genética. Específicamente, esta invención se refiere al campo de la expresión génica. Más específicamente, esta invención se refiere a ligandos no esteroideos para receptores nucleares naturales y mutados y a su uso en un sistema de expresión génica inducible basado en receptores nucleares y a métodos de modulación de la expresión de un gen dentro de una célula huésped usando estos ligandos y el sistema de expresión génica inducible.

Antecedentes de la invención En el presente documento se citan diversas publicaciones, cuyas descripciones se incorporan como referencia en su totalidad. Sin embargo, la mención de cualquier referencia en el presente documento no debe considerarse un reconocimiento de que tal referencia está disponible como “técnica anterior” a la presente solicitud.

En el campo de la ingeniería genética, el control preciso de la expresión génica es una herramienta valiosa para estudiar, manipular y controlar el desarrollo y otros procesos fisiológicos. La expresión génica es un proceso biológico complejo que implica varias interacciones proteína-proteína específicas. Con el fin de desencadenar la expresión génica, de manera que produzca el ARN necesario como primera etapa en la síntesis de proteínas, debe llevarse un activador de la transcripción a las proximidades de un promotor que controla la transcripción génica. Normalmente, el propio activador de la transcripción está asociado con una proteína que tiene al menos un dominio de unión a ADN que se une a sitios de unión del ADN presentes en las regiones promotoras de los genes. Por tanto, para que se produzca la expresión génica, una proteína que comprende un dominio de unión a ADN y un dominio de transactivación ubicado a una distancia apropiada del dominio de unión a ADN debe llevarse a la posición correcta en la región promotora del gen.

El enfoque transgénico tradicional utiliza un promotor específico del tipo celular para dirigir la expresión de un transgén diseñado. En primer lugar, se incorpora un constructo de ADN que contiene el transgén en un genoma huésped. Cuando se desencadena por un activador de la transcripción, se produce la expresión del transgén en un tipo celular dado.

Otro medio para regular la expresión de genes foráneos en células es a través de promotores inducibles. Los ejemplos del uso de tales promotores inducibles incluyen el promotor PR1-a, sistemas de represor-operador de procariotas, sistemas de inmunosupresor-inmunofilina y sistemas de activación de la transcripción de eucariotas superiores tales como sistemas de receptores de hormonas esteroideas y se describen a continuación.

El promotor PR1-a del tabaco se induce durante la respuesta de resistencia sistémica adquirida tras el ataque de 45 patógenos. El uso de PR1-a puede estar limitado porque a menudo responde a materiales endógenos y factores externos tales como patógenos, radiación UV-B y contaminantes. Se han descrito sistemas de regulación génica basados en promotores inducidos por choque térmico, interferón y metales pesados (Wurn et al., 1986, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:5414-5418; Amheiter et al., 1990 Cell 62:51-61; Filmus et al., 1992 Nucleic Acids Research 20:27550-27560) . Sin embargo, estos sistemas tienen limitaciones debido a su efecto sobre la expresión de genes no diana. Estos sistemas también son rezumantes.

Los sistemas de represor-operador de procariotas utilizan proteínas represoras bacterianas y secuencias de ADN de operador único a las que se unen. Se han usado los sistemas de represor-operador tanto de tetraciclina (“Tet”) como de lactosa (“Lac”) de la bacteria Escherichia coli en plantas y animales para controlar la expresión génica. En el

sistema Tet, la tetraciclina se une a la proteína represora TetR, dando como resultado un cambio conformacional que libera la proteína represora del operador que como resultado permite que se produzca la transcripción. En el sistema Lac, se activa un operón lac en respuesta a la presencia de lactosa, o análogos sintéticos tales como isopropil-b-D-tiogalactósido. Desgraciadamente, el uso de tales sistemas está limitado por la química inestable de los ligandos, es decir tetraciclina y lactosa, por su toxicidad, por su presencia natural o por los niveles relativamente altos requeridos para la inducción o represión. Por motivos similares, está limitada la utilidad de tales sistemas en animales.

Las moléculas inmunosupresoras tales como FK506, rapamicina y ciclosporina A pueden unirse a inmunofilinas FKBP12, ciclofilina, etc. Usando esta información, se ha ideado una estrategia general para reunir dos proteínas 65 cualesquiera colocando simplemente FK506 en cada una de las dos proteínas o colocando FK506 en una y ciclosporina A en otra. Entonces puede usarse un homodímero sintético de FK506 (FK1012) o un compuesto que resulta de la fusión de FK506-ciclosporina (FKCsA) para inducir la dimerización de estas moléculas (Spencer et al., 1993, Science 262:1019-24; Belshaw et al., 1996 Proc Natl Acad Sci U S A 93:4604-7) . Se usaron el dominio de unión a ADN de Gal4 fusionado a FKBP12 y el dominio activador de VP16 fusionado a ciclofilina y el compuesto FKCsA para mostrar heterodimerización y activación de un gen indicador bajo el control de un promotor que contiene sitios de unión a Gal4. Desgraciadamente, este sistema incluye inmunosupresores que pueden tener efectos secundarios no deseados y por tanto, se limita su uso a diversas aplicaciones de cambio génico en mamíferos.

También se han empleado sistemas de activación de la transcripción de eucariotas superiores tales como sistemas de receptores de hormonas esteroideas. Los receptores de hormonas esteroideas son miembros de la superfamilia de receptores nucleares y se encuentran en células de vertebrados e invertebrados. Desgraciadamente, el uso de compuestos esteroideos que activan los receptores para la regulación de la expresión génica, particularmente en plantas y mamíferos, está limitado debido a su implicación en muchas otras rutas biológicas naturales en tales organismos. Con el fin de superar tales dificultades, se ha desarrollado un sistema alternativo usando receptores de ecdisona (EcR) de insectos El crecimiento, la muda y el desarrollo en los insectos están regulados por la hormona esteroidea ecdisona (hormona de la muda) y las hormonas juveniles (Dhadialla, et al., 1998, Annu. Rev. Entomol. 43: 545-569) . La diana molecular para ecdisona en insectos consiste en al menos el receptor de ecdisona (EcR) y la proteína ultraespiráculo (USP) . El EcR es un miembro de la superfamilia de receptores de esteroides nucleares que se caracteriza por dominios de unión a ADN y a ligandos distintivos y un dominio de activación (Koelle et al. 1991, Cell,

67: 59-77) . Los receptores EcR responden a varios compuestos esteroideos tales como ponasterona A y muristerona A. Recientemente, se han descrito compuestos no esteroideos con actividad agonista ecdiesteroide, incluyendo los insecticidas disponibles comercialmente tebufenozida y metoxifenozida que se comercializan en todo el mundo por Rohm and Haas Company (véase la solicitud de patente internacional n.º PCT/EP96/00686 y la patente estadounidense 5.530.028) . Ambos análogos tienen perfiles de seguridad excepcionales para otros organismos.

El receptor de ecdisona (EcR) de insectos heterodimeriza con ultraespiráculo (USP) , el homólogo de insectos de RXR de mamíferos, y se une a elementos de respuesta del receptor de ecdisona y ecdiesteroides y activa la transcripción de genes de respuesta a ecdisona. Los complejos EcR/USP/ligando desempeñan importantes papeles durante el desarrollo y la reproducción de insectos. El EcR es un miembro de la superfamila de receptores de hormonas esteroideas y tiene cinco dominios modulares, dominios A/B (transactivación) , C (unión a ADN, heterodimerización) , D (bisagra, heterodimerización) , E (unión a ligando, heterodimerización y transactivación) y F

(transactivación) . Algunos de estos dominios tales como A/B, C y E conservan su función cuando se fusionan a otras proteínas.

Los sistemas de expresión génica inducible regulados estrechamente, o “interruptores génicos”, son útiles en diversas aplicaciones, tales como terapia génica, producción a gran escala de proteínas en células, ensayos de selección de alto rendimiento basados... [Seguir leyendo]

1. Compuesto de fórmula general:

en la que:

X es O o S, y X’ es O;

R1 es a) H, alquilo (C1-C6) , haloalquilo (C1-C6) , cianoalquilo (C1-C6) , alcoxicarbonil (C1-C6) -alquilo (C1-C6) , alcoxilo (C1-C6) o benciloxilo;

b) fenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 5 H; halo; nitro; ciano; hidroxilo; amino (-NRaRb) ; alquilo (C1-C6) ; haloalquilo (C1-C6) ; cianoalquilo (C1-C6) ; hidroxialquilo (C1-C6) ; alcoxilo (C1-C6) ; fenoxilo; haloalcoxilo (C1-C6) ; alcoxi (C1-C6) -alquilo (C1-C6) ; alcoxi (C1-C6) -alcoxilo (C1-C6) ; alcanoiloxi (C1C6) -alquilo (C1-C6) ; alquenilo (C2-C6) opcionalmente sustituido con halo, ciano, alquilo (C1-C4) o alcoxilo (C1-C4) ;

alquinilo (C2-C6) opcionalmente sustituido con halo o alquilo (C1-C4) ; formilo; carboxilo; alquil (C1-C6) -carbonilo; haloalquil (C1-C6) -carbonilo; benzoílo; alcoxi (C1-C6) -carbonilo; haloalcoxi (C1-C6) -carbonilo; alcanoiloxilo (C1-C6) (-OCORa) ; carboxamido (-CONRaRb) ; amido (-NRaCORb) ; alcoxicarbonilamino (-NRaCO2Rb) ; alquilaminocarbonilamino (-NRaCONRbRc) ; mercapto; alquiltio (C1-C6) ; alquil (C1-C6) -sulfonilo; alquil (C1-C6) -sulfóxido (-S (O) Ra) ; sulfamido (-SO2NRaRb) ; o fenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo,

nitro, alcoxilo (C1-C6) , alquilo (C1-C6) o amino; o cuando dos posiciones adyacentes en el anillo de fenilo están sustituidas con grupos alcoxilo, estos grupos, junto con los átomos de carbono a los que están unidos, pueden unirse como una unión (-OCH2O-) o (-OCH2CH2O-) para formar un anillo heterocíclico dioxolano o dioxano de 5 ó 6 miembros;

c) naftilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alcoxilo (C1-C6) , alquilo (C1-C6) o amino;

d) benzotiofen-2-ilo, benzotiofen-3-ilo, benzofuran-2-ilo o benzofuran-3-ilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, hidroxilo, alquilo (C1-C6) , alcoxilo (C1-C6) , carboxilo o alcoxi (C1-C6) -carbonilo (-CO2Ra) ;

e) 2, 3 ó 4-piridilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, ciano, nitro, hidroxilo, alquilo (C1-C6) , alcoxilo (C1-C6) o haloalcoxilo (C1-C6) ;

f) heterociclo de 5 miembros sustituido o no sustituido seleccionado de furilo, tiofenilo, triazolilo, pirrolilo, isopirrolilo, pirazolilo, isoimidazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, oxazolilo o isooxazolilo en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, hidroxilo, alquilo (C1-C6) , alcoxilo (C1-C6) , carboxilo, alcoxi (C1-C6) -carbonilo (-CO2Ra) o fenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alquilo (C1-C6) , haloalquilo (C1-C6) , alcoxilo (C1-C6) , haloalcoxilo (C1-C6) , carboxilo, alcoxi (C1-C4) -carbonilo (-CO2Ra)

o amino (-NRaRb) ;

g) fenilalquilo (C1-C6) , fenilalcoxi (C1-C6) -alquilo (C1-C6) o fenoxialquilo (C1-C6) sustituido o no sustituido por aromático en el que los sustituyentes aromáticos son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alcoxilo (C1-C6) , alquilo (C1-C6) o amino; o 50 h) fenilamino, fenilalquil (C1-C6) -amino o fenilcarbonilamino sustituido o no sustituido por aromático en el que los sustituyentes aromáticos son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alcoxilo (C1-C6) , alquilo (C1-C6) o amino;

en los que Ra, Rb y Rc son independientemente H, alquilo (C1-C6) o fenilo;

R2 y R3 son independientemente H, alquilo (C1-C6) , haloalquilo (C1-C6) , cianoalquilo (C1-C6) , hidroxialquilo (C1-C6) , alcoxi (C1-C6) -alquilo (C1-C6) , fenilo, o juntos como una unión de alcano (- (CH2) x-) , una unión de alquiloxialquilo ( (CH2) yO (CH2) z-) , una unión de alquilaminoalquilo (- (CH2) yNRa (CH2) z-) o una unión de alquilbenzoalquilo (- (CH2) y-1benzo-2- (CH2) z-) forman un anillo con el átomo de carbono al que están unidos,

en los que x = de 3 a 7, y = de 1 a 3, z = de 1 a 3 y Ra es H, alquilo (C1-C6) o fenilo; y

R4 es fenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 5 H; halo; nitro; ciano; hidroxilo; amino (-NRaRb) ; alquilo (C1-C6) ; haloalquilo (C1-C6) ; cianoalquilo (C1-C6) ; hidroxialquilo (C1-C6) ; alcoxilo (C1-C6) ; fenoxilo; haloalcoxilo (C1-C6) ; alcoxi (C1-C6) -alquilo (C1-C6) ; alcoxi (C1-C6) -alcoxilo (C1-C6) ; alcanoiloxi (C1-C6) -alquilo (C1-C6) ; alquenilo (C2-C6) opcionalmente sustituido con halo, ciano, alquilo (C1-C4) o alcoxilo (C1-C4) ; alquinilo (C2-C6) opcionalmente sustituido con halo o alquilo (C1-C4) ; formilo; carboxilo; alquil (C1C6) -carbonilo; haloalquil (C1-C6) -carbonilo; benzoílo; alcoxi (C1-C6) -carbonilo; haloalcoxi (C1-C6) -carbonilo; alcanoiloxilo (C1-C6) (-OCORa) ; carboxamido (-CONRaRb) ; amido (-NRaCORb) ; alcoxicarbonilamino (-NRaCO2Rb) ; alquilaminocarbonilamino (-NRaCONRbRc) ; mercapto; alquiltio (C1-C6) ; alquil (C1-C6) -sulfonilo; alquil (C1-C6) -sulfóxido (-S (O) Ra) ; sulfamido (-SO2NRaRb) ; o fenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alcoxilo (C1-C6) , alquilo (C1-C6) o amino; o cuando dos posiciones adyacentes en el anillo de fenilo están sustituidas con grupos alcoxilo, estos grupos, junto con los átomos de carbono a los que están unidos, pueden unirse para formar un anillo heterocíclico dioxolano (-OCH2O-) o dioxano (-OCH2CH2O-) de 5 ó 6 miembros; en los que Ra, Rb y Rc son independientemente H, alquilo (C1-C6) o fenilo;

siempre que R4 no sea 3-nitrofenilo o 4-nitrofenilo, y

cuando R4 es fenilo, entonces R1 no es fenilo,

cuando R4 es 3-clorofenilo, entonces R1 no es fenilamino o cuando R4 es 4-clorofenilo, entonces R1 no es metilo.

2. Compuesto según la reivindicación 1, en el que:

R1 es a) H, alquilo (C1-C6) , haloalquilo (C1-C6) , cianoalquilo (C1-C6) , alcoxicarbonil (C1-C6) -alquilo (C1-C6) , alcoxilo (C1-C6) o benciloxilo;

b) fenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 5 H; halo; nitro; ciano; hidroxilo; alquilo (C1-C6) ; haloalquilo (C1-C6) ; cianoalquilo (C1-C6) ; hidroxialquilo (C1-C6) ; alcoxilo (C1-C6) ; haloalcoxilo (C1-C6) ; alcoxi (C1-C6) -alquilo (C1-C6) ; alcanoiloxi (C1-C6) -alquilo (C1-C6) ; alquenilo (C2-C6) opcionalmente sustituido con halo, ciano, alquilo (C1-C4) o alcoxilo (C1-C4) ; alquinilo (C2-C6) opcionalmente sustituido con halo o alquilo (C1-C4) ; formilo; carboxilo; alquil (C1-C6) -carbonilo; haloalquil (C1-C6) -carbonilo; benzoílo; alcoxi (C1-C6) -carbonilo; alcanoiloxilo (C1-C6) (-OCORa) ; carboxamido (-CONRaRb) ; amido (-NRaCORb) ; alquil (C1-C6) -sulfonilo; alquil (C1-C6) sulfóxido (-S (O) Ra) ; sulfamido (-SO2NRaRb) ; o fenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alcoxilo (C1-C6) , alquilo (C1-C6) o amino; o cuando dos posiciones adyacentes en el anillo de fenilo están sustituidas con grupos alcoxilo, estos grupos, junto con los átomos de carbono a los que están unidos, pueden unirse como una unión (-OCH2O-) o (-OCH2CH2O-) para formar un anillo heterocíclico dioxolano o dioxano de 5 ó 6 miembros;

c) benzotiofen-2-ilo o benzofuran-2-ilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, hidroxilo, alquilo (C1-C6) o alcoxilo (C1-C6) ;

d) 2, 3 ó 4-piridilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, ciano, nitro, hidroxilo, alquilo (C1-C6) , alcoxilo (C1-C6) o haloalcoxilo (C1-C6) ;

e) heterociclo de 5 miembros sustituido o no sustituido seleccionado de furilo, tiofenilo, triazolilo, pirazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, oxazolilo o isooxazolilo en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, hidroxilo, alquilo (C1-C6) , alcoxilo (C1-C6) , carboxilo, alcoxi (C1-C6) -carbonilo (-CO2Ra) o fenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alquilo (C1-C6) , haloalquilo (C1-C6) , alcoxilo (C1-C6) , haloalcoxilo (C1-C6) , carboxilo o alcoxi (C1-C4) -carbonilo (-CO2Ra) ;

f) fenilalquilo (C1-C6) , fenilalcoxi (C1-C6) -alquilo (C1-C6) o fenoxialquilo (C1-C6) sustituido o no sustituido por aromático en el que los sustituyentes aromáticos son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alcoxilo (C1-C6) o alquilo (C1-C6) ; o g) fenilamino, fenilalquil (C1-C6) -amino o fenilcarbonilamino sustituido o no sustituido por aromático en el que los sustituyentes aromáticos son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alcoxilo (C1-C6) o alquilo (C1-C6) ;

en los que Ra y Rb son independientemente H, alquilo (C1-C6) o fenilo; R2 y R3 son independientemente H, alquilo (C1-C6) , haloalquilo (C1-C6) , cianoalquilo (C1-C6) , hidroxialquilo (C1-C6) , alcoxi (C1-C6) -alquilo (C1-C6) , fenilo, o juntos como una unión de alcano (- (CH2) x-) , una unión de alquiloxialquilo ( (CH2) yO (CH2) z-) , una unión de alquilaminoalquilo (- (CH2) yNRa (CH2) z-) o una unión de alquilbenzoalquilo (- (CH2) y-1-benzo-2- (CH2) z-) forman un anillo con el átomo de carbono al que están unidos,

en los que x = de 3 a 7, y = de 1 a 3, z = de 1 a 3 y Ra es H, alquilo (C1-C6) o fenilo; y

R4 es fenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 5 H; halo; nitro; ciano; hidroxilo; alquilo (C1-C6) ; haloalquilo (C1-C6) ; cianoalquilo (C1-C6) ; hidroxialquilo (C1-C6) ; alcoxilo (C1-C6) ; haloalcoxilo (C1-C6) ; alcoxi (C1-C6) -alquilo (C1-C6) ; alcanoiloxi (C1-C6) -alquilo (C1-C6) ; alquenilo (C2-C6) opcionalmente sustituido con halo, ciano, alquilo (C1-C4) o alcoxilo (C1-C4) ; alquinilo (C2-C6) opcionalmente sustituido con halo o alquilo (C1-C4) ; formilo; carboxilo; alquil (C1-C6) -carbonilo; haloalquil (C1-C6) -carbonilo; benzoílo; alcoxi (C1-C6) -carbonilo; alcanoiloxilo (C1-C6) (-OCORa) ; carboxamido (-CONRaRb) ; amido (-NRaCORb) ; alquil (C1-C6) sulfonilo; alquil (C1-C6) -sulfóxido (-S (O) Ra) ; sulfamido (-SO2NRaRb) ; o fenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alcoxilo (C1-C6) , alquilo (C1-C6) o amino; o cuando dos posiciones adyacentes en el anillo de fenilo están sustituidas con grupos alcoxilo, estos grupos, junto con los átomos de carbono a los que están unidos, pueden unirse como una unión (-OCH2O-) o (-OCH2CH2O-) para formar un anillo heterocíclico dioxolano o dioxano de 5 ó 6 miembros; en los que Ra y Rb son independientemente H, alquilo (C1-C6)

o fenilo; siempre que R4 no sea 3-nitrofenilo o 4-nitrofenilo, y cuando R4 es fenilo, entonces R1 no es fenilo, cuando R4 es 3-clorofenilo, entonces R1 no es fenilamino o cuando R4 es 4-clorofenilo, entonces R1 no es metilo.

3. Compuesto según la reivindicación 2, en el que: X es O; X’ es O;

R1 es a) H, alquilo (C1-C6) , haloalquilo (C1-C6) o alcoxicarbonil (C1-C6) -alquilo (C1-C6) ;

b) fenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 5 H; halo; nitro; ciano; alquilo (C1-C6) ; haloalquilo (C1-C6) ; alcoxilo (C1-C6) ; haloalcoxilo (C1-C6) ; alquil (C1-C6) -carbonilo; alcoxi (C1-C6) carbonilo; carboxamido (-CONRaRb) ; amido (-NRaCORb) ; o fenilo; o cuando dos posiciones adyacentes en el anillo de fenilo están sustituidas con grupos alcoxilo, estos grupos, junto con los átomos de carbono a los que están unidos, pueden unirse como una unión (-OCH2O-) o (-OCH2CH2O-) para formar un anillo heterocíclico dioxolano o dioxano de 5 ó 6 miembros;

c) benzotiofen-2-ilo o benzofuran-2-ilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, hidroxilo, alquilo (C1-C6) o alcoxilo (C1-C6) ;

d) furilo o tiofenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alquilo (C1-C6) , alcoxilo (C1-C6) , carboxilo, alcoxi (C1-C6) -carbonilo (-CO2Ra) o fenilo;

e) fenilalquilo (C1-C6) , fenilalcoxi (C1-C6) -alquilo (C1-C6) o fenoxialquilo (C1-C6) sustituido o no sustituido por aromático en el que los sustituyentes aromáticos son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alcoxilo (C1-C6) o alquilo (C1-C6) ; o f) fenilamino, fenilalquil (C1-C6) -amino o fenilcarbonilamino sustituido o no sustituido por aromático en el que los sustituyentes aromáticos son independientemente de 1 a 3 halo, nitro, alcoxilo (C1-C6) o alquilo (C1-C6) ;

en los que Ra y Rb son independientemente H, alquilo (C1-C6) o fenilo;

R2 y R3 son independientemente H, alquilo (C1-C6) , haloalquilo (C1-C6) , alcoxi (C1-C6) -alquilo (C1-C6) , fenilo, o juntos como una unión de alcano (- (CH2) x-) , una unión de alquiloxialquilo (- (CH2) yO (CH2) z-) , una unión de alquilaminoalquilo (- (CH2) yNRa (CH2) z-) o una unión de alquilbenzoalquilo (- (CH2) y-1-benzo-2- (CH2) z-) forman un anillo con el átomo de carbono al que están unidos,

en los que x = de 3 a 7, y = de 1 a 3, z = de 1 a 3 y Ra es H, alquilo (C1-C6) o fenilo; y R4 es fenilo sustituido o no sustituido en el que los sustituyentes son independientemente de 1 a 5 H; halo; nitro; ciano; alquilo (C1-C6) ; haloalquilo (C1-C6) ; alcoxilo (C1-C6) ; haloalcoxilo (C1-C6) ; alquil (C1-C6) -carbonilo; alcoxi (C1C6) -carbonilo; carboxamido (-CONRaRb) ; amido (-NRaCORb) ; o fenilo; o cuando dos posiciones adyacentes en el anillo de fenilo están sustituidas con grupos alcoxilo, estos grupos, junto con los átomos de carbono a los que están unidos, pueden unirse como una unión (-OCH2O-) o (-OCH2CH2O-) para formar un anillo heterocíclico dioxolano o dioxano de 5 ó 6 miembros; en los que Ra y Rb son independientemente H, alquilo (C1-C6) o fenilo;

siempre que R4 no sea 3-nitrofenilo o 4-nitrofenilo, y

cuando R4 es fenilo, entonces R1 no es fenilo,

cuando R4 es 3-clorofenilo, entonces R1 no es fenilamino o cuando R4 es 4-clorofenilo, entonces R1 no es metilo.

4. Compuesto según la reivindicación 3 en el que:

X y X’ son O; R1

es fenilo, 4-clorofenil-, 4-etilfenil-, 2-etil-3, 4-etilendioxifenilo, 3-fluorofenil-, 2-fluoro-4-etilfenil-, 2-metil-3-metoxifenil-, 2etil-3-metoxifenilo, 3-metilfenil-, 2-metoxifenil-, 2-nitrofenil-, 3-nitrofenil-, 2-furanil-, bencil-, benzotiofen-2-il-, fenilamino-, benciloximetilo, fenoximetil-, 3-toluoilamino-, bencilamino-, benzoilamino-, etoxicarboniletil- o 3-cloro2, 2, 3, 3-tetrafluoroetilo;

R2 y R3 son independientemente metilo, etilo, o juntos como una unión de tetrametileno (- (CH2) 4-) , 4-pirano (-CH2CH2OCH2CH2-) o metillenbenzoetileno (-CH2-1-benzo-2-CH2CH2-) forman un anillo con el átomo de carbono al que están unidos; y

R4

es fenilo, 4-bifenilo, 4-clorofenilo, 2, 4-dimetoxifenilo, 3, 5-dimetilfenilo, 2-metoxifenilo, 3, 4-metilendioxifenilo, 3trifluorometilfenilo o 4-triflurometoxifenilo;

siempre que cuando R4 es fenilo, entonces R1 no es fenilo.

5. Compuesto seleccionado del grupo que consiste en: 1-bencil-3-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-urea; 1-benzoil-3-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-urea; N-[3- (4-cloro-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-4-etil-benzamida; 3-cloro-N-[3- (4-cloro-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2, 2, 3, 3-tetrafluoro-propionamida; N-[3- (4-cloro-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-benzamida; [3- (4-cloro-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-amida del ácido benzo[b]tiofen-2-carboxílico; éster etílico del ácido N-[3- (4-cloro-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-succinámico; 1-[3- (4-cloro-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-3-fenil-urea; N-[3- (4-cloro-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-fenoxi-acetamida; 2-benciloxi-N-[3- (4-cloro-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-acetamida; [3- (4-cloro-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-amida del ácido furan-2-carboxílico; N-[3- (4-cloro-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-fenil-acetamida; N-[3- (4-cloro-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-etil-3-metoxi-benzamida; N-[5, 5-dimetil-3- (4-trifluorometoxi-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-benzamida; N-[5, 5-dimetil-3- (4-trifluorometoxi-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-4-etil-benzamida; [5, 5-dimetil-3- (4-trifluorometoxi-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-amida del ácido benzo[b]tiofen-2-carboxílico; 1-[5, 5-dimetil-3- (4-trifluorometoxi-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-3-fenil-urea; N-[5, 5-dimetil-3- (4-trifluorometoxi-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-fenoxi-acetamida; 2-benciloxi-N-[5, 5-dimetil-3- (4-trifluorometoxi-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-acetamida; N-[5, 5-dimetil-3- (4-trifluorometoxi-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-fenil-acetamida; [5, 5-dimetil-3- (4-trifluorometoxi-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-amida del ácido furan-2-carboxílico; N-[5, 5-dimetil-3- (4-trifluorometoxi-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-etil-3-metoxi-benzamida; N-[5, 5-dimetil-3- (3-trifluorometil-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-4-etil-benzamida; N-[5, 5-dimetil-3- (3-trifluorometil-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-benzamida; 3-cloro-N-[5, 5-dimetil-3- (3-trifluorometil-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2, 2, 3, 3-tetrafluoro-propionamida; éster etílico del ácido N-[5, 5-dimetil-3- (3-trifluorometil-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-succinámico; 1-[5, 5-dimetil-3- (3-trifluorometil-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-3-fenil-urea; 2-benciloxi-N-[5, 5-dimetil-3- (3-trifluorometil-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-acetamida; [5, 5-dimetil-3- (3-trifluorometil-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-amida del ácido furan-2-carboxílico; 4-etil-N-[3- (2-metoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-benzamida; N-[3- (2-metoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-benzamida; N-[5, 5-dimetil-3- (3-trifluorometil-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-etil-3-metoxi-benzamida; N-[5, 5-dimetil-3- (3-trifluorometil-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-fenil-acetamida; N-[5, 5-dimetil-3- (3-trifluorometil-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-fenoxi-acetamida; [5, 5-dimetil-3- (3-trifluorometil-fenil) -[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-amida del ácido benzo[b]tiofen-2-carboxílico; 3-cloro-2, 2, 3, 3-tetrafluoro-N-[3- (2-metoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-propionamida; éster etílico del ácido N-[3- (2-metoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-succinámico; [3- (2-metoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-amida del ácido benzo[b]tiofen-2-carboxílico; 1-[3- (2-metoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-3-fenil-urea; N-[3- (2-metoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-fenoxi-acetamida; 2-benciloxi-N-[3- (2-metoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-acetamida; N-[3- (2-metoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-fenil-acetamida; [3- (2-metoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-amida del ácido furan-2-carboxílico; 2-etil-3-metoxi-N-[3- (2-metoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-benzamida; N- (3-benzo[1, 3]dioxol-5-il-5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -4-etil-benzamida; N- (3-benzo[1, 3]dioxol-5-il-5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -benzamida; éster etílico del ácido N- (3-benzo[1, 3]dioxol-5-il-5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -succinámico; (3-benzo[1, 3]dioxol-5-il-5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -amida del ácido benzo[b]tiofen-2-carboxílico; 1- (3-benzo[1, 3]dioxol-5-il-5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -3-fenil-urea; N- (3-benzo[1, 3]dioxol-5-il-5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -2-fenoxi-acetamida; N- (3-benzo[1, 3]dioxol-5-il-5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -2-benciloxi-acetamida; N- (3-benzo[1, 3]dioxol-5-il-5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -2-fenil-acetamida; (3-benzo[1, 3]dioxol-5-il-5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -amida del ácido furan-2-carboxílico; N- (3-benzo[1, 3]dioxol-5-il-5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -2-etil-3-metoxi-benzamida; N-[3- (2, 4-dimetoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-4-etil-benzamida; N-[3- (2, 4-dimetoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-benzamida; éster etílico del ácido N-[3- (2, 4-dimetoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-succinámico; [3- (2, 4-dimetoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-amida del ácido benzo[b]tiofen-2-carboxílico; 1-[3- (2, 4-dimetoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-3-fenil-urea; N-[3- (2, 4-dimetoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-fenoxi-acetamida; 2-benciloxi-N-[3- (2, 4-dimetoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-acetamida; N-[3- (2, 4-dimetoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-fenil-acetamida; [3- (2, 4-dimetoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-amida del ácido furan-2-carboxílico; N-[3- (2, 4-dimetoxi-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-etil-3-metoxi-benzamida; N- (3-bifenil-4-il-5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -4-etil-benzamida; N- (3-bifenil-4-il-5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -2-etil-3-metoxi-benzamida; 4-etil-N- (5-etil-5-metil-3-fenil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -benzamida; N- (5-etil-5-metil-3-fenil-[1, 2, 4] oxadiazol-4-il) -benzamida; (5-etil-5-metil-3-fenil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -amida del ácido benzo[b]tiofen-2-carboxílico; 1- (5-etil-5-metil-3-fenil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -3-fenil-urea; N- (5-etil-5-metil-3-fenil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -2-fenoxi-acetamida; 2-benciloxi-N- (5-etil-5-metil-3-fenil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -acetamida; N- (5-etil-5-metil-3-fenil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -2-fenil-acetamida; (5-etil-5-metil-3-fenil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -amida del ácido furan-2-carboxílico; 2-etil-N- (5-etil-5-metil-3-fenil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -3-metoxi-benzamida; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -5-etil-5-metil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-4-etil-benzamida; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -5-etil-5-metil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-benzamida; 3-cloro-N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -5-etil-5-metil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2, 2, 3, 3-tetrafluoro-propionamida; éster etílico del ácido N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -5-etil-5-metil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-succinámico; [3- (3, 5-dimetil-fenil) -5-etil-5-metil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-amida del ácido benzo[b]tiofen-2-carboxílico; 1-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -5-etil-5-metil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-3-fenil-urea; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -5-etil-5-metil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-fenoxi-acetamida; 2-benciloxi-N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -5-etil-5-metil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-acetamida; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -5-etil-5-metil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-fenil-acetamida; [3- (3, 5-dimetil-fenil) -5-etil-5-metil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-amida del ácido furan-2-carboxílico; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -5-etil-5-metil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-2-etil-3-metoxi-benzamida; 4-etil-N- (3-fenil-1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il) -benzamida; N- (3-fenil-1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il) -benzamida; 3-cloro-2, 2, 3, 3-tetrafluoro-N- (3-fenil-1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il) -propionamida; éster etílico del ácido N- (3-fenil-1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il) -succinámico; (3-fenil-1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il) -amida del ácido benzo[b]tiofen-2-carboxílico; 1-fenil-3- (3-fenil-1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il) -urea; 2-fenoxi-N- (3-fenil-1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il) -acetamida; 2-benciloxi-N- (3-fenil-1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il) -acetamida; 2-fenil-N- (3-fenil-1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il) -acetamida; (3-fenil-1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il) -amida del ácido furan-2-carboxílico; 2-etil-3-metoxi-N- (3-fenil-1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il) -benzamida; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il]-4-etil-benzamida; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il]-benzamida; 3-cloro-N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il]-2, 2, 3, 3-tetrafluoro-propionamida; éster etílico del ácido N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il]-succinámico; [3- (3, 5-dimetil-fenil) -1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il]-amida del ácido benzo[b]tiofen-2-carboxílico; 1-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il]-3-fenil-urea; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il]-2-fenoxi-acetamida; 2-benciloxi-N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il]-acetamida; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il]-2-fenil-acetamida; [3- (3, 5-dimetil-fenil) -1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il]-amida del ácido furan-2-carboxílico; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il]-2-etil-3-metoxi-benzamida; 4-etil-N- (3-fenil-1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il) -benzamida; N- (3-fenil-1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il) -benzamida; 1-fenil-3- (3-fenil-1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il) -urea; 2-fenoxi-N- (3-fenil-1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il) -acetamida; 2-benciloxi-N- (3-fenil-1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il) -acetamida;

2. fenil-N- (3-fenil-1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il) -acetamida; 2-etil-3-metoxi-N- (3-fenil-1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il) -benzamida; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il]-4-etil-benzamida; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il]-benzamida; 1-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il]-3-fenil-urea; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il]-2-fenoxi-acetamida; 2-benciloxi-N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il]-acetamida; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il]-2-fenil-acetamida; [3- (3, 5-dimetil-fenil) -1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il]-amida del ácido furan-2-carboxílico; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il]-2-etil-3-metoxi-benzamida; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]-7, 8-benzo-dec-2-en-4-il]-3-metoxi-2-metil-benzamida; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1, 8-dioxa-2, 4-diaza-espiro[4.5]dec-2-en-4-il]-3-metoxi-2-metil-benzamida; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -5, 5-dimetil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-3-metoxi-2-metil-benzamida; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -5-etil-5-metil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-4-etil-2-fluoro-benzamida; 4-etil-2-fluoro-N- (3-fenil-1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il) -benzamida; N-[3- (3, 5-dimetil-fenil) -1-oxa-2, 4-diaza-espiro[4.4]non-2-en-4-il]-4-etil-2-fluoro-benzamida; N- (5, 5-dimetil-3-fenil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -4-etil-2-fluoro-benzamida; (5, 5-dimetil-3-fenil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il) -amida del ácido 5-etil-2, 3-dihidro-benzo[1, 4]dioxin-6-carboxílico; y [3- (3, 5-dimetil-fenil) -5-etil-5-metil-[1, 2, 4]oxadiazol-4-il]-amida del ácido 5-etil-2, 3-dihidro-benzo[1, 4]dioxin-6

carboxílico.

6. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, para su uso en la modulación de la expresión de un gen diana en una célula huésped, en el que la célula huésped incluye un primer casete de expresión génica que comprende un primer polinucleótido que codifica para un primer polipéptido que comprende:

(i) un dominio de transactivación,

(ii) un dominio de unión a ADN, y

(iii) un dominio de unión a ligando del receptor nuclear de grupo H; un segundo casete de expresión génica que comprende:

(i) un elemento de respuesta que puede unirse a dicho dominio de unión a ADN,

(ii) un promotor que se activa mediante el dominio de transactivación, y dicho gen diana.

7. Uso de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, para la fabricación de un medicamento para modular la expresión de un gen diana en una célula huésped, en el que la célula huésped incluye un primer casete de expresión génica que comprende un primer polinucleótido que codifica para un primer polipéptido que comprende:

(i) un dominio de transactivación,

(ii) un dominio de unión a ADN, y

(iii) un dominio de unión a ligando del receptor nuclear de grupo H; un segundo casete de expresión génica que comprende:

(i) un elemento de respuesta que puede unirse a dicho dominio de unión a ADN,

(ii) un promotor que se activa mediante el dominio de transactivación, y

(iii) dicho gen diana.

8. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, para su uso en la modulación de la expresión de uno o más genes exógenos en un sujeto.

9. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, para su uso en la regulación de la expresión génica endógena o heteróloga en un sujeto transgénico que comprende poner en contacto dicho compuesto con un complejo de receptor de ecdisona dentro de las células del sujeto, en el que las células contienen además una secuencia de unión a ADN para el complejo de receptor de ecdisona cuando está en combinación con dicho compuesto y en el que la formación de un complejo de complejo de receptor de ecdisona-compuesto-secuencia de unión a ADN induce la expresión del gen.

10. Compuesto según la reivindicación 9, en el que el complejo de receptor de ecdisona es un complejo de receptor de ecdisona quimérico y el constructo de ADN comprende además un promotor.

11. Compuesto según la reivindicación 9, en el que el sujeto es una planta.

12. Compuesto según la reivindicación 9, en el que el sujeto es un mamífero.

13. Uso de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, para la fabricación de un medicamento para regular la expresión génica endógena o heteróloga en un sujeto transgénico que comprende poner en contacto dicho compuesto con un complejo de receptor de ecdisona dentro de las células del sujeto, en el que las células contienen además una secuencia de unión a ADN para el complejo de receptor de ecdisona cuando está en combinación con dicho compuesto y en el que formación de un complejo de complejo de receptor de ecdisonacompuesto-secuencia de unión a ADN induce la expresión del gen.

14. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, para su uso en la modulación de la expresión de un gen en una célula huésped que comprende las etapas de:

a) introducir en la célula huésped un sistema de modulación de la expresión génica que comprende:

i) un primer casete de expresión génica que puede expresarse en una célula huésped que comprende una secuencia de polinucleótido que codifica para un primer polipéptido híbrido que comprende:

(a) un dominio de unión a ADN que reconoce un elemento de respuesta asociado con un gen cuya expresión va a modularse; y

(b) un dominio de unión a ligando del receptor de ecdisona;

ii) un segundo casete de expresión génica que puede expresarse en la célula huésped que comprende una secuencia de polinucleótido que codifica para un segundo polipéptido híbrido que comprende:

(a) un dominio de transactivación; y

(b) un dominio de unión a ligando del receptor X retinoide quimérico; y

iii) un tercer casete de expresión génica que puede expresarse en una célula huésped que comprende una secuencia de polinucleótido que comprende:

(a) un elemento de respuesta reconocido por el dominio de unión a ADN del primer polipéptido híbrido;

(b) un promotor que se activa mediante el dominio de transactivación del segundo polipéptido híbrido; y

(c) un gen cuya expresión va a modularse; y b) introducir en la célula huésped dicho compuesto.

15. Uso de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, para la fabricación de un medicamento para modular la expresión de un gen en una célula huésped que comprende las etapas de: a) introducir en la célula huésped un sistema de modulación de la expresión génica que comprende: i) un primer casete de expresión génica que puede expresarse en una célula huésped que comprende una

secuencia de polinucleótido que codifica para un primer polipéptido híbrido que comprende:

(a) un dominio de unión a ADN que reconoce un elemento de respuesta asociado con un gen cuya expresión va a modularse; y

(b) un dominio de unión a ligando del receptor de ecdisona;

ii) un segundo casete de expresión génica que puede expresarse en la célula huésped que comprende una secuencia de polinucleótido que codifica para un segundo polipéptido híbrido que comprende:

(a) un dominio de transactivación; y

(b) un dominio de unión a ligando del receptor X retinoide quimérico; y

iii) un tercer casete de expresión génica que puede expresarse en una célula huésped que comprende una secuencia de polinucleótido que comprende:

(a) un elemento de respuesta reconocido por el dominio de unión a ADN del primer polipéptido híbrido;

(b) un promotor que se activa mediante el dominio de transactivación del segundo polipéptido híbrido; y

(c) un gen cuya expresión va a modularse; y b) introducir en la célula huésped dicho compuesto.

16. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, para su uso en la producción de un polipéptido que comprende las etapas de: a) seleccionar una célula que es sustancialmente insensible a la exposición a dicho compuesto; b) introducir en la célula: 1) un constructo de ADN que comprende: i) un gen exógeno que codifica para el polipéptido; y ii) un elemento de respuesta; en el que el gen está bajo el control del elemento de respuesta; y 2) un complejo de receptor de ecdisona que comprende: i) un dominio de unión a ADN; ii) un dominio de unión para dicho compuesto; y

iii) un dominio de transactivación; y c) exponer la célula a dicho compuesto.

17. Uso de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, para la fabricación de un medicamento para producir un polipéptido que comprende las etapas de: a) seleccionar una célula que es sustancialmente insensible a la exposición a dicho compuesto; b) introducir en la célula:

1) un constructo de ADN que comprende: i) un gen exógeno que codifica para el polipéptido; y

ii) un elemento de respuesta;

en el que el gen está bajo el control del elemento de respuesta; y

2) un complejo de receptor de ecdisona que comprende:

i) un dominio de unión a ADN;

ii) un dominio de unión para dicho compuesto; y

iii) un dominio de transactivación; y

c) exponer la célula a dicho compuesto.