Formulaciones que comprenden antagonistas de VEGF para administración intravítrea.

Una formulación oftálmica de un antagonista del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF),

quecomprende:

(a) 1-100 mg/ml de un antagonista de VEGF que consiste en los aminoácidos 27-457 del SEQ ID NO: 4, que estáglicosilado en los residuos de Asn 62, 94, 149, 222 y 308;

(b) 0,01-5%de uno o más co-disolventes orgánicos que son uno o más de polisorbato, polietilenglicol (PEG), ypropilenglicol;

(c) 30-150 mM de un agente de tonicidad seleccionado entre cloruro de sodio o cloruro de potasio;

(d) 5-40 mM de tampón fosfato de sodio; y

(e) 1,0-7,5% de un agente estabilizante seleccionado del grupo que consiste en sacarosa, sorbitol, glicerol,trehalosa, y manitol, pH entre aproximadamente 5,8-7,0, en donde la formulación es adecuada para laadministración intravítrea.

Formulaciones que comprenden antagonistas de VEGF para administración intravítrea Antecedentes de la Invención Campo de la Invención La presente invención está dirigida a formulaciones farmacéuticas adecuadas para la administración intravítrea, que comprenden agentes capaces de inhibir el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) , y a los métodos para elaborar y utilizar tales formulaciones. La invención incluye formulaciones farmacéuticas líquidas que tienen una estabilidad incrementada, así como formulaciones que se pueden liofilizar y reconstituir para la administración intravítrea.

Estado de la Técnica Relacionada La expresión del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) es casi ubicua en el cáncer humano, en consonancia con su papel como mediador clave de la neoangiogénesis tumoral. El bloqueo de la función de VEGF, por medio de la unión a la molécula o su receptor VEGFR-2, inhibe el crecimiento de las células tumorales implantadas en múltiples modelos de xenoinjerto diferentes (véase, por ejemplo, Gerber et al. (2000) Cancer Res. 60:6253-6258) . Se ha descrito un antagonista de la proteína de fusión específica de VEGF soluble, denominado "trampa de VEGF" (Kim et al. (2002) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99:11399-404; Holash et al. (2002) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99: 11393-8) .

Se conocen formulaciones oftálmicas, véanse por ejemplo, las Patentes de los Estados Unidos Núms.

7.033.604 y 6.777.429. Se describe una formulación oftálmica de un anticuerpo para VEGF en la Patente de los Estados Unidos Núm. 6.676.941.

Comúnmente se utiliza la liofilización (secado por congelación en condiciones controladas) para el almacenamiento de proteínas a largo plazo. La proteína liofilizada es sustancialmente resistente a la degradación, agregación, oxidación, y otros procesos degenerativos mientras se encuentra en estado secado por congelación (véase, por ejemplo, la Patente de los Estados Unidos Núm. 6.436.897) .

El documento WO 2006/047325 está relacionado con un método para tratar enfermedades neovasculares intraoculares. El documento WO 2005/020972 está relacionado con la terapia combinada para el tratamiento de los trastornos neovasculares oculares. El documento WO 2006/104852 y la Patente de los Estados Unidos 2006/0217311 A1 están relacionados con formulaciones antagonistas de VEGF.

Breve Resumen de la Invención Se proporcionan formulaciones estables de un antagonista de una proteína de fusión específica de VEGF. Se proporcionan formulaciones farmacéuticamente aceptables que comprenden un antagonista "trampa" de VEGF con un portador farmacéuticamente aceptable. En realizaciones específicas, se proporcionan formulaciones líquidas y liofilizadas.

En un primer aspecto, se proporciona una formulación oftálmica líquida estable de un antagonista de una proteína de fusión específica de VEGF, que comprende una proteína de fusión que comprende un componente receptor que consiste esencialmente en un dominio 2 de tipo inmunoglobulina (Ig) de un primer receptor de VEGF y un dominio 3 de Ig de un segundo receptor de VEGF, y un componente multimerizante (también denominado "trampa de VEGF") .

El antagonista de la proteína de fusión específica de VEGF consiste en los aminoácidos 27-457 del SEQ ID NO: 4 que está glicosilado en los residuos de Asn 62, 94, 149, 222 y 308.

En un aspecto, la invención proporciona una formulación oftálmica de un antagonista del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) , que comprende:

1. (a) 1-100 mg/ml de un antagonista de VEGF que consiste en los aminoácidos 27-457 del SEQ ID NO: 4, que está glicosilado en los residuos de Asn 62, 94, 149, 222 y 308;

2. (b) 0, 01-5% de uno o más co-disolventes orgánicos que son uno o más de polisorbato, polietilenglicol (PEG) , y propilenglicol;

3. (c) 30-150 mM de un agente de tonicidad seleccionado entre seleccionado entre cloruro de sodio o cloruro 60 de potasio;

4. (d) 5-40 mM de tampón fosfato de sodio; y

5. (e) 1, 0-7, 5% de un agente estabilizante seleccionado del grupo que consiste en sacarosa, sorbitol, glicerol, trehalosa, y manitol, pH entre aproximadamente 5, 8-7, 0, en donde la formulación es adecuada para la administración intravítrea.

En una o más realizaciones específicas, el co-disolvente orgánico puede ser polisorbato, por ejemplo, polisorbato 20

o polisorbato 80, polietilenglicol (PEG) , por ejemplo, PEG 3350, o propilenglicol, o una combinación de los mismos; el agente de tonicidad puede ser cloruro de sodio o cloruro de potasio; el agente estabilizante puede ser sacarosa, sorbitol, glicerol, trehalosa, o manitol; y el agente tamponador comprende tampón fosfato de sodio 5-40 mM.

En diferentes realizaciones, el co-disolvente es polisorbato y/o PEG, el agente estabilizante es sacarosa, el agente tamponador es tampón fosfato de sodio, y el agente de tonicidad es cloruro de sodio.

Más específicamente, la formulación oftálmica líquida estable comprende aproximadamente 40-50 mg/ml del antagonista de VEGF, tampón fosfato aproximadamente 10 mM, polisorbato y/o PEG al 0, 01-3%, cloruro de sodio 40-135 mM, y sacarosa al 5, 0%, pH aproximadamente 6, 2-6, 3.

En una realización preferida específica, la formulación oftálmica líquida estable comprende aproximadamente 50 mg/ml del antagonista de VEGF, tampón fosfato de sodio 10 mM, cloruro de sodio 50 mM, polisorbato al 0, 1%, y sacarosa al 5%, pH aproximadamente 6, 2-6, 3.

En una realización preferida específica, la formulación oftálmica líquida estable comprende aproximadamente 50 mg/ml del antagonista de VEGF, tampón fosfato de sodio 10 mM, cloruro de sodio 50 mM, PEG al 3%, y sacarosa al 5%, pH aproximadamente 6, 2-6, 3.

En una realización preferida específica, la formulación oftálmica líquida estable comprende aproximadamente 40 mg/ml del antagonista de VEGF, tampón fosfato de sodio 10 mM, cloruro de sodio 40 mM, polisorbato al 0, 03%, y sacarosa al 5%, pH aproximadamente 6, 2-6, 3.

En una realización preferida específica, la formulación oftálmica líquida estable comprende aproximadamente 40 mg/ml del antagonista de VEGF, tampón fosfato de sodio 10 mM, cloruro de sodio 135 mM, y polisorbato al 0, 03%, pH aproximadamente 6, 2-6, 3.

En otro aspecto, se proporciona una formulación oftálmica líquida estable que comprende un antagonista de una proteína de fusión específica de VEGF de 1-100 mg/ml; uno o más co-disolventes orgánicos al 0, 01-5% seleccionados entre polisorbato, polietilenglicol (PEG) , y propilenglicol; 5-40 mM de tampón fosfato de sodio: y 30150 mM de uno o más agentes de tonicidad seleccionados entre cloruro de sodio y cloruro de potasio y/o 1, 0-7, 5% de un agente estabilizante seleccionado del grupo que consiste en sacarosa, sorbitol, glicerol, trehalosa, o manitol; teniendo un pH entre aproximadamente 5, 8-7, 0.

En diversas realizaciones, el antagonista de VEGF está presente a una concentración de aproximadamente 10 a aproximadamente 80 mg/ml. En diversas realizaciones, el antagonista de VEGF está presente a una concentración de aproximadamente 10, aproximadamente 20, aproximadamente 30, aproximadamente 40, aproximadamente 50, aproximadamente 60, aproximadamente 70, o aproximadamente 80 mg/ml. En una realización preferida, el antagonista de VEGF está presente a una concentración de aproximadamente 40 mg/ml.

El agente estabilizante se selecciona entre uno o más de sacarosa, sorbitol, glicerol, trehalosa, y manitol.

El co-disolvente orgánico se selecciona entre uno o más de polisorbato, por ejemplo, polisorbato 20 o polisorbato 80, polietilenglicol (PEG) , por ejemplo, PEG 3350, y propilenglicol.

El tampón comprende 5-40 mM del tampón fosfato de sodio.

El agente de tonicidad es una sal seleccionada entre cloruro de sodio o cloruro de potasio, por ejemplo el agente es cloruro de sodio.

En una realización, la formulación oftálmica líquida estable comprende tampón fosfato de sodio 10 mM, polisorbato de aproximadamente 0, 03 a aproximadamente 0, 1% y/o PEG o propilenglicol a aproximadamente 3%, cloruro de sodio aproximadamente 40 mM, y sacarosa aproximadamente al 5%. En una realización específica, la formulación oftálmica líquida estable comprende tampón fosfato de sodio 10 mM, polisorbato aproximadamente al 0, 03%, cloruro de sodio aproximadamente 40 mM, y sacarosa aproximadamente al 5%. En otra realización específica, el pH de la formulación es de aproximadamente 6, 2 a aproximadamente 6, 3. En otra realización específica, el pH se logra mezclando fosfato de sodio mono-y di-básico al pH deseado sin titulación ácido/base.

En una realización específica, la formulación... [Seguir leyendo]

1. Una formulación oftálmica de un antagonista del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) , que comprende:

(a) 1-100 mg/ml de un antagonista de VEGF que consiste en los aminoácido.

2. 457 del SEQ ID NO: 4, que está glicosilado en los residuos de Asn 62, 94, 149, 222 y 308;

(b) 0, 01-5%de uno o más co-disolventes orgánicos que son uno o más de polisorbato, polietilenglicol (PEG) , y propilenglicol;

(c) 30-150 mM de un agente de tonicidad seleccionado entre cloruro de sodio o cloruro de potasio;

(d) 5-40 mM de tampón fosfato de sodio; y

(e) 1, 0-7, 5% de un agente estabilizante seleccionado del grupo que consiste en sacarosa, sorbitol, glicerol, trehalosa, y manitol, pH entre aproximadamente 5, 8-7, 0, en donde la formulación es adecuada para la administración intravítrea.

2. Una formulación oftálmica de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende aproximadamente 1-100 mg/ml, preferiblemente 10-80 mg/ml, del antagonista de VEGF, tampón fosfato de sodio 10 mM, NaCl 40 mM, polisorbato al 0, 03%, y sacarosa al 5%, pH aproximadamente 6, 2-6, 3.

3. Una formulación oftálmica de acuerdo con la reivindicación 2, que comprende antagonista de VEGF a una concentración seleccionada del grupo que consiste en 10 mg/ml, 20 mg/ml, 40 mg/ml, y 80 mg/ml.

4. Una formulación oftálmica de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende 1080 mg/ml de un antagonista de VEGF, fosfato de sodio 10 mM, polisorbato al 0, 03%, y cloruro de sodio 135 mM, pH aproximadamente 6, 2-6, 3.

5. Una formulación oftálmica de acuerdo con la reivindicación 1 que comprende:

(a) 10 mg/ml o 40 mg/ml de un antagonista de VEGF que consiste en los aminoácido.

2. 457 del SEQ ID NO: 4, que está glicosilado en los residuos de Asn 62, 94, 149, 222 y 308;

(b) polisorbato 20 al 0, 03%;

(c) cloruro de sodio aproximadamente 40 mM;

(d) tampón fosfato de sodio 10 mM; y

(e) sacarosa al 5%, en donde el pH de la formulación es el pH 6, 2-6, 3.

6. Una formulación liofilizable de un antagonista del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) , que comprende

(a) 5-50 mg/ml del antagonista de VEGF, preferiblemente 5 mg/ml, 10 mg/ml, 20 mg/ml o 40 mg/ml, que consiste en los aminoácido.

2. 457 del SEQ ID NO: 4, que está glicosilado en los residuos de Asn 62, 94, 149, 222 y 308;

(b) 5-25 mM de tampón fosfato de sodio, pH aproximadamente 5, 8-7, 0;

(c) 0, 01-0, 15% de un co-disolvente orgánico, seleccionado del grupo que consiste en polisorbato, polietilenglicol (PEG) , propilenglicol, y una combinación de los mismos; y

(d) 1-10% de un agente estabilizante seleccionado del grupo que consiste en sacarosa, sorbitol, glicerol, trehalosa, y manitol.

2. 150 mM de un agente de tonicidad, preferiblemente cloruro de sodio; o 1-10% de agente estabilizante .

2. 150 mM de agente de tonicidad, en donde la formulación puede ser reconstituida de manera que sea adecuada para la administración intravítrea.

7. Una formulación liofilizable de acuerdo con la reivindicación 6, que comprende aproximadamente 20 mg/ml de antagonista de VEGF, tampón fosfato de sodio aproximadamente 10 mM, polisorbato aproximadamente al 0, 03%, PEG aproximadamente al 0, 1%, y sacarosa aproximadamente al 2, 5%, pH aproximadamente 6, 2-6, 3.

8. Una formulación liofilizable de acuerdo con la reivindicación 6, que comprende aproximadamente 20 mg/ml de antagonista de VEGF, tampón fosfato de sodio aproximadamente 5 mM, polisorbato aproximadamente al 0, 015%, sacarosa aproximadamente al 2, 5%, y que comprende adicionalmente cloruro de sodio aproximadamente 20 mM, pH aproximadamente 6, 2-6, 3.

9. Una formulación liofilizable de acuerdo con la reivindicación 7, que comprende aproximadamente 20 mg/ml de antagonista de VEGF, tampón fosfato de sodio aproximadamente 5 mM, polisorbato aproximadamente al 0, 015%, y que comprende adicionalmente cloruro de sodio aproximadamente 67, 5 mM, pH aproximadamente 6, 2-6, 3.

10. Un método para producir una formulación liofilizada de un antagonista de VEGF, que comprende someter la formulación pre-liofilizada de acuerdo con la reivindicación 6 a 9 a liofilización para generar una formulación liofilizada.

11. Una jeringa pre-cargada adecuada para la administración intravítrea que comprende la formulación de una

cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5.