Composiciones de vacuna en emulsión que comprenden antígeno y un adyuvante en la fase acuosa.

Una composición de vacuna que comprende una emulsión de agua-en-aceite,

en la que dicha emulsión comprende un componente oleoso y un componente acuoso; y

en la que dicho componente acuoso comprende al menos un antígeno y al menos un adyuvante seleccionadodel grupo que consiste en un polímero acrílico y bromuro de dimetil dioctadecil amonio (DDA).

Composiciones de vacuna en emulsión que comprenden antígeno y un adyuvante en la fase acuosa Antecedentes de la invención Campo de la invención La presente invención se refiere a formulaciones de vacuna de agua en aceite, a procedimientos de preparación de las formulaciones y al uso de dichas formulaciones para la vacunación de animales.

Técnica anterior

La piedra angular de muchos programas de control de enfermedades infecciosas es la inducción de inmunidad específica mediante la vacunación, ya sea con microorganismos vivos o inactivados o sus productos. Un procedimiento de vacunación eficaz permite el desarrollo de un estado de memoria inmunitaria en un animal para un antígeno, que conduce a una respuesta inmunitaria rápida y enérgica en el animal al entrar en contacto posterior con el antígeno. Algunos antígenos, sin embargo, son sólo débilmente inmunogénicos. Tales antígenos pueden ser incapaces de inducir una respuesta inmunitaria suficiente para proporcionar una protección eficaz para el animal a una exposición posterior, o pueden requerir la administración de agentes adicionales que aumenten la inmunogenicidad para proporcionar una protección efectiva.

La inmunogenicidad de un antígeno se puede aumentar mediante su administración en una mezcla con sustancias, llamadas adyuvantes, que aumentan la respuesta contra el antígeno, ya sea por acción directa sobre el sistema inmunitario o mediante la modificación de las características farmacocinéticas del antígeno, aumentando con ello el tiempo de interacción entre el último con el sistema inmunitario.

Las emulsiones a base de agua y aceite (por ejemplo, emulsiones de agua-en-aceite, aceite-en-agua, agua-enaceite-en-agua) se pueden usar como adyuvantes en vacunas. Las emulsiones de agua-en-aceite se usan comúnmente como adyuvantes en vacunas para animales, por ejemplo, en las vacunas de aves de corral. En general, para hacer una emulsión de agua-en-aceite, se añade lentamente un antígeno en la fase acuosa a un vehículo de aceite mineral en la presencia de uno o más agentes emulsionantes, dando como resultado micelas que constan de gotitas de aceite dentro de las cuales reside el antígeno. Se cree que el componente oleoso induce la migración de las células inmunitarias al sitio de inyección, y también sirve para proteger el antígeno y ampliar el período de tiempo durante el que las células inmunitarias procesen el antígeno. El resultado final es una mayor respuesta inmunitaria en comparación con la simple inyección de antígeno por sí mismo.

A veces se usan adyuvantes que consisten en polímeros acrílicos como alternativa a las emulsiones a base de aceite en formulaciones de vacunas. Un ejemplo de polímero acrílico es un polímero hidrosoluble de ácido acrílico reticulado con polialilsacarosa que también se conoce como Carbopol. La patente US-5.026.546, por ejemplo, se refiere al uso de bromuro de dimetil dioctadecil amonio (DDA) como un adyuvante de la vacuna y la adición de Carbopol para mejorar la solubilidad en agua del DDA.

Ambas emulsiones a base de aceite y polímeros acrílicos tienen claras ventajas cuando se usan como adyuvantes en las formulaciones de la vacuna. La combinación de emulsiones de agua-en-aceite y polímeros acrílicos, sin embargo, se habría desaconsejado ya que se espera que los polímeros acrílicos tales como Carbopol serían altamente reactivos en asociación con una emulsión de aceite. Por ejemplo, el documento US-5.026.546, descrito anteriormente, menciona el uso de Carbopol, pero no proporciona ninguna sugerencia de uso de DDA y/o Carbopol en emulsiones agua-en-aceite o aceite-en-agua. Además, con respecto a adyuvantes para ciertas especies tales como aves de corral, se han evitado los polímeros acrílicos debido a su alta reactividad percibida en general. El documento WO 2004/058142 divulga una vacuna que comprende un sistema adyuvante que comprende un polímero de ácido acrílico y una emulsión de aceite-en-agua. Por lo tanto, existe una necesidad en la técnica de adyuvantes novedosos que proporcionen las ventajas combinadas de polímeros acrílicos y emulsiones agua-en-aceite sin los inconvenientes de la reactividad adversa causada por los polímeros acrílicos en el animal vacunado.

Breve resumen de la invención La presente invención se basa, en parte, en el sorprendente descubrimiento de que la formulación de composiciones de vacuna en emulsión a base de aceite con un polímero acrílico tal como Carbopol en la fase acuosa aumenta significativamente la respuesta inmunitaria generada por la composición de vacuna en comparación con las composiciones de vacuna en emulsión a base de aceite que no incluyen un polímero acrílico. Por otra parte, mediante la formulación de un polímero acrílico en la fase acuosa de una emulsión de agua-en-aceite, se evitó la reactividad adversa esperada del polímero acrílico en el animal.

Por lo tanto, la presente invención proporciona composiciones de vacuna que comprenden emulsiones de agua-enaceite. Las emulsiones de agua-en-aceite de la invención comprenden un componente oleoso y un componente acuoso. El componente acuoso comprende al menos un antígeno y al menos un adyuvante seleccionado del grupo que consiste en un polímero acrílico y bromuro de dimetil dioctadecil amonio (DDA) . La presente invención también

incluye procedimientos para vacunar a un animal, comprendiendo dichos procedimientos la administración a un animal de una composición de vacuna de la invención.

Otros aspectos de la invención incluyen procedimientos para la preparación de composiciones de vacuna que comprenden emulsiones de agua-en-aceite. Los procedimientos de la invención comprenden emulsionar un componente oleoso con un componente acuoso, en los que el componente acuoso comprende al menos un antígeno y al menos un adyuvante seleccionado del grupo que consiste en un polímero acrílico y bromuro de dimetil dioctadecil amonio (DDA) .

Las características anteriores y muchas otras ventajas acompañantes de la invención se entenderán mejor por referencia a la siguiente descripción detallada cuando se toma conjuntamente con los dibujos que se acompañan.

Breve descripción de los dibujos La Figura 1 es un diagrama de flujo que muestra un procedimiento ilustrativo para la preparación de una composición de vacuna en emulsión de la presente invención.

La Figura 2 muestra los títulos de IH (inhibición de la hemaglutinación) de la sangre de pavos inoculados con una formulación de vacuna en emulsión de agua-en-aceite que contiene antígeno de la gripe aviar H5N3 inactivado.

La Figura 3 muestra los títulos de IH de la sangre de pavos de control y pavos inoculados con vacunas en emulsión de agua-en-aceite que contienen antígeno de la gripe aviar H5N3 inactivado y sin adyuvante, Carbopol® Carbopol® + DDA, CMC, HPMC o Al (OH) 3 (reHydragel®) . Los niveles de título de IH marcados como "presangrado" eran de 3 pavos no vacunados.

Descripción detallada de la invención La presente invención proporciona composiciones de vacuna que comprenden una emulsión. La emulsión comprende un componente oleoso y un componente acuoso. El componente acuoso comprende al menos un antígeno y al menos un adyuvante. El adyuvante puede comprender un polímero acrílico y/o DDA.

Emulsiones Los diferentes tipos de emulsiones usados en preparaciones de vacunas incluyen emulsiones de agua-en-aceite, aceite-en-agua y agua-en-aceite-en-agua. Un tipo preferido de emulsión para su uso en el contexto de la presente invención es una emulsión de agua-en-aceite. Una emulsión de agua-en-aceite puede incluir además uno o más tensioactivos solubles en aceite, uno o más tensioactivos solubles en agua, adyuvantes adicionales, componentes de la fase acuosa adicionales, estabilizadores en emulsión, o combinaciones de los mismos. Los procedimientos para preparar emulsiones de agua-en-aceite son conocidos en la técnica y se describen en otra parte de la presente memoria.

Composiciones de vacuna Como se usa en la presente memoria, una "composición de vacuna" es una composición que se puede usar para provocar inmunidad protectora en un receptor. Por lo tanto, después de que un sujeto haya sido vacunado con un antígeno, una vacuna previene, retrasa o reduce la intensidad del desarrollo de una enfermedad en el sujeto expuesto a la misma o a un antígeno relacionado con respecto a un sujeto no vacunado. La inmunidad protectora proporcionada por una vacuna puede ser inmunidad humoral (mediada por anticuerpos) o inmunidad celular o ambos. La vacunación puede, por ejemplo, eliminar o reducir la carga de un patógeno o de células infectadas, o producir cualquier otro alivio medible de una infección. La vacunación también... [Seguir leyendo]

1. Una composición de vacuna que comprende una emulsión de agua-en-aceite,

en la que dicha emulsión comprende un componente oleoso y un componente acuoso; y en la que dicho componente acuoso comprende al menos un antígeno y al menos un adyuvante seleccionado del grupo que consiste en un polímero acrílico y bromuro de dimetil dioctadecil amonio (DDA) .

2. La composición de vacuna de la reivindicación 1, en la que dicho al menos un adyuvante es un polímero acrílico.

3. La composición de vacuna de la reivindicación 2, en la que dicho polímero acrílico es un polímero de ácido acrílico reticulado con polialilsacarosa.

4. La composición de vacuna de la reivindicación 2, en la que dicho polímero acrílico es un adyuvante alquil-ácido poliacrílico ("alquil-APA") .

5. La composición de vacuna de la reivindicación 4, en la que dicho adyuvante alquil-APA se selecciona del grupo que consiste en decil-APA, octil-APA, butil-APA y metil-APA.

6. La composición de vacuna de la reivindicación 1, en la que dicho al menos un adyuvante es bromuro de dimetil dioctadecil amonio (DDA) .

7. La composición de vacuna de la reivindicación 1, en la que dicho componente acuoso comprende tanto un polímero acrílico como bromuro de dimetil dioctadecil amonio (DDA) .

8. La composición de vacuna de la reivindicación 7, en la que dicho polímero acrílico es un polímero de ácido acrílico reticulado con polialilsacarosa

9. La composición de vacuna de la reivindicación 1, en la que dicho al menos un antígeno es un agente infeccioso.

10. La composición de vacuna de la reivindicación 9, en la que dicho agente infeccioso es un agente infeccioso vivo.

11. La composición de vacuna de la reivindicación 9, en la que dicho agente infeccioso es un agente infeccioso muerto o inactivado.

12. La composición de vacuna de la reivindicación 9, en la que dicho agente infeccioso es un virus, una bacteria, un hongo o un parásito.

13. La composición de vacuna de la reivindicación 1, en la que dicho al menos un antígeno es un péptido, un polipéptido o un ácido nucleico.

14. La composición de vacuna de la reivindicación 9, en la que dicho agente infeccioso es un agente que es capaz de infectar un animal aviar, canino, felino, bovino, porcino o equino.

15. La composición de vacuna de la reivindicación 12, en la que dicho agente infeccioso es un virus de la gripe.

16. La composición de vacuna de la reivindicación 1, en la que dicho componente oleoso comprende aceite mineral.

17. La composición de vacuna de la reivindicación 1, en la que dicha composición comprende además uno o más emulsionantes.

18. La composición de vacuna de la reivindicación 1, en la que dicho componente acuoso comprende además lecitina.

19. La composición de vacuna de la reivindicación 1 para su uso en la vacunación de un animal.

20. La composición de vacuna para su uso según la reivindicación 19, en la que el animal es en un animal aviar, canino, felino, bovino, porcino o equino.

21. Un procedimiento para la ppreparación de una composición de vacuna de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18, comprendiendo dicho procedimiento emulsionar el componente oleoso con el componente acuoso.

22. Un procedimiento para la preparación de una composición de vacuna de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 al 18 comprendiendo dicho procedimiento:

(a) combinar una solución acuosa de un antígeno con al menos un adyuvante para formar una mezcla de antígeno/adyuvante;

(b) combinar dicha mezcla de antígeno/adyuvante de (a) con un componente oleoso y un emulsionante para formar una mezcla de antígeno/adyuvante/componente oleoso y

(c) emulsionar dicha mezcla de antígeno/adyuvante/componente oleoso de (b) para formar una emulsión de agua-en-aceite, formando de este modo una composición de vacuna.