Anticuerpos monoclonales humanos para quinasa-1 de tipo receptor de activina.

Un anticuerpo monoclonal neutralizante anti-ALK-1, o una porción de unión al antígeno del mismo,

en donde dicho anticuerpo o dicha porción de unión al antígeno del mismo comprenden las secuencias de aminoácidos CDR1, CDR2 y CDR3 de los dominios variables de la cadena pesada y de la cadena ligera, respectivamente, de las SEC ID Nº: 6 y 8;

las SEC ID Nº: 14 y 16;

las SEC ID Nº: 18 y 20;

las SEC ID Nº: 26 y 28;

las SEC ID Nº: 30 y 32;

las SEC ID Nº: 38 y 40;

las SEC ID Nº: 46 y 48;

las SEC ID Nº: 50 y 52;

las SEC ID Nº: 54 y 56;

las SEC ID Nº: 58 y 60;

las SEC ID Nº: 62 y 64;

las SEC ID Nº: 66 y 68;

las SEC ID Nº: 70 y 72; o

las SEC ID Nº: 104 y 127.

Anticuerpos monoclonales humanos para quinasa-1 de tipo receptor de activina.

Campo de la invención La presente invención se refiere a anticuerpos monoclonales humanos y partes de unión a antígeno de los mismos que se unen al dominio extracelular (ECD) de quinasa-1 de tipo receptor de activina (ALK-1) . La invención también se refiere a moléculas de ácido nucleico que codifican dichos anticuerpos y partes de unión a antígeno, procedimientos para realizar anticuerpos anti-ALK-1 y partes de unión a antígeno, composiciones que comprenden estos anticuerpos y partes de unión a antígeno y procedimientos para usar los anticuerpos, partes de unión a antígeno y composiciones.

Antecedentes de la invención ALK-1 es un receptor de superficie celular de tipo I para receptor de factor de crecimiento transformante beta de tipo 1 (TGF-beta-1) . ALK-1 humana es un polipéptido de 503 aminoácidos, que incluye una secuencia señal (aminoácidos: 1-21) , un dominio de unión a ligando de TGF-beta-1 extracelular N-terminal o ECD (aminoácidos: 22118) , un único dominio transmembrana (aminoácidos: 119-141) , un dominio regulador rico en glicina/serina (GS) (aminoácidos: 142-202) y un dominio de serina-treonina quinasa C-terminal (202-492) . La secuencia de aminoácidos de ALK-1 humana desvelada en Attisano y col. Cell, 1993, vol. 75, páginas 671-680 incluye Ser en la posición 172 (registro de GenBank L17075) , mientras que la patente de Estados Unidos 6.316.217 reivindica la secuencia de aminoácidos de ALK-1 humana con Thr en la posición 172 (registro de Genbank NM_000020) . El gen de ACVRL1 que codifica una ALK-1 humana de longitud completa desvelada en Attisano y col, está disponible en el mercado de Invitrogen Inc., Clon ID IOH21048. Aunque ALK-1 comparte el 60-80 % de homología global con otros receptores de tipo I (ALK-2 a ALK-7) , ECD de ALK-1 es notablemente divergente de los ECD de otros miembros de la familia de ALK. Por ejemplo, en seres humanos, solamente ECD de ALK-2 está relacionado significativamente con ECD de ALK-1 (compartiendo aproximadamente el 25 % de identidad de aminoácidos) . Patente de Estados Unidos 8.318.217; ten Dijke y col. Oncogene, 1993, vol. 8, páginas 2879-2887; Attisano y col. Cell, 1993, vol. 75, páginas 671-680.

En general, los ligandos de superfamilia de TGF-beta ejercen sus actividades biológicas mediante unión a complejos receptores heteroméricos de dos tipos (I y II) de serina/treonina quinasas. Los receptores de tipo II son quinasas constitutivamente activas que fosforilan receptor de tipo I tras unión a ligando. A su vez, las quinasas de tipo I activadas fosforilan corriente abajo las moléculas de señalización incluyendo los diversos Smad, que se translocan al núcleo y conducen a una respuesta transcripcional. Heldin y col. Nature, 1997, vol. 390, páginas 485-471. En el caso de ALK-1, los inventores han mostrado que Smad1 se fosforila específicamente y se transloca al núcleo en el que regula directamente la expresión de los genes sensibles a Smad1 Id1 y EphB2.

ALK-1 se expresa en gran medida y selectivamente en células endoteliales y otros tejidos altamente vascularizados tales como placenta o cerebro. Los inventores han mostrado por realización de perfiles de Affymetrix y RT-PCR en tiempo real que la expresión de ALK-1 en células endoteliales excede en gran medida la expresión de sus coreceptores activina de tipo II y endoglina, su ligando TGF-beta-1 o ALK-5. Las mutaciones en ALK-1 están asociadas con telangiectasia hemorrágica hereditaria (HHT) , lo que sugiere un papel crítico para ALK-1 en el control del desarrollo o reparación de vasos sanguíneos. Abdalla y col. J. Med. Genet, 2003, vol. 40, páginas 494-502; Sadick y col. Hematological/The Hematology J., 2005, vol. 90, 818-828. Además, dos estudios independientes de ratones knockout para ALK-1 proporcionan las pruebas in vivo clave para la función de ALK-1 durante la angiogénesis. Oh y col. Proc Nati Acad Sci USA, 2000, vol. 97, páginas 2626-2631; Urness y col. Nature Genetics, 2000, vol.26, páginas 328-331.

La angiogénesis es el proceso fisiológico que implica la formación de nuevos vasos sanguíneos a partir de vasos preexistentes y/o células madre endoteliales en circulación. Este es un proceso normal en el crecimiento y desarrollo, así como en la curación de heridas. Sin embargo, esto también es una etapa fundamental en la transición de tumores de un estado durmiente a un estado maligno. Hanahan y Folkman, “Patterns and Emerging Mechanisms of the Angiogenic Switch During Tumorigenesis, ” Cell, 86 (3) :353-364, 1996; Carmeliet, “Angiogenesis in Health and Disease” Nature Medicine, 9 (6) :653-660, 2003; Bergers y Benjamin, “Tumoreigenesis and the Angiogenic Switch, ” Nature Reviews, 3:401-410, 2003. En enfermedades como cáncer, el cuerpo pierde la capacidad para mantener angiogénesis equilibrada. Nuevos vasos sanguíneos alimentan tejidos enfermos, destruyen tejidos normales, y en el caso de algunos cánceres, los nuevos vasos pueden permitir que las células tumorales escapen a la circulación y se alojen en otros órganos (metástasis tumoral) . Los inhibidores de angiogénesis, incluyendo anticuerpos monoclonales (mAb) , son una clase muy prometedora de fármacos dirigidos contra este proceso anómalo para bloquear o ralentizar el crecimiento tumoral.

Además de un papel en el crecimiento de tumor sólido y metástasis, otras afecciones notables con un componente angiogénico son, por ejemplo, artritis, psoriasis, degeneración macular relacionada con la edad neovascular y retinopatía diabética. Bonnet y col. “Osteoarthritis, Angiogenesis and Inflammation, ” Rheumatology, 2005, vol. 44, páginas. 7-16; Creamer y col. “Angiogenesis in psoriasis, ” Angiogenesis, 2002, vol. 5, páginas. 231-236; Clavel y col.

“Recent data on the role for angiogenesis in rheumatoid arthritis, ” Joint Bone Spine, 2003, vol. 70, páginas. 321-326; Anandarajah y col. “Pathogenesis of psoriatic arthritis, ” Curr. Opin. Rheumatol., 2004, vol. 16, páginas 338-343; Ng y col. “Targeting angiogenesis, the underlying disorder in neovascular age-related macular degeneration, ” Can. J. Ophthalmol., 2005, vol. 40, páginas 352-368; Witmer y col. “Vascular endothelial growth factors and angiogenesis in eye disease, ” Progress in Retinal & Eye Research, 2003, vol. 22, páginas 1-29; Adamis y col. “Angiogenesis and ophthalmic disease, ” Angiogenesis, 1999, vol. 3, páginas 9-14.

Se espera que las terapias anti-angiogénicas sean crónicas en la naturaleza. En consecuencia, se prefieren dianas con función endotelial altamente selectiva, tales como ALK-1, para reducir el desgaste resultante de efectos secundarios. Además, dada la notable divergencia del ECD de ALK-1 de los ECD de otros miembros de la familia de ALK, se espera que los mAb inducidos contra el ECD de ALK-1 humana se dirijan selectivamente a ALK-1. Basándose en estas consideraciones, un anticuerpo monoclonal contra el dominio extracelular de ALK-1 que puede inhibir la dimerización con el receptor de tipo II y por lo tanto bloquear la fosforilación de Smad1 y la respuesta transcripcional corriente abajo es altamente deseable.

R&D Systems, Inc. fabrica y vende un anticuerpo monoclonal anti-ALK-1 humana monoclonal (Cat. Nº MAB370) producido a partir de un hibridoma resultante de la fusión de mieloma de ratón con linfocitos B obtenidos de un ratón inmunizado con dominio extracelular de ALK humana recombinante derivado de NSO purificado. Los inventores han mostrado que este anticuerpo no neutraliza la interacción entre ALK-1 y TGF-beta-1 ni anula la fosforilación de Smad1. Se ha generado antisueros de conejo contra un péptido sintético correspondiente a una parte de la región yuxtamembrana intracelular de ALK-1 (restos de aminoácidos 145-166) , acoplada a hemocianina de lapa californiana (KLH) (patente de Estados Unidos 6.692.925) y contra el dominio extracelular de ALK-1 completo excepto para la secuencia principal (Lux y col., J. Biol. Chem., 1999, vol. 274, páginas 9984-9992) . Abdalla y col (Human Mol. Gen., 2000, vol. 9, páginas 1227-1237) presentan generación de un anticuerpo policlonal para ALK-1 usando una construcción de virus vaccinia recombinante. R&D Systems, Inc. fabrica y vende un anticuerpo anti-ALK1 humana policlonal (Cat Nº AF370) producido en cabras inmunizadas con dominio extracelular de ALK-1 humana recombinante, derivado de NS0 purificado.

Hasta la fecha, no se han presentado anticuerpos monoclonales completamente humanos para el ECD de ALK-1, y nadie ha demostrado la eficacia de ningún anticuerpo monoclonal para el ECD de ALK-1 al anular la ruta de señalización de ALK-1/TGF-beta-1/Smad1.... [Seguir leyendo]

1. Un anticuerpo monoclonal neutralizante anti-ALK-1, o una porción de unión al antígeno del mismo, en donde dicho anticuerpo o dicha porción de unión al antígeno del mismo comprenden las secuencias de aminoácidos CDR1, CDR2 y CDR3 de los dominios variables de la cadena pesada y de la cadena ligera, respectivamente, de las SEC ID Nº: 6 y 8; las SEC ID Nº: 14 y 16; las SEC ID Nº: 18 y 20; las SEC ID Nº: 26 y 28; las SEC ID Nº: 30 y 32; las SEC ID Nº: 38 y 40; las SEC ID Nº: 46 y 48; las SEC ID Nº: 50 y 52; las SEC ID Nº: 54 y 56; las SEC ID Nº: 58 y 60; las SEC ID Nº: 62 y 64; las SEC ID Nº: 66 y 68; las SEC ID Nº: 70 y 72; o las SEC ID Nº: 104 y 127.

2. El anticuerpo, o la porción de unión al antígeno del mismo, según la reivindicación 1, en donde los dominios VH y VL del anticuerpo o de la porción de unión al antígeno del mismo comprenden las siguientes secuencias, respectivamente:

las SEC ID Nº: 6 y 8; las SEC ID Nº: 14 y 16; las SEC ID Nº: 18 y 20; las SEC ID Nº: 26 y 28; las SEC ID Nº: 30 y 32; las SEC ID Nº: 38 y 40; las SEC ID Nº: 46 y 48; las SEC ID Nº: 50 y 52; las SEC ID Nº: 54 y 56; las SEC ID Nº: 58 y 60; las SEC ID Nº: 62 y 64; las SEC ID Nº: 66 y 68; las SEC ID Nº: 70 y 72; las SEC ID Nº: 104 y 127; o

la secuencia de aminoácidos de VH codificada por la secuencia de nucleótidos del inserto encontrado en el clon depositado con el número de registro de la ATCC PTA-6864, y la secuencia de aminoácidos de VL codificada por la secuencia de nucleótidos del inserto encontrado en el clon depositado con el número de registro de la ATCC PTA6865.

3. Un anticuerpo monoclonal anti-ALK-1 que comprende una secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de la SEC ID Nº: 2 y una secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de la SEC ID Nº: 4.

4. Un anticuerpo monoclonal anti-ALK-1 que comprende una secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de la SEC ID Nº: 100 y una secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de la SEC ID Nº: 102.

5. El anticuerpo o la porción de unión al antígeno de la reivindicación 2, que comprende un dominio variable de la cadena pesada de la SEC ID Nº: 6 y un dominio variable de la cadena ligera de la SEC ID Nº: 8,

6. El anticuerpo monoclonal de la reivindicación 1 ó 2, siendo el anticuerpo monoclonal una molécula de IgG1 o IgG2.

7. El anticuerpo o la porción de unión al antígeno según la reivindicación 1, que comprende un dominio de VH que es idéntico en al menos un 90 % a la secuencia de aminoácidos de una cualquiera de las SEC ID Nº: 6; 14; 18; 26; 30; 38; 46; 50; 54; 58; 62; 66; 70 y 104.

8. El anticuerpo o la porción de unión al antígeno según la reivindicación 1, que comprende un dominio de VL que es idéntico en al menos un 90 % a la secuencia de aminoácidos de una cualquiera de las SEC ID Nº: 8; 16; 20; 28; 32; 40; 48; 52; 56; 60; 64; 68; 72 y 127.

9. El anticuerpo o la porción de unión al antígeno según la reivindicación 1, en donde el anticuerpo comprende las secuencias de aminoácidos CDR1, CDR2 y CDR3 de los dominios variables de la cadena pesada y de la cadena ligera, respectivamente, de las SEC ID Nº: 6 y 8.

10. El anticuerpo o la porción de unión al antígeno según la reivindicación 1, seleccionada del grupo que consiste en:

a) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº: 6, o que difiere de la SEC ID Nº: 6 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 8,

o que difiere de la SEC ID Nº: 8 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida; b) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº: 14, o que difiere de la SEC ID Nº: 14 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 16, o que difiere de la SEC ID Nº: 16 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida; c) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº: 18, o que difiere de la SEC ID Nº: 18 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 20, o que difiere de la SEC ID Nº: 20 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida; d) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº: 26, o que difiere de la SEC ID Nº: 26 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 28, o que difiere de la SEC ID Nº: 28 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida; e) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº: 30, o que difiere de la SEC ID Nº: 30 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 32, o que difiere de la SEC ID Nº: 32 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida; f) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº: 38, o que difiere de la SEC ID Nº: 38 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 40, o que difiere de la SEC ID Nº: 40 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida; g) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº: 46, o que difiere de la SEC ID Nº: 46 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 48, o que difiere de la SEC ID Nº: 48 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida; h) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº: 50, o que difiere de la SEC ID Nº: 50 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 52, o que difiere de la SEC ID Nº: 52 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida; i) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº: 54, o que difiere de la SEC ID Nº: 54 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 56, o que difiere de la SEC ID Nº: 56 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida; j) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº:

58, o que difiere de la SEC ID Nº: 58 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 60, o que difiere de la SEC ID Nº: 60 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida; k) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº: 62, o que difiere de la SEC ID Nº: 62 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 64, o que difiere de la SEC ID Nº: 64 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida; l) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº: 66, o que difiere de la SEC ID Nº: 66 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 68, o que difiere de la SEC ID Nº: 68 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida; m) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº: 70, o que difiere de la SEC ID Nº: 70 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 72, o que difiere de la SEC ID Nº: 72 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida; n) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº: 104, o que difiere de la SEC ID Nº: 104 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 127, o que difiere de la SEC ID Nº: 127 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida; o) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº: 6, o que difiere de la SEC ID Nº: 6 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 127, o que difiere de la SEC ID Nº: 127 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida; y p) un anticuerpo o una porción del mismo que comprende un dominio VH según se establece en la SEC ID Nº: 104, o que difiere de la SEC ID Nº: 104 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida, y un dominio VL según se establece en la SEC ID Nº: 8, o que difiere de la SEC ID Nº: 8 en al menos una sustitución conservativa de aminoácidos, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida.

11. El anticuerpo o la porción de unión al antígeno según la reivindicación 1, en el que dicho anticuerpo o dicha porción de unión al antígeno comprenden una cadena pesada que usa una secuencia de la línea germinal de VH 431, VH 3-11, VH 4-61 o VH 4-59 humanas, o en el que se produce al menos una sustitución conservativa de aminoácidos en las secuencias germinales de VH 4-31, VH 3-11, VH 4-61 o VH 4-59 humanas, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida.

12. El anticuerpo o la porción de unión al antígeno según la reivindicación 1, en el que dicho anticuerpo o dicha porción de unión al antígeno comprende una cadena ligera que usa una secuencia germinal de VK A27, VK A2, VK B3

o VK L2 humanas, o en el que se produce al menos una sustitución conservativa de aminoácidos en la secuencia de la línea germinal de VK A27, VK A2, VK B3 o VK L2 humanas, en el que dicha secuencia con la al menos una sustitución conservativa de aminoácidos es idéntica en al menos un 90 % en su secuencia de aminoácidos a la secuencia no sustituida.

13. El anticuerpo según la reivindicación 1 ó 2 que es una molécula de una IgG, una IgM, una IgE, una IgA o una IgD, o deriva de las mismas.

14. El anticuerpo o la porción de unión al antígeno según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en donde dicho anticuerpo o dicha porción de unión al antígeno están derivatizados o unidos a otra molécula.

15. El anticuerpo o la porción de unión al antígeno según la reivindicación 14, en el que dicha molécula es un péptido o una proteína.

16. Una molécula aislada de ácido nucleico que comprende las secuencias de nucleótidos de

las SEC ID Nº: 5 y 7; las SEC ID Nº: 1 y 3; las SEC ID Nº: 95 y 101; las SEC ID Nº: 128 y 101; las SEC ID Nº: 103 y 126; las SEC ID Nº: 129 y 126; las SEC ID Nº: 13 y 15; las SEC ID Nº: 17 y 19; las SEC ID Nº: 25 y 27; las SEC ID Nº: 29 y 31; las SEC ID Nº: 37 y 39; las SEC ID Nº: 45 y 47; las SEC ID Nº: 49 y 51; las SEC ID Nº: 53 y 55; las SEC ID Nº: 57 y 59; las SEC ID Nº: 61 y 63; las SEC ID Nº: 65 y67; o las SEC ID Nº: 69 y 71.

17. Un vector que comprende la molécula de ácido nucleico de la reivindicación 16, en donde el vector comprende una secuencia de control de la expresión unida operativamente a la molécula de ácido nucleico.

18. Una célula hospedadora que comprende

a) una secuencia de nucleótidos que codifica para la cadena pesada y una secuencia de nucleótidos que codifica para la cadena ligera de un anticuerpo o de una porción de unión al antígeno, según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15; b) una secuencia de nucleótidos que codifica para ambas cadenas pesada y ligera del anticuerpo o de la porción de unión al antígeno según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15; o c) el vector de la reivindicación 17.

19. Un hibridoma depositado con el número de registro de la ATCC PTA-6808,

20. El anticuerpo producido por el hibridoma de la reivindicación 19, o una porción de unión al antígeno del mismo.

21. Una composición farmacéutica que comprende el anticuerpo o la porción de unión al antígeno según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, y un portador fisiológicamente aceptable.

22. Uso del anticuerpo o de la porción de unión al antígeno según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, o de la composición farmacéutica según la reivindicación 21, para la preparación de un medicamento.

23. Uso del anticuerpo o de la porción de unión al antígeno según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, o de la composición farmacéutica según la reivindicación 21, para la preparación de un medicamento para el tratamiento del melanoma o del cáncer de mama, de cabeza y cuello, de cerebro, de cuello uterino, de próstata, de páncreas o de testículos en un mamífero que lo necesita.

24. El anticuerpo o la porción de unión al antígeno según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, o de la composición farmacéutica según la reivindicación 21, para su uso en el tratamiento del melanoma o del cáncer de mama, de cabeza y cuello, de cerebro, de cuello uterino, de próstata, de páncreas o de testículos en un mamífero que lo necesita.

CONCENTRACIÓN DE mAb (Nm)