Anticuerpos frente a interleucina-1 beta.

Un agente de unión dirigido que neutraliza la actividad de la interleucina-1ß (IL-1ß) en el que el agente de unióndirigido comprende:

- una cadena pesada que comprende la SEQ ID NO: 74; y

- una cadena ligera que comprende 5 la SEQ ID NO: 76.

Anticuerpos frente a interleucina-1 beta Campo La invención se refiere a agentes de unión dirigidos, tales como anticuerpos monoclonales y fragmentos de los mismos, con afinidad de unión por interleucina-1β (IL-1β) y a usos de estos anticuerpos. Más específicamente, la invención se refiere a anticuerpos monoclonales totalmente humanos dirigidos a IL-1β y a usos de estos anticuerpos.

Antecedentes El sistema inmunitario normal se encuentra en un equilibrio en el que células y moléculas proinflamatorias y antiinflamatorias están reguladas cuidadosamente para promover la defensa inmunitaria normal del huésped sin destruir los tejidos del huésped. Una vez se altera este equilibrio regulador, la estimulación y la activación inespecíficas pueden dar lugar a un aumento de las cantidades de moléculas inmunológicas e inflamatorias destructoras potentes que se producen y liberan. Por tanto, la producción excesiva de citocinas proinflamatorias o la producción de citocinas en el contexto biológico erróneo, se asocian con la morbilidad y la mortalidad en una amplia variedad de enfermedades.

Las citocinas son polipéptidos pluripotentes que actúan uniéndose a receptores celulares específicos. Su secreción es importante para determinar la duración y la intensidad de una respuesta inmunitaria. Las citocinas tienen efectos pleiotrópicos y median una serie de síntomas asociados con la inflamación.

La IL-1β participa en una amplia variedad de rutas biológicas y es una molécula potente, capaz de inducir sus efectos activando tan solo uno o dos receptores por célula. Como agente de señalización, la IL-1β es eficaz a concentraciones muy bajas, incluso en el intervalo femtomolar. En un primer momento, se observó que la IL-1β inducía fiebre, aumentaba las respuestas linfocitarias y estimulaba la respuesta de fase aguda. La IL-1β tiene un papel conocido en la inducción de una reacción inflamatoria en respuesta a la infección.

Sumario Las realizaciones de la invención se refieren a agentes de unión dirigidos que se unen específicamente a interleucina-1β (IL-1β) y neutralizan la actividad de IL-1β, en los que dichos agentes de unión dirigidos comprenden una cadena pesada que comprende la SEQ ID NO: 74 y una cadena ligera que comprende la SEQ ID NO: 76. En una realización de la invención, el agente de unión dirigido es un anticuerpo totalmente humano, o un fragmento de unión del mismo, que neutraliza la actividad de la interleucina-1β (IL-1β) . En un aspecto, el anticuerpo o fragmento de unión totalmente humano neutraliza la interleucina-1β (IL-1β) y se une a IL-1β con una KD de 400 pM, 100 pM, 10 pM, 1 pM, 500 fM, 300 fM, 200 fM, 50 fm o menos. En algunas realizaciones, el anticuerpo tiene un isotipo IgG2, mientras que en otras realizaciones el anticuerpo es un isotipo IgG4. En algunas realizaciones, el anticuerpo sufre un cambio de isotipo de un isotipo a otro. En algunas realizaciones, el anticuerpo está asociado con un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

En algunas realizaciones, el anticuerpo se une a un epítopo de IL-1β en particular, tal como los aminoácidos 1-34 del dominio N terminal. En otras realizaciones, el agente de unión dirigido se une a IL-1β en parte a través de una arginina en el cuarto aminoácido del polipéptido de IL-1β maduro. En algunas realizaciones, el agente de unión dirigido se une a IL-1β en parte a través de una arginina en el decimoprimer aminoácido del polipéptido de IL-1β maduro.

En algunas realizaciones, el agente de unión dirigido es un anticuerpo que comprende una cadena pesada que comprende la SEQ ID NO: 74 y una cadena ligera que comprende la SEQ ID NO: 76. En algunas realizaciones, el anticuerpo comprende un polipéptido de cadena ligera que tiene la secuencia de la SEQ ID NO: 76 y un polipéptido de cadena pesada que tiene la secuencia de la SEQ ID NO: 74. En algunas realizaciones, el anticuerpo es el anticuerpo 9.5.2.

Otra realización de la invención es un anticuerpo que comprende una cadena pesada que comprende la SEQ ID NO: 74 y una cadena ligera que comprende la SEQ ID NO: 76 que compite por la unión con cualquiera de los anticuerpos descritos anteriormente.

Otra realización más es un polinucleótido aislado que codifica un dominio variable de cadena pesada de un anticuerpo, en el que el dominio variable de cadena pesada comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 74 y un dominio variable de cadena ligera de un anticuerpo, en el que el dominio variable de cadena ligera comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 76. En algunas realizaciones, la invención incluye un vector que comprende un polinucleótido descrito anteriormente. En otras realizaciones, la invención incluye una célula huésped que comprende uno de los vectores descritos anteriormente.

Otro aspecto de la invención es el uso de un agente de unión dirigido que neutraliza la actividad biológica de IL-1β para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno relacionado con IL-1β en el que dicho agente de unión dirigido comprende una cadena pesada que comprende la SEQ ID NO: 74 y una cadena ligera que comprende la SEQ ID NO: 76. En una realización, el agente de unión dirigido es un anticuerpo. En realizaciones particulares el antagonista es especialmente adecuado para su uso en la antagonización de IL-1β en pacientes con un tumor que depende, sólo o en parte, de la actividad de IL-1β. En realizaciones particulares el antagonista es especialmente adecuado para su uso en la antagonización de IL-1β en pacientes con un trastorno relacionado con IL-1β seleccionado del grupo que consiste en: trastornos inflamatorios, caquexia y síndrome de fatiga crónica, osteoporosis, ateroesclerosis, trastornos relacionados con el dolor, insuficiencia cardiaca congestiva, leucemias, mielomas múltiples, crecimiento tumoral y diseminación metastásica.

En otro aspecto, la invención proporciona un agente de unión dirigido que neutraliza la actividad biológica de IL-1β para su uso en el tratamiento de un trastorno relacionado con IL-1β, en el que dicho agente de unión dirigido comprende una cadena pesada que comprende la SEQ ID NO: 74 y una cadena ligera que comprende la SEQ ID NO: 76. En una realización, el agente de unión dirigido es un anticuerpo. En realizaciones particulares el antagonista es especialmente adecuado para su uso en la antagonización de IL-1β en pacientes con un tumor que depende, sólo o en parte, de la actividad de IL-1β. En realizaciones particulares el antagonista es especialmente adecuado para su uso en la antagonización de IL-1β en pacientes con un trastorno relacionado con IL-1β seleccionado del grupo que consiste en: trastornos inflamatorios, caquexia y síndrome de fatiga crónica, osteoporosis, ateroesclerosis, trastornos relacionados con el dolor, insuficiencia cardiaca congestiva, leucemias, mielomas múltiples, crecimiento tumoral y diseminación metastásica.

Otro aspecto de la invención es el uso de un agente de unión dirigido que neutraliza la actividad biológica de IL-1β, en el que el agente de unión dirigido comprende un anticuerpo monoclonal neutralizador totalmente humano que se une a los aminoácidos 1-34 del dominio N-terminal de IL-1β.

La presente solicitud divulga además un procedimiento para tratar de forma eficaz a un animal que padece un trastorno relacionado con IL-1β, comprendiendo el procedimiento: seleccionar un animal que necesita tratamiento para un trastorno relacionado con IL-1β; y administrar al animal una dosis terapéuticamente eficaz de un agente de unión dirigido que neutraliza la actividad biológica de IL-1β. El trastorno tratable relacionado con IL-1β se selecciona del grupo que consiste en trastornos inflamatorios, caquexia y síndrome de fatiga crónica, osteoporosis, ateroesclerosis, trastornos relacionados con el dolor, insuficiencia cardiaca congestiva, leucemias, mielomas múltiples, crecimiento tumoral y diseminación metastásica. En el procedimiento descrito anteriormente, el agente de unión dirigido puede comprender un anticuerpo monoclonal neutralizador totalmente humano que se une a los aminoácidos 1-34 del dominio N-terminal de IL-1β.

La presente solicitud divulga además un procedimiento para tratar de forma eficaz a un animal que padece un trastorno relacionado con IL-1β. El procedimiento incluye seleccionar un animal que necesita tratamiento para un trastorno relacionado con IL-1β y administrar al animal una dosis terapéuticamente eficaz de un anticuerpo monoclonal neutralizador totalmente humano que se une a interleucina-1β... [Seguir leyendo]

1. Un agente de unión dirigido que neutraliza la actividad de la interleucina-1β (IL-1β) en el que el agente de unión dirigido comprende:

-una cadena pesada que comprende la SEQ ID NO: 74; y

-una cadena ligera que comprende la SEQ ID NO: 76.

2. El agente de unión dirigido de la reivindicación 1, en el que el agente de unión dirigido es un anticuerpo que comprende un polipéptido de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 76.

3. El agente de unión dirigido de la reivindicación 1, en el que el agente de unión dirigido es un anticuerpo que comprende un polipéptido de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 74.

4. El agente de unión dirigido de la reivindicación 1, en el que dicho agente de unión dirigido se une a y neutraliza la IL-1β con una KD de 300 fM o menos.

5. El agente de unión dirigido de la reivindicación 1, en el que dicho agente de unión dirigido comprende un anticuerpo que tiene un isotipo IgG2.

6. El agente de unión dirigido de la reivindicación 1, en el que dicho agente de unión dirigido comprende un anticuerpo monoclonal neutralizador totalmente humano.

7. Un polinucleótido aislado que codifica:

-un dominio variable de cadena pesada de un anticuerpo, en el que dicho dominio variable de cadena pesada comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 74; y

-un dominio variable de cadena ligera de un anticuerpo, en el que dicho dominio variable de cadena ligera comprende la secuencia de aminoácidos de la SEQ ID NO: 76.

8. Un vector que comprende el polinucleótido aislado de la reivindicación 7.

9. Una célula huésped que comprende el vector de la reivindicación 8.

10. Uso del agente de unión dirigido de las reivindicaciones 1 a 6 en la preparación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno relacionado con IL-1β, que se selecciona del grupo que consiste en trastornos inflamatorios tales como artritis, preferentemente artritis reumatoide o artritis reumatoide juvenil, espondilitis anquilosante, enfermedad de Still, enfermedad de Behcet; enfermedades alérgicas, tales como asma, fiebre del heno y urticaria; enfermedades provocadas por inmunocomplejos, tales como lupus sistémico eritematoso, glomerulonefritis, pénfigo; vasculitis, tal como granulomatosis de Wegener y síndrome de Kawasaki; trastornos del tejido conectivo; enfermedades inflamatorias intestinales, tales como enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa; diabetes insulinodependiente; esclerosis múltiple; psoriasis; uveítis; retinitis; rechazo de injertos; enfermedad de injerto contra huésped; trastornos inflamatorios sistémicos, tales como sepsis o fiebre mediterránea familiar y el síndrome de Muckle-Wells; inflamación tisular en afecciones infecciosas, isquémicas, hemorrágicas y traumáticas, tales como fascitis, apoplejía, infarto de miocardio y otros órganos; SDRA; hepatitis, incluida hepatitis infecciosa y no infecciosa, aguda y crónica; pancreatitis aguda y crónica; lesiones por reperfusión; lesiones por radiación; reestenosis vascular de diferentes tipos, tal como reestenosis coronaria; lesiones ortopédicas y dentales tales como distensión muscular, esguince de ligamentos y enfermedad periodontal; caquexia, síndrome de fatiga crónica, anorexia; alteraciones mentales y del sueño, tales como dificultad para el aprendizaje; osteoartritis; osteoporosis; ateroesclerosis; fibrosis de órganos, tal como fibrosis pulmonar y hepática) ; enfermedad de Alzheimer; síndromes parkinsonianos; esclerosis lateral amiotrófica; miopatías; hiperalgesia; dolor relacionado con el cáncer; insuficiencia cardiaca congestiva; cáncer; neoplasias hematológicas, tales como leucemias y mielomas múltiples; desarrollo de tumores sólidos; crecimiento tumoral; y diseminación metastásica.

11. Un agente de unión dirigido de las reivindicaciones 1 a 6 para su uso en el tratamiento de un trastorno relacionado con IL-1β, que se selecciona del grupo que consiste en trastornos inflamatorios tales como artritis, preferentemente artritis reumatoide o artritis reumatoide juvenil, espondilitis anquilosante, enfermedad de Still, enfermedad de Behcet; enfermedades alérgicas, tales como asma, fiebre del heno y urticaria; enfermedades provocadas por inmunocomplejos, tales como lupus sistémico eritematoso, glomerulonefritis, pénfigo; vasculitis, tal como granulomatosis de Wegener y síndrome de Kawasaki; trastornos del tejido conectivo; enfermedades inflamatorias intestinales, tales como enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa; diabetes insulinodependiente; esclerosis múltiple; psoriasis; uveítis; retinitis; rechazo de injertos; enfermedad de injerto contra huésped; trastornos inflamatorios sistémicos, tales como sepsis o fiebre mediterránea familiar y el síndrome de Muckle-Wells; inflamación tisular en afecciones infecciosas, isquémicas, hemorrágicas y traumáticas, tales como fascitis, apoplejía, infarto de miocardio y otros órganos; SDRA; hepatitis, incluida hepatitis infecciosa y no infecciosa, aguda y crónica; pancreatitis aguda y crónica; lesiones por reperfusión; lesiones por radiación; reestenosis vascular de diferentes tipos, tal como

reestenosis coronaria; lesiones ortopédicas y dentales tales como distensión muscular, esguince de ligamentos y enfermedad periodontal; caquexia, síndrome de fatiga crónica, anorexia; alteraciones mentales y del sueño, tales como dificultad para el aprendizaje; osteoartritis; osteoporosis; ateroesclerosis; fibrosis de órganos, tal como fibrosis pulmonar y hepática) ; enfermedad de Alzheimer; síndromes parkinsonianos; esclerosis lateral amiotrófica; miopatías; hiperalgesia; dolor relacionado con el cáncer; insuficiencia cardiaca congestiva; cáncer; neoplasias hematológicas, tales como leucemias y mielomas múltiples; desarrollo de tumores sólidos; crecimiento tumoral; y diseminación metastásica.