Análogos de ghrelina sustituidos en el N terminal.

Un compuesto análogo de la ghrelina de acuerdo con la fórmula (I):

en el que:

A2 es Ser o Aib,;

A3 es Ser o Glu(NH-R8);

A8 es Glu o Aib;

A10 es Gln o Aib;

A17 es Glu o Ser(C(O)-R10);

R1 es -OH, -NH2, alcoxi(C1-C30) o NH-X6-CH2-Z0, en el que X6 es un alquilo(C1-C12) o un alquenilo(C2-C12) y Z0 es-H,-OH, -CO2H o-C(O)-NH2;

0R2 es H, alquilo(C1-C30), heteroalquilo(C1-C30), acilo (C1-C30), alquenilo(C2-C30), alquinilo (C2-C30), aril alquilo(C1-C30),aril acilo(C1-C30), alquilo(C1-C30) sustituido, heteroalquilo(C1-C30) sustituido, acilo(C2-C30) sustituido, alquenilo (C2-C30) sustituido, aril alquilo(C1-C30) sustituido, alquinilo(C2-C30) sustituido o aril acilo(C1-C30) sustituido;

cada uno de los R8 y R10 se selecciona, independientemente de la presencia de cada uno de ellos, del grupo queconsiste en alquilo(C1-C40), alquenilo(C2-C40), alquilo(C1-C40) sustituido, alquenilo(C2-C40) sustituido, alquilarilo,alquilarilo sustituido, arilo y arilo sustituido;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.

Análogos de ghrelina sustituidos en el N terminal

Antecedentes de la invención Campo de la invención La presente invención se refiere a análogos peptídicos de la ghrelina y a sus usos terapéuticos.

Descripción de la técnica anterior

La ghrelina, una hormona orexigénica descubierta recientemente, se produce como una preprohormona que se procesa proteolíticamente para dar lugar a un péptido con la siguiente secuencia: H-Gly-Ser-Ser-Phe-Leu-Ser-Pro-Glu-His-Gln-Arg-Val-Gln-Gln-

Arg-Lys-Glu-Ser-Lys-Lys-Pro-Pro-Ala-Lys-Leu-Gln-Pro-Arg-NH2 (Kojima, M. et al., Nature, (1999) , 402 (6762) :65660) . La ghrelina se produce en las células epiteliales que recubren el fondo del estómago y funciona como estimulador del apetito; sus niveles aumentan antes de una comida y se reducen posteriormente.

Se conocen las estructuras naturales de la ghrelina de diversas especies de mamíferos y no mamíferos (Kaiya, H. et al., J. Biol. Chem., (2001) , 276 (44) :40441-8; y la solicitud de patente internacional PCT/JP00/04907 [WO 01/07475]) . Una región central presente en la ghrelina es responsable de las actividades observadas en el receptor GHS que comprende los cuatro aminoácidos N terminales en los que la serina en la tercera posición está modificada normalmente con ácido n-octanoico. Además de la acilación con ácido n-octanoico, la ghrelina natural también puede estar acilada con ácido n-decanoico (Kaiya, H. et al., J. Biol. Chem., (2001) , 276 (44) :40441-8) .

Los niveles de ghrelina en el plasma de individuos obesos son menores que en los individuos más delgados y los niveles de ghrelina aumentan desde el tiempo que va desde la media noche al amanecer en los individuos más delgados lo que sugiere un fallo en el sistema circulatorio de los individuos obesos (Yildiz, B. O. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, (2004) , 101 (28) :10434-9) . Se ha encontrado que los individuos que sufren de anorexia nerviosa y los pacientes con caquexia inducida por cáncer tienen mayores niveles de ghrelina en plasma (García, J. M. et al., J. Clin. Endocrin. Metab., (2005) , 90 (5) :2920-6) .

Tanto en animales como en humanos, la ghrelina estimula fuertemente la secreción de hormona del crecimiento (GH) desde la glándula pituitaria anterior, principalmente a nivel del hipotálamo, a través de su interacción con el receptor (GHSR) del secretagogo GH (GHS) (Ukkola, O. et al., Ann. Med., (2002) , 34 (2) :102-8; y Kojima, M. et al., Nature, (1999) , 402 (6762) :656-60) . La actividad liberadora de GH de la ghrelina está mediada por la activación de los receptores GHS en la pituitaria y fundamentalmente a nivel del hipotálamo (Kojima, M. et al., Nature, (1999) , 402 (6762) :656-60) .

Antes de descubrirse que la ghrelina es un ligando natural para el receptor GHS, se conocía que la liberación pulsátil del GH desde los somatrotopos está regulada por dos neuropéptidos del hipotálamo: la hormona liberadora de GH (GHRH) y la somatoestatina. La GHRH simula la liberación de GH mientras la somatoestatina inhibe la secreción de GH (Frohman, L. A. et al., Endocr. Rev., (1986) , 7 (3) :223-53; y Strobl, J. S. et al., Pharmacology Review (1994) 46:134) . La ghrelina probablemente aumenta la actividad de las neuronas que segregan GHRH mientras actúa concomitantemente como un antagonista funcional de somatoestatina (Ghigo, E. et al., Eur. J Endocri., (1997) , 136 (5) :445-60) .

La liberación de GH desde los somatrotopos de la pituitaria puede controlarse también mediante la liberación de péptidos secretores de GH (GHRP) . Se ha encontrado que el hexapéptido His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-amida (GHRP-6) libera GH desde los somatrotopos, en función de la dosis, en varias especies, incluyendo el hombre (Bowers, C. Y. et al., Endocrinology, (1984) , 114 (5) :1537-45) . Estudios químicos posteriores sobre el GHRP-6 llevaron a la identificación de otros potentes secretagogos de GH sintéticos tales como GHRP-1, GHRP-2 y hexarelina (Cheng, K. et al., Endocrinology, (1989) , 124 (6) :2791-8; Bowers, C. Y., Novel GH-Releasing Peptides, Molecular and Clinical Advances in Pituitar y Disorders, Ed: Melmed, S., Endocrine Research and Education, Inc., Los Ángeles, CA, EE.UU., (1993) , 153-7; y Deghenghi, R. et al., Life Sci., (1994) , 54 (18) :1321-8) . La estructura de estos tres compuestos es:

GHRP-I Ala-His-D- (2’) -Nal-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2;

GHRP-2 D-Ala-D- (2’) -Nal-Ala-Trp-D-Nal-Lys-NH2; y

Hexarelina His-D-2-MeTrp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2

Un GHS puede estimular la secreción de GH por un mecanismo distinto al del GHRH (Bowers, C. Y. et al., Endocrinology, (1984) , 114 (5) :1537-45; Cheng, K. et al., Endocrinology, (1989) , 124 (6) :2791-8; Bowers, C. Y., Novel GH-Releasing Peptides, Molecular and Clinical Advances in Pituitar y Disorders, Ed: Melmed, S., Endocrine Research and Education, Inc., Los Angeles, CA, EE.UU., (1993) , 153-7; y Deghenghi, R. et al., Life Sci., (1994) , 54 (18) :1321-8) .

La baja biodisponibilidad oral (<1%) de un GHS peptídico estimuló la búsqueda de compuestos no peptídicos que simulasen la acción del GHRP-6 en la pituitaria. Se ha informado de que varias benzolactamas y espiroindanos estimulan la liberación de GH en muchas especies animales, incluidos los humanos (Smith, R. G. et al., Science, (1993) , 260 (5114) :1640-3; Patchett, A. A. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU., (1995) , 92 (15) :7001-5; Chen, M. H. et al., Bioorg. Mod. Chem. Letts., (1996) , 6 (18) :2163-8) . Un ejemplo específico de un pequeño espiroindano es MK0677 (Patchett, A. A. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU., (1995) , 92 (15) :7001-5) :

Parece que las acciones de un GHS (tanto péptido como no péptido) están mediadas por un receptor específico de GHS (GHSR) (Howard, A. D. et al., Science, (1996) , 273 (5277) :974-7; y Pong, S. S. et al., Mol. Endocri., (1996) , 10 (1) :57-61) . El receptor GHS está presente en la pituitaria y en hipotálamo de varias especies animales (GHSR1a) y es diferente al receptor de la hormona liberadora de GH. El receptor GHS también se detectó en otras áreas del sistema nervioso central y en tejidos periféricos, por ejemplo, tejido adrenal, tiroideo, cardiaco, pulmonar, renal y muscular (Chen, M. H. et al., Bioorg. Med. Chem. Letts., (1996) , 6 (18) :2163-9; Howard, A. D. et al. , Science, (1996) , 273 (5277) :974-7; Pong, S. S. et al., Mol. Endocri., (1996) , 10 (1) :57-61; Guan, X. M. et al., Mol. Brain Res., (1997) , 48 (1) :23-9; y McKee, K.K. et al., Genomics, (1997) , 46 (3) :426-34) . También se ha informado sobre una versión truncada de GHSR1a (Howard, A. D. et al., Science, (1996) , 273 (5277) :974-7) .

El receptor GHS es un receptor acoplado a una proteína G. Los efectos de la activación del receptor GHS incluye las despolarización e inhibición de los canales de potasio, un aumento en la concentración intercelular de trifosfato de inositol (IP3) y un incremento transitorio en la concentración de calcio intracelular (Pong, S. S. et al., Mol. Endocri., (1996) , 10 (1) :57-61; Guan, X. M. et al., Mol. Brain Res., (1997) , 48 (1) :23-9; y McKee, K. K. et al., Genomics, (1997) , 46 (3) :426-34) .

Las moléculas GHS como la ghrelina y sus análogos tienen una gran variedad de usos terapéuticos y diagnósticos (patente US 6.566.337; Inui, A., FASEB J., (2004) , 18 (3) :439-56; Muller, E. E. et al., Neurobiol. Aging, (2002) , 23 (5) :907-19; Casanueva, F. F.et al., Trends Endocrinol. Metab., (1999) , 10 (1) :30-8; y Ankerson, M. et al., Drug Discover y Today, (1999) , 4:497-506) . Los compuestos que presentan afectos agonistas en el receptor GHS están indicados para mejorar estados de carencia de GH (patentes US 6.861.409 y US 6.967.237; y Casanueva, F. F. et al., Trends Endocrinol. Metab, (1999) , 10 (1) :30-8) , aumentar la masa muscular (patentes US 6.861.409 y US 6.967.237) y/o la fuerza física (Ankerson, M. et al., Drug Discover y Today, (1999) , 4:497-506) mejorar la densidad ósea (patentes US 6.861.409, 6.967.237 y 6.251.902; y Sibilia, V. et al., Growth Horm. IGF Res., (1999) , 9 (4) :21927) , tratar la osteoporosis (solicitudes de patente internacional PCT/IB96/01353 [WO 97/24369] y PCT/IB98/00873 [WO 98/58947]; y Casanueva, F. F. et al., Trends Endocrinol. Metab., (1999) , 10 (1) :30-8) ) , vencer la disfunción sexual (patente US 6.967.237; y Casanueva, F. F. et al., Trends Endocrinol. Metab., (1999) 10 (1) :30-8) , tratar enfermedades cardiovasculares (solicitudes de patente internacional PCT/IB96/01353 [WO 97/24369] y PCT/IB98/00873 [WO 98/58947]; patente US 6.251.902; De Gennaro Colonna, V. et al., Eur. J. Pharmacol., (1997) , 334 (2-3) :201-7; y Casanueva, F. F. et al., Trends Endocrinol. Metab., (1999) , 10 (1) :30-8) , aliviar el dolor artrítico (Granado, M., Am.... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto análogo de la ghrelina de acuerdo con la fórmula (I) :

en el que:

A2 es Ser o Aib, ; A3 es Ser o Glu (NH-R8) ; A8 es Glu o Aib; A10 es Gln o Aib; A17 es Glu o Ser (C (O) -R10) ;

R1 es -OH, -NH2, alcoxi (C1-C30) o NH-X6-CH2-Z0, en el que X6 es un alquilo (C1-C12) o un alquenilo (C2-C12) y Z0 es-H,

-OH, -CO2H o-C (O) -NH2; R2 es H, alquilo (C1-C30) , heteroalquilo (C1-C30) , acilo (C1-C30) , alquenilo (C2-C30) , alquinilo (C2-C30) , aril alquilo (C1-C30) , aril acilo (C1-C30) , alquilo (C1-C30) sustituido, heteroalquilo (C1-C30) sustituido, acilo (C2-C30) sustituido, alquenilo (C2-C30) sustituido, aril alquilo (C1-C30) sustituido, alquinilo (C2-C30) sustituido o aril acilo (C1-C30) sustituido;

cada uno de los R8 y R10 se selecciona, independientemente de la presencia de cada uno de ellos, del grupo que consiste en alquilo (C1-C40) , alquenilo (C2-C40) , alquilo (C1-C40) sustituido, alquenilo (C2-C40) sustituido, alquilarilo, alquilarilo sustituido, arilo y arilo sustituido;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.

2. Un compuesto según la reivindicación 1, en el que R1 es NH2; R2 es H o acilo; R8 es hexilo; y R10 es octanoilo;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.

3. Un compuesto conforme a la reivindicación 2, en el que A2 es Aib; A3 es Glu (NH-hexil) ; A8 es Aib; A10 es Aib; y

A17 es (n-octanoil) Ser;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

4. Un compuesto conforme a la reivindicación 3, en el que dicho compuesto se selecciona del grupo que consiste en: (Inp1) hGhrelina (1-28) -NH2; (SEQ ID NO:2) (Inp1, Aib2) hGhrelina (1-28) -NH2; (SEQ ID NO:2)

(Inp1, Aib2, Glu (NH-hexil) 3) hGhrelina (1-28) -NH2; (SEQ ID NO:3)

(Inp1, Aib210) hGhrelina (1-28) -NH2; (SEQ ID NO:4) (Inp1, Aib2.8) hGhrelina (1-28) -NH2; (SEQ ID NO:5) (Inp1, Aib2, Ser (n-octanoil) 17) hGhrelina (1-28) -NH2; (SEQ ID NO:6) (Inp1, Ser (n-octanoil) 17) hGhrelina (1-28) -NH2; (SEQ ID NO:6) y

(Inp1, Aib28, Ser (n-octanoil) 17) hGhrelina (1-28) -NH2; (SEQ ID NO:7)

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.

5. Un compuesto según la reivindicación 4 en el que dicho compuesto se selecciona del grupo que consiste en: (Inp1) hGhrelina (1-28) -NH2; (SEQ ID NO:2) ; y (Inp1, Aib2 , Ser (n-octanoil) 17) hGhrelina (1-28) -NH2; (SEQ ID NO:6)

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.

6. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones de 1 a 5, o una de sus sales farmacéuticamente aceptable, y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

7. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según cualquiera de las

reivindicaciones 1 a 5 para estimular el aumento de la secreción de la hormona del crecimiento en un sujeto que necesite dicha estimulación.

8. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según la reivindicación 7, en el que dicha estimulación de la secreción de la hormona del crecimiento está indicada para tratar un estado de déficit en la hormona del crecimiento, para aumentar la masa muscular, para aumentar la densidad ósea, para tratar

la disfunción sexual en varones o hembras, para facilitar la ganancia de peso, para facilitar el mantenimiento del peso, para facilitar el mantenimiento de la forma física, para facilitar la recuperación de la forma física o para facilitar el aumento del apetito.

9. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según la reivindicación 8,

en la que dicha ganancia de peso facilitada, o el aumento de apetito facilitado está indicado en un paciente que tiene 25 una enfermedad o un trastorno o está sujeto a un tratamiento que se acompaña de pérdida de peso.

10. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según la reivindicación 9, en el que dicha pérdida de peso se debe a la caquexia.

11. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para tratar la enfermedad pulmonar obstructiva crónica en un sujeto con necesidad de ello.

12. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para estimular la motilidad gastrointestinal de un sujeto con necesidad de ello.

13. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según la reivindicación 12, en la que dicho paciente con necesidad de estimulación gastrointestinal sufre de reflujo gastroesofágico, íleo, íleo postoperatorio, emesis, gastroparesia, IBS, estreñimiento, o pseudo obstrucción de colon.

14. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según la reivindicación 13, en que dicho paciente sufre íleo asociado a la administración de un opiáceo.

15. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según la reivindicación 14, en que dicho íleo postoperatorio es posterior a una intervención quirúrgica abdominal.

16. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales según la reivindicación 15, en el que dicho íleo es de 40 estómago, intestino delgado o intestino grueso.

17. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según la reivindicación 13, en que dicho paciente sufre de emesis asociada con un agente de quimioterapia para el tratamiento anticáncer, el embarazo, la bulimia o la anorexia.

18. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según la reivindicación 45 13, en que dicha gastroparesia está asociada a la diabetes.

19. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según la reivindicación 12, en que dicha cantidad efectiva terapéuticamente de dicho compuesto o composición análoga a la ghrelina se

administra por vía intravenosa, por vía subcutánea, por vía oral o por implantación de una formulación de liberación controlada.

20. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para su uso en llevar a cabo una intervención quirúrgica en un paciente, en que dicho

compuesto análogo de la ghrelina o su sal farmacéuticamente aceptable se prepara para su administración antes, durante o después de una intervención, o en cualquiera de sus combinaciones.

21. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según la reivindicación 20, en que dicha intervención quirúrgica se selecciona del grupo que incluye la manipulación directa del tracto gastrointestinal, la manipulación indirecta del tracto gastrointestinal, la laparotomía, la cirugía de transplantes, la cirugía del sistema urogenital, la cirugía del sistema linfático, la cirugía del sistema respiratorio, y la cirugía para tratar el cáncer en cualquier órgano o tejido dentro del abdomen.

22. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para prevenir el íleo postoperatorio en un paciente con necesidad de ello, en que dicho compuesto análogo o su sal farmacéuticamente aceptable se prepara para administración antes, durante o después de una intervención quirúrgica, o en cualquiera de sus combinaciones.

23. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para prevenir el reflujo gastroesofágico, la emesis, la gastroparesia, el síndrome del colon irritable, el estreñimiento, o la pseudo obstrucción del colon en un paciente con necesidad del mismo.

24. Un compuesto análogo de la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según cualquiera de las

reivindicaciones 1 a 5, para prevenir el íleo postoperatorio, el reflujo gastroesofágico, la emesis, la gastroparesia, el IBS; el estreñimiento o la pseudo obstrucción del colon en un paciente con necesidad del mismo en que dicho compuesto análogo de la ghrelina o su sal farmacéuticamente aceptable se prepara para ser administrada a dicho paciente en una cantidad terapéuticamente efectiva, en que dicha administración se realiza por vía intravenosa, por vía subcutánea, por vía oral, o por implantación de una formulación de liberación controlada.

25. Un compuesto según la reivindicación 1, en que dicho compuesto se selecciona del grupo que consiste en:

(Ac-Inp1, Aib2, 10, Glu (NH-hexil) 3) hGhrelina (1-28) -NH2; (SEQ ID NO:8) ; y

(Inp1, Aib2, 10, Glu (NH-hexil) 3) hGhrelina (1-28) -NH2; (SEQ ID NO:1)

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.

26. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de un compuesto según la reivindicación 30 25, o una de sus sales farmacéuticamente aceptable, y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

27. Un compuesto análogo de la ghrelina según la reivindicación 25, o una de sus sales farmacéuticamente aceptable para suprimir la secreción de la hormona del crecimiento en un sujeto con necesidad de dicha supresión.

28. Un compuesto análogo a la ghrelina o una de sus sales farmacéuticamente aceptable según la reivindicación 27, en que dicha supresión de la secreción de la hormona del crecimiento está indicada para el tratamiento de una

enfermedad o estado caracterizado por un excesivo aumento de la secreción de la hormona del crecimiento, para facilitar la pérdida de peso corporal en exceso, para facilitar la reducción del apetito, para facilitar el mantenimiento del peso, para tratar la obesidad, para tratar la diabetes, para tratar complicaciones de la diabetes, incluida la retinopatía, o para tratar enfermedades cardiovasculares.