Vacuna frente a Acinetobacter.

La invención se refiere a una composición que comprende células inactivadas del género Acínetobacter y/o proteínas aisladas de las mismas y a su uso para la elaboración de un medicamento,

preferiblemente una vacuna, para la prevención de enfermedades producidas por un organismo del género Acínetobacter. Estas composiciones generan una respuesta inmune, que permite proteger a pacientes frente a enfermedades producidas por organismos de este género, las cuales resultan muy comunes en pacientes ingresados en hospitales.

VACUNA FRENTE A ACINETOBACTER

La presente invención se encuadra dentro del campo de la biotecnología y la inmunología. Específicamente, se refiere a una composición que comprende células inactivadas del género Acinetobacter y/o proteínas aisladas de las mismas y al uso de esta composición como medicamento para la prevención de enfermedades provocadas por organismos de este género.

ESTADO DE LA TÉCNICA ANTERIOR

El organismo Acinetobacter baumannií es un bacilo gram negativo aerobio yes agente causal de multitud de enfermedades nosocomiales. El aumento de las enfermedades nosocomiales en la actualidad se debe a la aparición de cepas de este organismo tanto multirresistentes como panresistentes a antibióticos en hospitales. Debido a la aparición de estas cepas, se hace necesaria la búsqueda de nuevas estrategias para el tratamiento de estas enfermedades.

Las infecciones por A. baumannii cursan con diferentes síntomas, y causan diversos tipos de infección en función de la vía de entrada en el huésped. La vía de entrada más común son las vías respiratorias, lo que provoca neumonías en multitud de casos. Este tipo de infección presenta un elevado riesgo de muerte. Estas neumonías suponen un 6, 9% de las neumonías de pacientes ingresados en la UCI en Estados Unidos (Gaynes et al. 2005, Clín Infect Ois, 41 :848-854) , un 9, 6% en America Latina (Gales et al. 2002, Oiagnostíc microbiology and infectíous disease, 44:301-311) , un 27% en Turquía (Meric et al. 2005, Japanese journal of infectíous diseases, 58:297-302) y un 35% en India (Agarwal et al. 2006, The journal of infectíon, 53:98-105) . La tasa de muerte asociada a neumonias nosocomiales generadas por A. baumannií es elevada y varía entre el 35% y el 70% (Fagon et al. 1996, Clín Infect Ois, 23:538-542; Fagon et al. 1993, The American journal of medicine, 94:281-288; Garnacho-Montero et al. 2005, Intensive care medicine, 31 :649655) . Además de estas neumonías nosocomiales, este organismo genera

también neumonías adquiridas en la comunidad (Gommunily-acquired pneumonia o CAP) las cuales presentan una alta mortalidad.

Este organismo también genera bacteriemias, las cuales suponen un 6, 2% de las bacteriemias de pacientes de UCI en Estados Unidos. La bacteriemia en estos casos produce entre un 20% y un 60% de mortalidad (Wisplinghoff el al. 2000, Glin InfeclOis, 31 :690-697) . En España A. baumannii es el responsable del 27% de las bacteriemias causadas por bacterias gram-negativas (Cisneros el al. 1996, Glin InfeclOis, 22: 1026-1 032) .

Además, A. baumannii en España supone la tercera causa más común de meningitis (Moreno el al. 1990, Enfermedades infecciosas y microbiología clínica, 13:281-286) , y la segunda causa de infecciones por quemaduras (Frame et al. 1992, The journal of burn care & rehabilitation, 13:281-286) .

Todo lo anterior muestra la necesidad de encontrar tratamientos para las infecciones causadas por A. baumannii para evitar todas estas complicaciones.

El tratamiento habitual hasta el momento era el uso de antibióticos que actuasen frente a estas bacterias. El problema con estos tratamientos surgió cuando en las dos últimas décadas aparecieron cepas resistentes a los mismos. De esta forma se observa un elevado número de aislados de la bacteria que presentan resistencias a diversos antibióticos, como por ejemplo, a la ceftazidima (entre un 24% y un 67%) , a amikacina (entre el 3% y el 20%) , o a imipenem (hasta el 20%) (Gaynes et al. 2005, Glin Infect Ois, 41 :848-854) . También se ha observado que un 40% de cepas aisladas son resistentes a ciprofloxacino, un 30% a levofloxacino, un 26% a gentamicina y un 22% a cefepima (Rhomberg et al. 2007, Oiagnostic microbiology and infectious disease, 59:425-435) . Todo esto ha llevado a la existencia de un elevado número de cepas multirresistentes a varios antibióticos con excepción de la colistina. En los últimos años también se ha observado la emergencia de cepas panresistentes, las cuales presentan asimismo resistencias frente a este

antibiótico (Souli et al. 2006, Antímicrobial agents and chemotherapy, 50:31663169) . Debido a esta capacidad de adquirir resistencias por parte de A. baumannii, y de adaptarse a los nuevos antibióticos, se han desarrollado nuevas estrategias para tratar estas enfermedades. Una de ellas es el desarrollo de nuevas moléculas que presentan actividad antimicrobiana. Aunque, debido a la capacidad de A. baumannií de adquirir rápidamente resistencia a antibióticos, dicha estrategia podría tener un carácter temporal, haciendo necesario llevar a cabo un abordaje diferente al cabo de un tiempo.

Existe, por tanto, la necesidad de buscar nuevas formas de impedir o tratar las infecciones causadas por A. baumannii, debido a la gran cantidad de enfermedades que produce y a la alta tasa de morbilidad de las mismas, ya que los tratamientos actuales presentan paulatinamente una pérdida de su eficacia.

DESCRIPCiÓN DE LA INVENCiÓN

La presente invención se refiere a una composición que comprende células inactivadas del género Acinetobacter y/o proteínas aisladas de las mismas y al uso de esta composición como medicamento para la prevención de enfermedades provocadas por organismos de este género.

Los autores de la presente invención demuestran que células inactivadas de Acinetobacter baumannií, al ser inoculadas en diversos individuos, provocan la inmunización de éstos, los cuales se encuentran así protegidos frente a posteriores infecciones causadas por dicha bacteria, lo que demuestra la utilidad del uso de estas células como vacunas profilácticas frente a infecciones provocadas por A. baumannií.

Por todo esto, un aspecto de la invención se refiere a células inactivadas del género Acinetobacter, de ahora en adelante "células de la invención" o "células inactivadas de la invención". Dentro de este género, la especie que presenta una mayor capacidad patogénica es la especie Acinetobacter baumannii. Por ello, en una realización preferida de este aspecto de la invención las células inactivadas del género Acinetobacter son de la especie Acinetobacter

baumannií.

Se entiende por "células del género Acinetobactef' en la presente invención aquellas células de organismos pertenecientes al superreino Bacteria, filo Proteobacteria, clase Gammaproteobacteria, orden Pseudomonadales, familia

Moraxellaceae, y género Acinetobacter.

En la presente invención se entiende por "células de la especie Acinetobacter baumannif' aquellas células de organismos pertenecientes al superreino Bacteria, filo Proteobacteria, c I a s e Gammaproteobacteria, orden

Pseudomonadales, familia Moraxellaceae, género Acinetobacter y especie Acinetobacter baumannnií.

Se entiende por "célula inactivada" en la presente invención aquella célula que no presenta capacidad de replicación pero que conserva la capacidad

inmunogénica. Las células de la presente invención son inactivadas previamente a su inoculación para evitar su replicación en el organismo hospedador, y por lo tanto, para prevenir infecciones generadas a partir de su aplicación. La inactivación de las células de la invención puede llevarse a cabo mediante diversos métodos conocidos en el estado de la técnica como por

ejemplo, aunque sin limitarse, mediante adsorción, calor, luz ultravioleta, radiaciones ionizantes, ultrasonidos, fenol, formol, formaldehído, cristal violeta, gliceraldehído, oxido de etileno, propiolactona, etilenimina, bromoetilenimina o formalina. En una realización preferida las células de la invención se inactivan mediante la adición de formalina. En otra realización preferida las células de la

invención son de la especie Acinetobacter baumannií y se inactivan mediante la adición de formalina.

Otro aspecto de la presente invención se refiere a una composición (de ahora en adelante "composición de la invención") que comprende uno de los elementos seleccionados de la lista que comprende:

a) células inactivadas de la invención, b) proteínas aisladas de células inactivadas de la invención,

o una combinación de (a) y de (b) .

Se entiende por "proteínas aisladas de células inactivadas de la invención" una

o un conjunto de proteínas que se pueden obtener de las células de la invención mediante métodos conocidos... [Seguir leyendo]

1. Composición que comprende uno de los elementos seleccionados de la

lista: 5 a. células inactivadas del género Acinetobacter,

b. proteínas aisladas de células inactivadas del género Acinetobacter,

o una combinación de (a) y (b) .

2. Composición según la reivindicación 1 donde las proteínas aisladas de 10 (b) son proteínas de la membrana celular.

3. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2 donde las proteínas de (b) se obtienen mediante un método que comprende: i) disociar las proteínas de la membrana celular mediante la adición de

un detergente a las células inactivadas del género Acinetobacter, y ii) precipitar las proteínas disociadas en el paso (i) .

4. Composición según la reivindicación 3 donde el detergente del paso (i) es SDS o Tritón.

5. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 3 ó 4 donde la precipitación de las proteínas en el paso (ii) se realiza mediante la adición de cloroformo y metanol.

6. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 que además comprende un adyuvante.

7. Composición según la reivindicación 6 donde el adyuvante se selecciona de la lista que comprende: fosfato de aluminio, hidróxido de aluminio,

agonistas de los receptores tipo toll, citoquinas, escualeno, adyuvante incompleto de Freund o adyuvante completo de Freund.

8. Composición según la reivindicación 7 donde el adyuvante es fosfato de aluminio.

9. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 donde las

células inactivadas del género Acinetobacter son de la especie Acinetobacter baumannii.

10. Uso de una composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 para la elaboración de un medicamento.

11. Uso de una composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 para la elaboración de un medicamento para la prevención de enfermedades producidas por organismos del género Acinetobacter.

12. Uso de una composición según la reivindicación 11 donde el organismo del género Acinetobacter pertenece a la especie Acinetobacter baumannii.

13. Uso de una composición según cualquiera de las reivindicaciones 11 ó 12 donde la enfermedad se selecciona de la lista que comprende:

bacteriemia, meningitis, infección del tracto urinario, infecciones de la piel y tejidos blandos, infección del lecho quirúrgico o neumonía.

14. Uso de una composición según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 13 donde el medicamento es una vacuna.