Procedimiento para purificar el rebaudiósido A a partir de una mezcla de glicósidos,

comprendiendo el procedimiento las etapas que consisten en:

(a) proporcionar una composición de partida de glicósido que comprende:

rebaudiósido A; y

uno o más de entre rebaudiósido B, rebaudiósido C, rebaudiósido D, rebaudiósido E, rebaudiósido F, esteviósido, y dulcósido; (b) formar una solución de glicósido disolviendo la composición de partida de glicósido en un disolvente que comprende: (i) una mezcla de un alcohol inferior y agua, o (ii) una mezcla de un ácido carboxílico inferior y agua; y

(c) añadir un antidisolvente a la solución de glicósido de la etapa (b), en una cantidad que resulte efectiva para provocar que por lo menos una parte del rebaudiósido A cristalice a partir de la solución de glicósido en forma de una composición de rebaudiósido A purificado.

Procedimiento para producir composiciones de rebaudiósido a purificado que utiliza la cristalización disolvente/antidisolvente.

Referencia cruzada a las solicitudes relacionadas

La presente solicitud reivindica los derechos de la solicitud de patente provisional de los EE.UU. con el número de serie 60/881.798, presentada el 22 de enero de 2007, titulada METHOD OF PRODUCING PURIFIED REBAUDIOSIDE A COMPOSITIONS USING SOLVENT/ANTISOL VENT CRYSTALLIZATION, y de la solicitud de patente provisional de EE.UU. con el número de serie 61/008.163, presentada el 19 de diciembre de 2007, titulada METHOD OF PRODUCING PURIFIED REBAUDIOISDE A COMPOSTIONS USING SOLVENT/ANTISOLVENT CRYSTALLIZATION.

Campo

La invención se refiere a la purificación del rebaudiósido A a partir de extractos en bruto de la planta Stevia rebaudiana utilizando la cristalización disolvente/antidisolvente, tal como se define en las reivindicaciones.

Antecedentes

La especie Stevia rebaudiana ("Stevia") ha sido objeto de considerables investigaciones y de esfuerzos de desarrollo dirigidos a la purificación de ciertos glicósidos edulcorantes naturales de Stevia que tienen potencial como edulcorantes no calóricos. Los glicósidos edulcorantes que pueden extraerse de Stevia incluyen los seis rebaudiósidos (es decir, rebaudiósidos A a F) , estaviósidos (el glicósido predominante en los extractos de la Stevia de tipo salvaje) , dulcósidos y esterebinas.

El rebaudiósido A presenta el sabor más dulce de los glicósidos de Stevia mostrando aproximadamente 250 a 450 veces el sabor dulce de la sacarosa. Se está de acuerdo generalmente en que de entre los glicósidos, el rebaudiósido A constituye el más deseable para utilizar en los edulcorantes no calóricos a causa de su favorable perfil de dulzor, aprobaciones reguladoras, aceptación de los clientes, y de su regusto amargo mínimo.

Se ha informado de varios procedimientos para la purificación del rebaudiósido A a partir de los extractos de Stevia que contienen rebaudiósido A en bruto.

La publicación japonesa nº 56121454 informa de un procedimiento para llevar a cabo la separación del esteviósido y del rebaudiósido A con gran pureza, obtenida mediante cristalización. En el procedimiento, una mezcla de esteviósido y rebaudiósido A se extrae de las hojas y del tallo de Stevia rebaudiana Bertoni mediante un proceso convencional. El extracto se disuelve en una solución acuosa de º 70% de etanol, y el rebaudi6sido A se cristaliza selectivamente a partir de la solución.

La patente japonesa 63173531 describe un procedimiento para extraer glicósidos azucarados de la planta Stevia rebaudiana. La primera etapa del procedimiento consiste en extraer una solución líquida de glicósidos azucarados de la planta Stevia rebaudiana. En segundo lugar, la solución líquida de los glucósidos azucarados se hace pasar a través de una resina porosa no polar, eluyéndose con un disolvente orgánico hidrosoluble, preferentemente metanol. En tercer lugar, la solución eluída se concentra y se seca para dar lugar a un material en polvo. Este procedimiento aísla una mezcla de glucósidos azucarados, pero no aísla un glicósido puro único azucarado tal como el rebaudiósido A.

La publicación de la solicitud de patente US nº 2006/0083838 (Jackson et al.) , informa de un procedimiento para aislar y purificar el rebaudiósido A a partir de material de partida comercializado de Stevia rebaudiana. El procedimiento comprende: (1) un estadio de formulación EtOH para formular un disolvente seleccionado EtOH, (2) un primer estadio de reflujo utilizando el material de partida de Stevia y, opcionalmente, unos estadios adicionales de reflujo que utilizan el retentato aislado a partir de una mezcla sometida a reflujo o de una mezcla de lavado expuesta a agitación, (3) opcionalmente, uno o más estadios de lavado expuestos a agitación y (4) , una purga etanólica y un estadio de sequedad. En las formas de realización que utilizan material de partida de Stevia de menor calidad, se añade típicamente un segundo estadio de reflujo antes del estadio de lavado sometido a agitación, para maximizar la pureza del producto final del rebaudiósido A. En el procedimiento del que se informa, el estadio EtOH de formulación, se lleva a cabo para formular un disolvente de reflujo deseado, para utilizarlo en la etapa o etapas de reflujo. Típicamente, el disolvente de reflujo es una mezcla de etanol y agua con aproximadamente 5% a 15% de volumen acuoso. El procedimiento incluye además una o más etapas de sometimiento a un reflujo energético intenso, que se llevan típicamente a cabo a una temperatura de aproximadamente 89°C a 90°C durante aproximadamente 1 hora. El procedimiento del que se informa da lugar a un 100% de rebaudi6sido A hidrosoluble.

La patente US nº 5.962.678 (Payzant et al.) , informa de un procedimiento para extraer glicósidos azucarados seleccionados a partir de la planta Stevia rebaudiana. En el procedimiento del que se informa, los glicósidos azucarados se extraen de la planta Stevia y se procesan para obtener componentes individuales en un procedimiento multietapa. En primer lugar, la planta Stevia es tratada para extraer una solución líquida acuosa que contiene una mezcla de glicósidos azucarados. Utilizando diversas resinas de intercambio iónico, los glicósidos impuros no azucarados se separan de los glicósidos azucarados mezclados, que se secan. Estos glicósidos azucarados mezclados secos, que contienen todavía impurezas, se disuelven entonces en un disolvente orgánicohidrosoluble tal como metanol anhidro, para formar una solución. Ésta se somete a reflujo y se enfría para precipitar un primer componente glicósido azucarado. Este primer componente glicósido azucarado, que es típicamente esteviósido, puede recuperarse mediante filtración y puede purificarse posteriormente mediante el procedimiento que se describe para el segundo componente.

El filtrado de la cristalización del primer glicósido azucarado precipitado puede tratarse posteriormente para obtener un segundo componente glicósido azucarado concentrando el filtrado mediante calentamiento. Después de enfriar la solución, puede recuperarse un segundo componente glicósido azucarado que precipita. Este segundo componente glicósido azucarado es típicamente el rebaudiósido A. Puede purificarse a continuación disolviéndolo en un disolvente orgánico hidrosoluble tal como metanol, que puede contener opcionalmente una pequeña cantidad de agua. La solución se calienta, se somete a reflujo, y finalmente se enfría para precipitar el segundo componente glicósido azucarado con una gran pureza. El precipitado puede recuperarse mediante filtración. Este procedimiento de purificación puede repetirse hasta que se obtiene un sólido final cristalizado de pureza deseada. El procedimiento informa de niveles de pureza del 90% o superiores, o del 95%, o superiores del Rebaudi6sido A.

La patente US nº 4.361.697 (Dobberstein et al.) informa de un procedimiento para recuperar glicósidos diterpénicos de la planta Stevia rebaudiana. El procedimiento incluye las etapas de extracción secuencial del material vegetal, con un primer disolvente de polaridad intermedia para extraer sustancias vegetales que tiendan a interferir en una separación cromatográfica de los glicósidos, y entonces con un segundo disolvente de alta polaridad para extraer glicósidos, y separando cromatográficamente los glicósidos extraídos introduciéndolos en una columna de cromatografía líquida que posee un equipo de una fase estacionaria orgánica que contiene oxígeno unida mediante un átomo de silicio a un soporte inorgánico. Los glicósidos se eluyen con un disolvente de polaridad que es superior a la del primer disolvente, pero inferior a la del segundo disolvente.

La patente US nº 4.892.938 (Giovanetto) informa de un procedimiento para recuperar esteviósidos a partir del material vegetal seco de Stevia rebaudiana Bertoni mediante la extracción y purificación. Se obtuvo un extracto mediante tratamiento en agua a una temperatura desde la temperatura ambiente a aproximadamente 65°C con agitación y subsiguientemente filtración y centrifugación. Este extracto se trató con hidróxido cálcico, obteniéndose entonces un precipitado mediante filtración o centrifugación. Este precipitado se trató con una resina de intercambio iónico fuertemente ácida y a continuación con una resina de intercambio iónico débilmente básica, filtrándose y secándose.

La patente US nº 4.082.858 (DuBois) informa de un procedimiento para la recuperación del rebaudiósido... [Seguir leyendo]

1. Procedimiento para purificar el rebaudiósido A a partir de una mezcla de glicósidos, comprendiendo el procedimiento las etapas que consisten en:

(a) proporcionar una composición de partida de glicósido que comprende:

rebaudiósido A; y uno o más de entre rebaudiósido B, rebaudiósido C, rebaudiósido D, rebaudiósido E, rebaudiósido F, esteviósido, y dulcósido;

(b) formar una solución de glicósido disolviendo la composición de partida de glicósido en un disolvente que comprende: (i) una mezcla de un alcohol inferior y agua, o (ii) una mezcla de un ácido carboxílico inferior y agua; y

(c) añadir un antidisolvente a la solución de glicósido de la etapa (b) , en una cantidad que resulte efectiva para provocar que por lo menos una parte del rebaudiósido A cristalice a partir de la solución de glicósido en forma de una composición de rebaudiósido A purificado.

2. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el procedimiento incluye además la etapa de siembra de la solución de glicósido de la etapa (c) añadiendo cristales que comprenden rebaudiósido A a la solución de glicósido.

3. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el procedimiento se lleva a cabo como un procedimiento de cristalización intermitente o como un procedimiento de cristalización continua.

4. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la composición de partida de glicósido comprende aproximadamente 40% en peso o mas de rebaudi6sido A, preferentemente aproximadamente 40% a aproximadamente 80% en peso de rebaudi6sido A.

5. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la composición de partida de glicósido comprende aproximadamente 60% en peso o menos de rebaudi6sido A, preferentemente aproximadamente 40% a 60% en peso de rebaudiósido A.

6. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el alcohol inferior comprende un alcohol C1 a C3, seleccionado preferentemente de entre metanol, etanol, n-propanol, i-propanol, o su mezcla.

7. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el disolvente comprende aproximadamente 30% a aproximadamente 70% en peso de alcohol C1 a C3, y aproximadamente 30% a aproximadamente 70% en peso de agua.

8. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el antidisolvente comprende un alcohol C1 a C3, o su mezcla.

9. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el ácido carboxílico inferior comprende ácido acético, ácido fórmico, ácido propiónico o su mezcla.

10. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la masa de antidisolvente respecto a la de la solución de glicósido está comprendida entre aproximadamente 0, 50:1 y aproximadamente 9:1, preferentemente aproximadamente 1:1 y aproximadamente 3:1.

11. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la solución de glicósido y el antidisolvente se encuentran a una temperatura comprendida entre aproximadamente 15°C y aproximadamente 25°C.

12. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la etapa de formación de la solución de glicósido, incluye calentar el disolvente a una temperatura comprendida entre aproximadamente 60°C y aproximadamente 70°C.