Procedimientos para determinar los pronósticos y las intervenciones terapéuticas para los carcinomas de ovario.

Procedimiento para determinar la intervención terapéutica para el carcinoma de ovario que comprende que lasetapas que consisten en:

determinar si una muestra biológica de un sujeto que padece carcinoma de ovario presenta una sobreexpresión deuna proteína que resiste al ligando inductor de la apoptosis relacionado con el factor de la necrosis tumoral(TRAIL), en el que la proteína que resiste el TRAIL es Six1; y

seleccionar un agente no TRAIL para la terapia que no presenta resistencia cruzada a la quimioterapia cuando lamuestra biológica presenta una sobreexpresión de Six1, o

seleccionar un agente TRAIL para terapia si Six1 no está sobreexpresada.

Procedimientos para determinar los pronósticos y las intervenciones terapéuticas para los carcinomas de ovario.

Campo de la invención

La invención se refiere de forma general a la determinación del pronóstico y las intervenciones terapéuticas en los carcinomas de ovario y, más específicamente, a la utilización de la expresión de la homeoproteína Six1 para determinar el pronóstico y las intervenciones terapéuticas en los carcinomas de ovario.

Derechos gubernamentales

La presente invención se llevó a cabo con el apoyo del Gobierno de los EE.UU con los números de concesión R01 CA095277 y K12 CA086913 concedidos por los US National Institutes of Health. El Gobierno de los EE.UU. posee algunos derechos sobre esta invención.

Antecedentes de la invención

El carcinoma de ovario es el cáncer maligno ginecológico más mortal y una de las principales causas de muertes por cáncer entre las mujeres. Debido a que el cáncer de ovario se diagnostica frecuentemente cuando la enfermedad ha alcanzado un estadio avanzado, la mayoría de pacientes requieren un tratamiento adicional después de la extracción quirúrgica del tumor y muchas de estas pacientes incluso mueren después debido a la enfermedad. Aunque un porcentaje superior al 70% de las pacientes con cáncer de ovario avanzado responden a la quimioterapia primaria, a la larga desarrollan resistencia, lo que conduce a un total de supervivencia a 5 años inferior al 20%. Por este motivo se están buscando nuevos enfoques para solventar la quimiorresistencia y desarrollar terapias más eficaces.

Actualmente, se están considerando las terapias biológicas como un nuevo enfoque en la lucha contra el cáncer de ovario. Estas terapias presentan el potencial de dirigirse selectivamente a los tumores, minimizar la toxicidad, y superar la resistencia que se observa frecuentemente con las terapias convencionales. Esta terapia implica la activación de la vía del ligando inductor de la apóptosis relacionado con el factor de necrosis tumoral (TRIAL, Tumor Necrosis Factor-Related Apoptosis-Inducing Ligand) , que induce selectivamente la apoptosis en las células tumorales mientras que conserva las células normales. Específicamente, el TRIAL desencadena la apoptosis rápidamente a través de la vía apoptótica extrínseca mediada por los receptores de muerte, DR4 y DR5, en la membrana celular. Durante la activación del receptor de muerte por parte del TRIAL mediado por el ligando, su dominio intracelular de muerte atrae a la molécula adaptadora del dominio de muerte asociado a Fas (FADD) , que además capta las caspasas iniciadoras 8 y 10 al receptor de muerte para formar el complejo de señalización inductor de muerte (DISC) . Este proceso resulta finalmente en la activación de las caspasas efectoras terminales 3, 6 y 7, lo que conduce, por consiguiente a la muerte celular. Es de gran importancia destacar que los experimentos con cultivos celulares y en ratones xenoinjertados han demostrado que el TRIAL puede ejercer una actividad citotóxica selectiva frente a las células del carcinoma de ovario con efectos limitados en las células normales.

El TRIAL ha estado implicado en varios aspectos de la tumorigénesis que incluye la vigilancia inmunológica innata frente a los tumores, la inhibición del inicio del tumor y la metástasis, y en la respuesta a la quimioterapia convencional. Por ejemplo, los ratones deficientes en TRIAL muestran una susceptibilidad superior a tumores en respuesta al carcinógeno químico metilcolantreno, y un aumento de la metástasis experimental y espontánea. Además, las mutaciones en los receptores del TRAIL se han asociado al cáncer de mama metastásico. Por consiguiente, la activación de la vía TRAIL clínicamente podría inducir una muerte celular y evitar la enfermedad metástasica, y estos tumores que crean mecanismos para escapar la apoptosis mediada por TRAIL podrían ser más metastásicos.

Estas observaciones proporcionan las bases para el desarrollo de agonistas de la vía TRAIL (TRAIL y anticuerpos agonistas de receptores de TRAIL) para los ensayos cínicos que se realizan en la actualidad. Sin embargo, estos ensayos son obstaculizados por el escaso conocimiento sobre las bases subyacentes de la susceptibilidad del tumor a una muerte inducida por la vía TRAIL. Por consiguiente, sigue existiendo la necesidad de identificar los determinantes de la sensibilidad a la vía TRAIL en los tumores de ovario, y en otros cánceres, para mejorar nuestra capacidad para utilizar agonistas de la vía TRAIL que están en desarrollo clínico por separado o en combinación con quimioterapia.

Sumario de la invención

La presente invención se dirige a la utilización de la expresión de la homeoproteína Six1 para determinar las intervenciones terapéuticas en cánceres. La presente invención se dirige también especialmente a los procedimientos para la determinación del pronóstico y las intervenciones terapéuticas para los carcinomas de ovario y para la utilización de la expresión de la homeoproteína Six1 para determinar el pronóstico y las intervenciones terapéuticas para los carcinomas de ovario.

La presente invención se basa, por lo menos en parte, en la demostración de que la expresión de la homeoproteína Six1 está relacionada con la tumorigenicidad del carcinoma de ovario y que no sólo provoca un aumento de la proliferación celular del carcinoma de ovario, sino que también protege a las células del carcinoma de ovario de la apoptosis mediada por TRAIL. Además, ya que se ha observado una sobreexpresión de Six1 en muchos cánceres que incluyen, pero no se limita a estos, cáncer de mama, rabdomiosarcoma, carcinoma hepatocelular, y tumores de Wilms, la utilización de reactivos de TRAIL en terapias para estos y otros cánceres puede resultar ineficaz si no tiene como diana la expresión de Six1.

Una forma de realización ejemplificativa de la presente invención incluye un procedimiento para determinar la intervención terapéutica para el cáncer de ovario que incluye las etapas de obtención de una muestra biológica del sujeto que presenta cáncer el cáncer de ovario, de determinación de si la muestra biológica presenta una sobreexpresión de Six1, y la selección de un agente TRAIL para terapia cuando Six1 no está sobreexpresada. La muestra biológica puede ser una muestra de tumor, que incluye una muestra de tumor de ovario.

Otra forma de realización ejemplificativa de la presente invención incluye un procedimiento para determinar la intervención terapéutica para el carcinoma de ovario que incluye las etapas de obtención de una muestra de tumor de ovario de un sujeto, de determinación la cantidad o por lo menos una de las proteínas Six1 y ARNm de Six1 en la muestra del tumor de ovario, la determinación si la cantidad de proteína Six1 o ARNm de Six1 está sobreexpresada en la muestra del tumor de ovario en comparación con el control, y la selección de un agente TRAIL para terapia si Six1 no está sobreexpresada. Alternativamente, en lugar de seleccionar un agente TRAIL para la terapia, el procedimiento para la determinación de la intervención terapéutica para el carcinoma de ovario puede incluir la etapa de selección una terapia que no incluye TRAIL si Six1 está sobreexpresada.

La presente invención incluye también un procedimiento para la determinación del pronóstico de un sujeto que padece carcinoma de ovario que incluye las etapas de obtención de una muestra de un tumor de ovario de un sujeto, la determinación de la cantidad de proteína Six1 o ARN Six1 expresada en la muestra del tumor de ovario, y la elaboración de un pronóstico en base a la cantidad de proteína Six1 o Six1 ARN. El pronóstico se puede realizar comparando la cantidad de proteína Six1 o del ARN Six1 expresado en la muestra del tumor de ovario con la de un control y realizando un pronóstico de aumento de la mortalidad si los niveles de expresión de Six1 en el tumor de ovario son superiores a 300 fg/ng rARN.

Breve descripción de la figuras

La Fig. 1 muestra la secuencia completa de cADN y la secuencia de aminoácidos deducida de Six1 humano.

Las Figuras 2-7 muestran que Six1 está sobreexpresada en las líneas celulares de carcinoma de ovario en comparación con las células epiteliales normales de la superficie del ovario. La Figura 2 muestra el qRT-PCR para Six1 en tres líneas celulares de carcinoma de ovario (OCC) en comparación con cinco líneas celulares normales de la superficie epitelial del ovario (OSE)... [Seguir leyendo]

1. Procedimiento para determinar la intervención terapéutica para el carcinoma de ovario que comprende que las etapas que consisten en:

determinar si una muestra biológica de un sujeto que padece carcinoma de ovario presenta una sobreexpresión de una proteína que resiste al ligando inductor de la apoptosis relacionado con el factor de la necrosis tumoral (TRAIL) , en el que la proteína que resiste el TRAIL es Six1; y

seleccionar un agente no TRAIL para la terapia que no presenta resistencia cruzada a la quimioterapia cuando la muestra biológica presenta una sobreexpresión de Six1, o

seleccionar un agente TRAIL para terapia si Six1 no está sobreexpresada.

2. Procedimiento según la reivindicación 1 en el que la muestra biológica es una muestra de un tumor.

3. Procedimiento según la reivindicación 2 en el que la muestra de un tumor es una muestra de un tumor de ovario.

4. Procedimiento según la reivindicación 3 que es un procedimiento para determinar la intervención terapéutica 20 para el carcinoma de ovario que comprende las etapas que consisten en: determinar una cantidad de proteína Six1 o ARNm de Six1 expresada en una muestra de tumor de ovario; determinar si la cantidad de proteína Six1 o ARNm de Six1 está sobreexpresada en la muestra del tumor de ovario

en comparación con un control; y seleccionar un agente TRAIL para la terapia si Six1 no está sobreexpresada.

5. Procedimiento para determinar el pronóstico de un sujeto con un carcinoma de ovario que comprende las etapas 30 que consisten en:

determinar la cantidad de proteína Six1 o ARN de Six1 expresada en una muestra de un tumor de ovario; y

formar un pronóstico basándose en la cantidad de proteína Six1 o ARN de Six1. 35

6. Procedimiento según la reivindicación 5 en el que la etapa de formación del pronóstico comprende las etapas que consisten en:

comparar la cantidad de proteína Six1 o ARN de Six1 expresada en la muestra del tumor de ovario con un control; 40 y

formar el pronóstico basándose en la cantidad de proteína Six1 o ARN de Six1 expresada en la muestra del tumor de ovario en comparación con el control.

45 7. Procedimiento según la reivindicación 5 en el que la etapa de formación del pronóstico basándose en la cantidad de proteína Six1 o ARN de Six1 expresada en la muestra del tumor de ovario comprende la formación de un pronóstico de la mortalidad aumentada cuando los niveles de expresión de Six1 en el tumor de ovario son superiores a 300 fg/ng ARNr.