VACUNA DE CONJUGADO DE POLISACÁRIDOS DE NEUMOCOCOS.

Los niños de menos de 2 años de edad no montan respuestas inmunes contra la mayoría de las vacunas de polisacáridos, de modo que ha sido necesario volver a los polisacáridos inmunogénicos por conjugación química con un vehículo proteico. El acoplamiento del polisacárido, un antígeno T-independiente, a una proteína, un antígeno Tdependiente, confiere al polisacárido las propiedades de T dependencia incluyendo el cambio de isotipo, la maduración de afinidad, y la inducción de memoria. El documento WO03/051392 describe la formulación de vacunas de conjugado de Streptococcus pneumoniae de serotipo múltiple. Sin embargo, puede haber problemas con la administración repetida de conjugados polisacárido-proteína, o la combinación de conjugados polisacárido-proteína para formar vacunas multivalentes. Por ejemplo, se ha informado de que se ensayó una vacuna del polisacárido tipo b de Haemophilus influenzae (PRP) usando toxoide tetánico (TT) como vehículo proteico en un intervalo de dosificación con inmunización simultánea con TT (libre) y una vacuna de conjugado polisacárido de neumococos-TT siguiendo un programa convencional para bebés. Según se aumentaba la dosificación de la vacuna para neumococos, se disminuía la respuesta inmune contra la parte del polisacárido PRP de la vacuna de conjugado Hib, lo que indica una interferencia inmune del polisacárido, posiblemente mediante el uso de la misma proteína vehículo (Dagan y col., Infect Immun. (1998); 66: 2093-2098) El efecto de la dosificación de la proteína vehículo sobre la respuesta humoral de la propia proteína también ha demostrado ser multifacético. En bebés humanos se ha informado de que el aumento de la dosificación de un conjugado de toxoide tetánico tetravalente provocaba una respuesta disminuida contra el vehículo tetánico (Dagan y col. supra). El análisis clásico de estos efectos de vacunas de combinación se ha descrito como supresión epitópica inducida por vehículo, que no se comprende completamente, pero se cree que es el resultado de una cantidad en exceso de la proteína vehículo (Fattom, Vaccine 17: 126 (1999)). Parece que esto provoca la competición por las células Th, mediante las células B para la proteína vehículo, y las células B para el polisacárido. Si predominan las células B para la proteína vehículo, no hay suficientes células Th disponibles para proporcionar la ayuda necesaria para las células B específicas para el polisacárido. Sin embargo, los efectos inmunológicos observados han sido incongruentes, aumentando la cantidad total de la proteína vehículo en algunos casos la respuesta inmune, y disminuyendo en otros casos la respuesta inmune. Por tanto, sigue habiendo dificultades técnicas para combinar múltiples conjugados de polisacáridos en una única formulación de vacuna eficaz. Streptococcus pneumoniae es una bacteria gram-positiva responsable de una considerable morbilidad y mortalidad (particularmente en jóvenes y ancianos), que causa enfermedades invasivas tales como la neumonía, la bacteremia y la meningitis, y enfermedades asociadas con la colonización, tal como la otitis media aguda. La tasa de neumonía por neumococos en los Estados Unidos para personas de más de 60 años de edad se estima en 3 a 8 por 100.000. En el 20% de los casos esto conduce a bacteremia, y otras manifestaciones tales como meningitis, con una tasa de mortalidad cercana al 30% incluso con tratamiento antibiótico. Los neumococos se encapsulan con un polisacárido químicamente ligado que confiere especificidad de serotipo. Existen 90 serotipos conocidos de neumococos, y la cápsula es el determinante de virulencia principal para los neumococos, ya que la cápsula no solamente protege la superficie interna de la bacteria del complemento, sino que es en sí misma poco inmunogénica. Los polisacáridos son antígenos T-independientes, y no pueden procesarse o presentarse en moléculas MHC para interaccionar con células T. Sin embargo, pueden estimular al sistema inmune a través de un mecanismo alternativo que implica entrecruzamiento de receptores superficiales en células B. Se ha demostrado en varios experimentos que la protección contra enfermedad por neumococos invasivos está correlacionada muy fuertemente con anticuerpos específicos para la cápsula, y la protección es específica de serotipo. Streptococcus pneumoniae es la causa más común de enfermedad bacteriana invasiva y otitis media en bebés y niños jóvenes. Asimismo, los ancianos montan malas respuestas contra vacunas para neumococos [Roghmann y col., (1987), J. Gerontol. 42:265-270], por tanto la incidencia aumentada de neumonía bacteriana en esta población [Verghese y Berk, (1983) Medicine (Baltimore) 62:271-285]. Los síndromes clínicos principales causados por S. pneumoniae están ampliamente reconocidos y analizados en todos los libros de texto médicos convencionales (Fedson DS, Muscher DM. En: Plotkin SA, Orenstein WA, editors. Vaccines. 4ª edición. PhiladelphiaWB Saunders Co, 2004a: 529-588). Por ejemplo, la enfermedad invasiva por neumococos (IPD) se define como cualquier infección en la que se aísla S. pneumoniae de la sangre u otro sitio normalmente estéril (Musher DM. Streptococcus pneumoniae. En Mandell GL, Bennett JE, Dolin R (eds). Principles and Practice of Infectious diseases (5ª ed). Nueva York, Churchill Livingstone, 2001, p2128-2147). La enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) se reconoce porque abarca varias afecciones (obstrucción de las vías respiratorias, bronquitis crónica, bronquiolitis o enfermedad de las vías respiratorias pequeñas y enfisema) que a 2   menudo coexisten. Los pacientes sufren empeoramientos de su afección que están habitualmente asociados con dificultad aumentada para respirar, y a menudo tienen más toses que pueden ser productivas de moco o esputo purulento (Wilson, Eur Respir J 2001 17:995-1007). La EPOC se define fisiológicamente por la presencia de obstrucción irreversible o parcialmente reversible de las vías respiratorias en pacientes con bronquitis crónica y/o enfisema (Standards for the diagnosis and care of patients with chronic obstructive pulmonary disease. American Thoracic Society. Am J Respir Crit Care Med. 1995 Nov;152(5 Pt 2):S77-121). Los empeoramientos de la EPOC a menudo están causados por infección bacteriana (por ejemplo, neumococos) (Sethi S, Murphy TF. Bacterial infection in chronic obstructive pulmonary disease in 2000: a state-of-the-art review. Clin Microbiol Rev. 2001 Abr;14(2):336- 63). Por tanto un objeto de la presente invención es desarrollar una formulación mejorada de una vacuna de conjugado de polisacárido de Streptococcus pneumoniae de múltiple serotipo. Breve descripción de las Figuras Figura 1 Diagrama de barras que muestra la inmunogenicidad del conjugado 11 valente en monos Rhesus viejos. Las barras más claras representan la GMC después de dos inoculaciones con el conjugado 11 valente en adyuvante de fosfato de aluminio. Las barras más oscuras representan la GMC después de dos inoculaciones con conjugado 11 valente en adyuvante C. Figura 2 Diagrama de barras que muestra células B de memoria para PS3 después de inoculación con el conjugado 11 valente en adyuvante C o adyuvante de fosfato de aluminio. Figura 3 Diagrama de barras que muestra la inmunogenicidad anti-polisacárido 19F en ratones Balb/C para los polisacáridos sencillos 4-valentes y los conjugados dPly 4-valentes. Figura 4 Diagrama de barras que muestra la inmunogenicidad anti-polisacárido 22F en ratones Balb/C para los polisacáridos sencillos 4-valentes y los conjugados PhtD 4-valentes. Figura 5 Diagrama de barras que muestra la respuesta IgG anti-22F en ratones Balb/c. Figura 6 Diagrama de barras que muestra los títulos de opsono-fagocitosis anti-22F en ratones Balb/c. Figura 7 Diagrama de barras que compara las respuestas IgG inducidas en ratones C57B1 jóvenes después de inmunización con la vacuna de conjugado 13 valente formulada en diferentes adyuvantes. Figura 8 Diagrama de barras que muestra la eficacia protectora de diferentes combinaciones de vacuna en un modelo de neumonía en monos. Figura 9 Diagrama de barras que muestra la respuesta IgG anti-PhtD en ratones Balb/c después de inmunización con conjugados 22F-PhtD o 22F-AH-PhtD. Figura 10 Protección contra estimulación por neumococos tipo 4 en ratones después de inmunización con 22F-PhtD o 22F-AH-PhtD. Descripción de la invención La presente invención proporciona una vacuna mejorada contra Streptococcus pneumoniae que comprende 9 o más, o 10 o más (por ejemplo, 11, 12, 13, 14, o 15 o más) sacáridos capsulares de diferentes serotipos de S. pneumoniae conjugados con 2 o más proteínas vehículo, en la que la composición comprende el sacárido capsular de serotipo 19F conjugado con el toxoide diftérico (DT), pero no comprende el sacárido capsular del serotipo 19A,... [Seguir leyendo]

1.- Una composición inmunogénica de Streptococcus pneumoniae que comprende 9 o más, 10 o más, 11 o más, 13 o más, o 14 o más sacáridos capsulares de diferentes serotipos de S. pneumoniae conjugados a 2 o más proteínas vehículo diferentes, en la que la composición comprende el sacárido capsular de serotipo 19F conjugado a toxoide diftérico (DT), pero no comprende sacárido capsular del serotipo 19A, para su uso en el tratamiento o prevención de enfermedades causadas por infección con Streptococcus pneumoniae por cepas del serotipo 19A. 2.- La composición inmunogénica de la reivindicación 1, en la que el sacárido capsular de serotipo 19F es el único sacárido en la composición conjugado a toxoide diftérico (DT) para su uso en el tratamiento o prevención de enfermedades causadas por infección con Streptococcus pneumoniae por cepas del serotipo 19A. 3.- Una composición inmunogénica de acuerdo con cualquier reivindicación precedente en la que el sacárido capsular 19F se conjuga directamente a la proteína vehículo para su uso en el tratamiento o prevención de enfermedades causadas por infección con Streptococcus pneumoniae por cepas del serotipo 19A. 4.- Una composición inmunogénica de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2 en la que el sacárido capsular 19F se conjuga a la proteína vehículo mediante un enlazador para su uso en el tratamiento o prevención de enfermedades causadas por infección con Streptococcus pneumoniae por cepas del serotipo 19A. 5.- La composición inmunogénica de cualquier reivindicación precedente en la que el sacárido 19F se conjuga a la proteína vehículo o al enlazador usando química de CDAP para su uso en el tratamiento o prevención de enfermedades causadas por infección Streptococcus pneumoniae por cepas del serotipo 19A. 6.- La composición inmunogénica de cualquier reivindicación precedente en la que la proporción de proteína vehículo a sacárido 19F está entre 5:1 y 1:5, 4:1 y 1:1 ó 2:1 y 1:1, o 1,5:1 y 1,4:1 (p/p) para su uso en el tratamiento o prevención de enfermedades causadas por infección con Streptococcus pneumoniae por cepas del serotipo 19A. 7.- La composición inmunogénica de cualquier reivindicación precedente en la que el tamaño promedio (por ejemplo, Mw) del sacárido 19F está por encima de 100 kDa para su uso en el tratamiento o prevención de enfermedades causadas por infección con Streptococcus pneumoniae por cepas del serotipo 19A. 8.- La composición inmunogénica de cualquier reivindicación precedente en la que la dosis del conjugado de sacárido 19F está entre 1 y 10 g, 1 y 5 g, o 1 y 3 g de sacárido para su uso en el tratamiento o prevención de enfermedades causadas por infección con Streptococcus pneumoniae por cepas del serotipo 19A. 9.- Una composición inmunogénica de acuerdo con cualquier reivindicación precedente que comprende 2, 3, 4, 5 ó 6 proteínas vehículo diferentes para su uso en el tratamiento o prevención de enfermedades causadas por infección con Streptococcus pneumoniae por cepas del serotipo 19A. 10.- Una composición inmunogénica de acuerdo con cualquier reivindicación precedente en la que una o más o todas las proteínas vehículo se seleccionan entre el grupo que consiste en DT, CRM197, TT, fragmento C, dPly, PhtA, PhyB, PhtD, PhtE, PhtDE OmpC, PorS y proteína D de Haemophilus influenzae para su uso en el tratamiento o prevención de enfermedades causadas por infección con Streptococcus pneumoniae por cepas del serotipo 19A. 11.- Una composición inmunogénica de acuerdo con cualquier reivindicación precedente en la que la composición comprende el sacárido capsular 18C conjugado a TT para su uso en el tratamiento o prevención de enfermedades causadas por infección con Streptococcus pneumoniae por cepas del serotipo 19A. 12.- La composición inmunogénica de la reivindicación 11, en la que 18C es el único sacárido en la composición conjugado a toxoide tetánico (TT) para su uso en el tratamiento o prevención de enfermedades causadas por infección con Streptococcus pneumoniae por cepas del serotipo 19A. 13.- Un uso de una composición inmunogénica que comprende 9 o más, 10 o más, 11 o más, 13 o más, o 14 o más sacáridos capsulares de diferentes serotipos de S. pneumoniae conjugados a 2 o más proteínas vehículo diferentes, en el que la composición comprende el sacárido capsular de serotipo 19F conjugado a toxoide diftérico (DT), pero no comprende sacárido capsular del serotipo 19A en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de enfermedades causadas por infección con Streptococcus pneumoniae por cepas del serotipo 19A. 47   48   49     51   52