Separación de contaminantes de polisacárido de Streptococcus pneumoniae por manipulación del pH.
Un procedimiento de reducción del contenido de proteínas y preservar el contenido de polisacárido capsular en un caldo de lisado celular complejo de Streptococcus pneumoniae,
antes de la purificación, comprendiendo el procedimiento las etapas de:
(a) cultivar un serotipo de S. pneumoniae seleccionado en un medio basado en soja, que incluye:
(i) inocular un primer recipiente que contiene el medio basado en soja con reservas de siembra del serotipo seleccionado, e incubar el primer recipiente hasta que se cumplan los requisitos del cultivo,
(ii) inocular un segundo recipiente que contiene el medio basado en soja con el cultivo de la etapa (i) mientras que se mantiene un pH y una temperatura estables en el segundo recipiente, y
(b) lisar con un detergente, las células bacterianas producidas en la etapa (a), produciendo así un lisado que contiene proteínas solubles, residuos celulares, ácidos nucleicos y polisacáridos;
(c) agitar el lisado celular durante un tiempo suficiente para garantizar la lisis completa y la liberación de polisacáridos;
(d) reducir el pH del lisado celular a menos de 5,5 para precipitar el detergente y la mayoría de las proteínas solubles;
(e) mantener la solución y el precipitado formado en la etapa (d) sin agitación durante un tiempo suficiente para permitir la sedimentación del precipitado; y (f) procesar la solución y el precipitado por centrifugación y/o filtración, mediante lo cual el polisacárido capsular se preserva en solución y la proteína soluble se reduce de manera eficaz.
Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E18199835.
Solicitante: WYETH LLC.
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 235 EAST 42ND STREET NEW YORK, NY 10017-5755 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.
Inventor/es: RUPPEN,MARK,EDWARD, LOTVIN,JASON,ARNOLD, LEE,TSU-SHUN, BAHLER,BRIAN, CHARBONNEAU,PAMELA SUE FINK.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- A61K39/09 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE. › A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › A61K 39/00 Preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos (materiales para ensayos inmunológicos G01N 33/53). › Streptococcus.
- C08B37/00 QUIMICA; METALURGIA. › C08 COMPUESTOS MACROMOLECULARES ORGANICOS; SU PREPARACION O PRODUCCION QUIMICA; COMPOSICIONES BASADAS EN COMPUESTOS MACROMOLECULARES. › C08B POLISACARIDOS; SUS DERIVADOS (polisacáridos que contienen menos de seis radicales sacáridos unidos entre sí por enlaces glucosídicos C07H; procesos de fermentación o procesos que utilizan enzimas C12P 19/00; producción de celulosa D21). › Preparación de polisacáridos no previstos en los grupos C08B 1/00 - C08B 35/00; Sus derivados (celulosa D21).
PDF original: ES-2808126_T3.pdf
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