Una formulación de solución que contiene anticuerpos que incluye sacarosa como un estabilizante y polisorbato 80 como un estabilizante,

en la que el anticuerpo es el anticuerpo anti-receptor de interleucina 6 hPM-1, en la que la cantidad de sacarosa en la formulación es de 25 a 100 mg/ml, la cantidad de polisorbato 80 en la formulación es de 0,005 a 2 mg/ml, la cantidad de anticuerpos en la formulación es de 2 a 22,5 mg/ml, la formulación tiene un pH de 6 a 6,5 y en la que la formulación se puede obtener disolviendo los constituyentes en un tampón fosfato sódico que tiene una concentración de 10 a 20 mM

Productos farmacéuticos en solución que contienen anticuerpos.

Campo técnico

La presente invención se refiere a formulaciones de solución que contienen anticuerpos estables.

Técnica antecedente

Con el desarrollo de la tecnología de ingeniería genética se ha hecho posible usar anticuerpos, tales como inmunoglobulinas, anticuerpos monoclonales y anticuerpos humanizados como productos farmacéuticos. Para suministrar los mismos en cantidades estables, es necesario establecer condiciones de preparación y condiciones de almacenamiento en las que se puedan conservar la estructura y actividad de los anticuerpos.

Cuando las proteínas se almacenan en soluciones de alta concentración, normalmente padecen deterioro, tal como la formación de agregados insolubles, que se tiene que evitar. Especialmente, las formulaciones de anticuerpos tienen la desventaja de que tienden a formar multímeros que conducen a agregados insolubles durante el almacenamiento en soluciones.

Por ejemplo, se ha observado que los anticuerpos anti-receptor de IL-6 tienen un efecto terapéutico sobre células de mieloma inmaduras (documento JPA HEI 8-99902, que se refiere al documento WO 92/19759, describiendo el último documento la secuencia de aminoácidos de hPM-1) y se ha tenido éxito produciendo industrialmente un anticuerpo humanizado reconformado, el anticuerpo hPM-1, como un anticuerpo anti-receptor de IL-6 y se ha intentado formular este anticuerpo anti-receptor de IL-6 purificado en productos farmacéuticos. El anticuerpo anti-receptor de IL-6 humanizado es una proteína inestable que tiende a cambios físicos o químicos, tales como asociación o agregación bajo los estreses de filtración, concentración, calor y luz para eliminar virus y otros microbios durante procesos de purificación.

Cuando se tienen que obtener anticuerpos mediante técnicas de ingeniería genética, se cultivan células productoras de anticuerpos en masa y se purifican para dar una solución que contiene anticuerpos, que después se almacena congelada y se descongela antes de la formulación. Sin embargo, el contenido de anticuerpos que permanece en tal solución disminuyó cuando se formaron dímeros de anticuerpos o partículas insolubles durante ciclos repetidos de congelación/descongelación o se degradaron los anticuerpos para formar productos de degradación durante el almacenamiento a largo plazo.

Se han realizado muchos intentos de proporcionar un método para almacenar proteínas en soluciones y se observó un efecto de estabilización añadiendo polímeros que incluyen proteínas, tales como albúmina sérica humana o gelatina purificada u oligómeros, tales como polioles, aminoácidos y tensioactivos como estabilizantes para evitar cambios químicos o físicos. Sin embargo, la adición de biopolímeros, tales como proteínas como estabilizantes era incómoda, por ejemplo, requería una etapa muy complicada para eliminar contaminantes, tales como virus y priones. En cuanto a la adición de oligómeros, preferiblemente se debe minimizar.

También se han descrito formulaciones de anticuerpos secadas por congelación estabilizadas con azúcares o aminoazúcares, aminoácidos y tensioactivos (documento JPA HEI2001-503781).

Sin embargo, se han buscado formulaciones de solución que contienen anticuerpos estables debido a grandes demandas de formulaciones de solución sencillas de usar que no se puedan disolver/reconstituir antes del uso.

Descripción de la invención

El alcance de la presente invención se define por las reivindicaciones y cualquier información que no pertenezca a las reivindicaciones se proporciona solamente para la información.

Un objeto de la presente invención es proporcionar formulaciones de solución que contienen anticuerpos en las que el contenido de anticuerpos permanece alto y que son estables incluso después de almacenamiento a largo plazo inhibiendo la formación de partículas insolubles y multímeros durante la preparación o el almacenamiento de las formulaciones de solución que contienen anticuerpos e inhibiendo adicionalmente la formación de productos de degradación.

Como resultado de estudios cuidadosos para conseguir el anterior objeto, se ha conseguido la presente invención basándose en el hallazgo de que la formación de dímeros durante ciclos de congelación/descongelación o la formación de multímeros y productos de degradación durante almacenamiento a largo plazo se pueden inhibir añadiendo un azúcar y que la formación de partículas insolubles durante ciclos de congelación/descongelación se puede inhibir marcadamente añadiendo un tensioactivo.

Por consiguiente, la presente invención proporciona:

Una formulación de solución que contiene anticuerpos que incluye sacarosa como un estabilizante y polisorbato 80 como un estabilizante, en la que el anticuerpo es el anticuerpo anti-receptor de interleucina 6 hPM-1, en la que la cantidad de sacarosa en la formulación es de 25 a 100 mg/ml, la cantidad de polisorbato 80 en la formulación es de 0,005 a 2 mg/ml, la cantidad de anticuerpo en la formulación es de 2 a 22,5 mg/ml, la formulación tiene un pH de 6 a 6,5 y en la que la formulación se puede obtener disolviendo los constituyentes en un tampón fosfato sódico que tiene una concentración de 10 a 20 mM.

La realización de la invención

Como se usa en este documento, "formulación de solución que contiene anticuerpos" significa una formulación de solución que contiene un anticuerpo como un ingrediente activo y preparada para la administración a animales, tales como seres humanos, preferiblemente sin incluir ninguna etapa de secado por congelación en el proceso de preparación.

Como se usa en este documento, una "solución que contiene anticuerpos" puede ser una solución que contiene el anticuerpo como se define en la reivindicación, obteniendo biológicamente o recombinante, preferiblemente un medio de cultivo en el que se han cultivado células de mamífero, tales como células CHO que contienen el anticuerpo o una solución obtenida sometiendo tal medio a un tratamiento dado, tal como purificación parcial (solución voluminosa) o la formulación de solución preparada para la administración a animales, tales como seres humanos como se ha definido anteriormente.

Como se usa en este documento, la expresión "partículas insolubles" significa material particulado insoluble de 10 μm o más como se define en la sección de Ensayo de Material Particulado Insoluble para Inyecciones en la parte de Ensayos Generales, Procesos y Aparatos en la Farmacopea Japonesa. Las partículas insolubles se pueden medir usando microscopios, filtros de recogida de partículas insolubles y filtros de membrana analíticos o usando de forma conveniente contadores de partículas de oscurecimiento de luz automáticos.

Como se usa en este documento, "materiales insolubles" significa materiales insolubles detectables de forma sencilla de los cuales las inyecciones tienen que estar libres y limpias cuando se inspeccionan en recipientes a simple vista con una intensidad de luz de aproximadamente 1000 luxes bajo una lámpara incandescente como se define la sección de Ensayo de Material Insoluble Extraño para Inyecciones en la parte de Ensayos Generales, Procesos y Aparatos en la Farmacopea Japonesa.

Como se usa en este documento, "multímeros" y "productos de degradación" significa multímeros y productos de degradación respectivamente de moléculas de anticuerpos que constituyen ingredientes activos de formulaciones y sus contenidos se pueden determinar mediante el método de porcentaje de área máxima basándose en la cromatografía de permeación en gel descrita más adelante. El anticuerpo usado en formulaciones de solución de la presente invención es un anticuerpo humanizado como se define en la reivindicación.

El anticuerpo contenido en formulaciones estabilizadas como se define en la reivindicación es el anticuerpo anti-receptor de IL-6 humanizado hPM-1 (véase la Publicación Internacional Nº WO92-19759).

El anticuerpo contenido en las formulaciones de solución de la presente invención pertenece a la clase de inmunoglobulinas IgG1.

Las formulaciones de solución que contienen anticuerpos en la presente invención preferiblemente no muestran aumento en los multímeros y contienen 50 o menos partículas insolubles por ml después de ciclos de congelación/descongelación.

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1. Una formulación de solución que contiene anticuerpos que incluye sacarosa como un estabilizante y polisorbato 80 como un estabilizante, en la que el anticuerpo es el anticuerpo anti-receptor de interleucina 6 hPM-1, en la que la cantidad de sacarosa en la formulación es de 25 a 100 mg/ml, la cantidad de polisorbato 80 en la formulación es de 0,005 a 2 mg/ml, la cantidad de anticuerpos en la formulación es de 2 a 22,5 mg/ml, la formulación tiene un pH de 6 a 6,5 y en la que la formulación se puede obtener disolviendo los constituyentes en un tampón fosfato sódico que tiene una concentración de 10 a 20 mM.