PROCEDIMIENTO Y DISPOSITIVOS PARA EL SUMINISTRO DE UN PRODUCTO TERAPÉUTICO A LA ESFERA OCULAR DE UN PACIENTE.

Procedimiento y dispositivos para el suministro de un producto terapéutico a la esfera ocular de un paciente. La presente invención se refiere, en general, a unos procedimientos mejorados para el suministro de un agente biológicamente activo, en particular un ácido nucleico terapéutico o profiláctico, a la esfera ocular de un sujeto que comprende la administración de dicho agente en el/los tejido(s) o las células del cuerpo ciliar. Se expone asimismo la posibilidad de administración en el tejido muscular o las células extraoculares. La exposición expone asimismo los dispositivos, sus utilizaciones, particularmente en terapia génica, y los procedimientos para el tratamiento de patologías de la esfera ocular mediante la administración específica de un producto terapéutico en el/los tejido(s) o las células del cuerpo ciliar (y/o en el tejido muscular o las células extraoculares), permitiendo de este modo la transferencia del producto terapéutico en el/los tejido(s) ocular(es) que se van a tratar. La exposición presenta asimismo composiciones farmacéuticas que comprenden el producto en una forma adecuada para la administración en el/los tejido(s) o células del cuerpo ciliar y/o en el tejido muscular o las células extraoculares, y presenta su preparación y sus utilizaciones. Antecedentes de la invención ANATOMÍA DEL OJO ES 2 367 921 T3 El ojo es uno de los órganos más complejos del cuerpo. Parte del ojo, desde el punto de vista del desarrollo, es una extensión del sistema nervioso central. El ojo está compuesto de varias partes y una visión óptima o saludable así como las enfermedades oculares dependen de cómo esas partes funcionan conjuntamente. El ojo se puede dividir anatómica y funcionalmente en una cámara anterior pequeña y una cámara posterior grande. Ambas cámaras están separadas por el cristalino que es un cuerpo transparente y biconvexo. El cristalino está conectado por fibras al músculo ciliar que mediante contracción o relajación altera su forma y su poder de focalización. El músculo ciliar no es un músculo esquelético. La cámara posterior está rellena con el cuerpo vítreo, un fluido transparente y viscoso o de estructura gelatinosa compuesto de una red de fibras de colágeno suspendidas en un líquido que contiene ácido hialurónico. El globo ocular está constituido por tres capas. La capa más externa está constituida por dos partes: la esclerótica y, en la parte frontal, la córnea. Debajo de la esclerótica se encuentra la coroides. Finalmente, la capa más interna y más sensible a la luz se denomina retina. La esclerótica es una lámina protectora también conocida como la parte blanca del ojo. Es una capa de 0,3-1 mm de grosor de fibras de colágeno que recubre aproximadamente 80% de la superficie del globo ocular. En la parte frontal del ojo, la córnea transparente sobresale de la esclerótica formando la ventana del ojo en forma de cúpula. La córnea humana se compone de 5 partes, es decir, el epitelio, la membrana de Bowman, el estroma, la membrana de Descemet y el endotelio. Estas capas son importantes para mantener la transparencia de la córnea mediante un balance de fluidos adecuado y para evitar la entrada de agentes dañinos en el ojo. Sólo dos de las 5 capas de la córnea, el epitelio y el estroma, son barreras importantes contra el paso de fármacos al ojo. El endotelio y las membranas de Bowman y de Descemet no presentan una gran influencia para el paso de fármacos al ojo. El epitelio de la córnea consta por sí mismo de cinco a seis capas de células con un grosor total de 50-100 µm que forman una barrera lipofílica para los fármacos. Presenta una función protectora que evita la entrada de agentes dañinos en el ojo y es también un tejido secretor de fluido que ayuda al endotelio en el mantenimiento de la hidratación del estroma y, por lo tanto, la transparencia de la córnea. Las células del epitelio se regeneran rápidamente y presentan la capacidad de autoreemplazarse durante los 3 días posteriores a una lesión. El estroma, que representa el 90% del grosor de la córnea contiene un 75-80% de agua entremezclada con las fibras de colágeno y representa, por lo tanto, un compartimiento muy hidrófilo. Debajo de la esclerótica se encuentra la coroides que contiene los nervios y los vasos sanguíneos que suministran sangre al ojo y que lo drenan. La coroides se agranda en la parte frontal del ojo para formar el cuerpo ciliar, que secreta un líquido acuoso denominado humor acuoso. Unido al cuerpo ciliar se encuentra el iris, la parte de color del ojo, que rodea una parte central denominada pupila. La función principal del iris es la de controlar el tamaño de la pupila y por lo tanto la cantidad de luz que entre en el ojo. Esto se consigue, como se ha explicado anteriormente, mediante la contracción del músculo esfínter del iris y la constricción del músculo dilatador. La melanina pigmentada que proporciona al iris su color, ayuda en la absorción de luz fuerte o brillante. La parte más interna del ojo que contiene las células fotosensibles se denomina retina. La retina está compuesta de varias capas, siendo una de ellas la capa fotorreceptora que contiene los conos, que son los responsables de la 2 ES 2 367 921 T3 visión del color, y los bastones para la visión con luz tenue. La mayoría de los conos están situados en una pequeña área delimitada denominada mácula. El humor acuoso presenta funciones nutritivas en particular para las estructuras avasculares del ojo como la córnea, el cristalino y el cuerpo vítreo. El humor acuoso se produce de forma continua mediante los procesos ciliares del epitelio no pigmentado del cuerpo ciliar a una velocidad de aproximadamente 2,5 µL/minuto. Los músculos extraoculares son los responsables de la movilidad del ojo. Se originan en el vértice orbitario y acaban en el globo ocular. En su curso, los músculos extraoculares también están unidos mediante el septum fibroso a la órbita. En la parte anterior, los planos de la fascia se unen a la cápsula de Tenon, encerrando la esclerótica. En el ojo humano, el músculo extraocular está constituido por cuatro músculos rectos y dos músculos oblicuos. Los músculos rectos están insertados en la parte anterior a aproximadamente 7 mm posterior al limbo. Los otros músculos extraoculares son los músculos orbitales que son los responsables de la apertura y cierre de las pestañas y las fibras de Muller que presentan conexiones con el músculo recto superior. PROBLEMAS PARA EL SUMINISTRO DE FÁRMACOS EN EL OJO Un problema importante en el tratamiento de las enfermedades y trastornos oculares es la dificultad de suministrar unos agentes biológicamente activos en el ojo a unas concentraciones terapéutica o profilácticamente eficaces. La administración oral de fármacos oculares resulta muy inadecuada para alcanzar los tejidos de la retina debido a las barreras hematorretinianas. Para que una cantidad eficaz de un agente terapéutico alcance la zona ocular, se debe administrar una concentración de fármaco elevada más frecuentemente. Esto puede provocar una toxicidad sistémica. Por ejemplo, la terapia de impulsos se puede utilizar para conseguir unos niveles elevados de corticosteroides en el ojo. También existen problemas asociados a los procedimientos de administración tópica de fármacos oculares que se utilizan en la actualidad. La administración tópica normalmente solo es eficaz en patologías que implican la parte más superficial del ojo, es decir, la córnea y los segmentos anteriores. Los procedimientos de administración tópica de fármacos que se utilizan actualmente son realmente ineficaces para conseguir concentraciones adecuadas de fármaco en algunos tejidos oculares, particularmente en los tejidos intraoculares como el iris y el cuerpo ciliar. Resulta incluso más difícil alcanzar la retina, el nervio óptico o el cuerpo vítreo del ojo. Además, la administración tópica es incluso menos eficaz cuando el fármaco es una proteína o un péptido que normalmente carecen de la capacidad de cruzar la córnea haciendo que el tratamiento de las enfermedades oculares sea más difícil. Consecuentemente, los tratamientos más actuales para las enfermedades intraoculares son invasivos ya que frecuentemente requieren una inyección intraocular o cirugía intraocular (por ejemplo, la implantación quirúrgica de sistemas de liberación lenta o células encapsuladas modificadas). Las inserciones extraoculares también presentan inconvenientes. La reaplicación frecuente es necesaria ya que el compuesto terapéutico se disuelve en cuestión de horas. De nuevo, estas inserciones sólo suministran el fármaco a la córnea y a la cámara anterior. Por lo tanto, a pesar de los intentos descritos anteriormente de proporcionar un tratamiento eficaz, todavía existe una necesidad profunda y prolongada de nuevos enfoques para... [Seguir leyendo]

1. Utilización de un ácido desoxirribonucleico (ADN) terapéutico para la preparación de una composición para el tratamiento de una enfermedad ocular mediante la administración de dicha composición en el tejido o células del músculo ciliar del sujeto que debe ser tratado, comprendiendo la administración una etapa de inyección y una etapa de electroporación que implica la aplicación de un campo eléctrico. 2. Utilización según la reivindicación 1, caracterizada porque el ácido nucleico se administra por una vía transesclerotical, transcorneal, intraocular o endoscópica. 3. Utilización según la reivindicación 1 ó 2, en la que la intensidad del campo es de entre aproximadamente 1 y 400 voltios/cm, preferentemente entre aproximadamente 50 y 200 voltios/cm, todavía más preferentemente entre aproximadamente 75 y 150 voltios/cm. 4. Utilización según la reivindicación 3, en la que la intensidad del campo es de 200 voltios/cm. 5. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que la duración total de la aplicación del campo eléctrico es de entre 0,01 y 500 milisegundos, preferentemente superior a 1 milisegundo. 6. Utilización según la reivindicación 5, en la que la duración total de la aplicación del campo eléctrico es de entre 10 milisegundos y 100 milisegundos y es preferentemente de 20 milisegundos. 7. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en la que la aplicación, a el/los tejido(s), del campo eléctrico comprende uno o más impulsos de frecuencia regular. 8. Utilización según la reivindicación 7, en la que la aplicación, a el/los tejido(s), del campo eléctrico comprende entre 1 y 100.000 impulsos de una frecuencia de entre 0,1 y 1.000 hertzios. 9. Utilización según la reivindicación 8, en la que la aplicación, a el/los tejido(s), del campo eléctrico comprende entre 1 y 10 impulsos, preferentemente 8 impulsos, de una frecuencia de entre 1 y 10 Hz, preferentemente de 5 Hz. 10. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en la que los impulsos eléctricos se administran de una manera irregular unas con respecto a otras y en la que la función que describe la intensidad del campo eléctrico como una función del tiempo para un impulso es variable. 11. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en la que la integral de la función que describe la variación del campo eléctrico con el tiempo es superior a 1 kV x mseg/cm. 12. Utilización según la reivindicación 11, en la que esta integral es superior o igual a 5 kV x mseg/cm. 13. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en la que los impulsos eléctricos son impulsos de ondas unipolares o bipolares. 14. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en la que los impulsos eléctricos se seleccionan de entre ondas exponencialmente decrecientes, ondas unipolares oscilatorias de duración limitada u otras formas de ondas. 15. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 14, en la que los impulsos eléctricos comprenden impulsos de onda cuadrada. 16. Utilización según una de las reivindicaciones 1 a 15, en la que los impulsos eléctricos comprenden impulsos de ondas bipolares de oscilación. 17. Utilización según la reivindicación 1 ó 2, en la que la administración comprende una etapa de electroporación que implica la aplicación, a el/los tejido(s), de un campo eléctrico que comprende 8 impulsos de ondas cuadradas unipolares, de una frecuencia de 5 Hz, siendo la intensidad de cada impulso de 200 voltios/cm para una duración total de la aplicación del campo eléctrico de 20 ms por impulso. 18. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, en la que los impulsos eléctricos deben ser aplicados utilizando por lo menos dos electrodos distantes entre sí menos de un centímetro, y siendo por lo menos uno de dichos electrodos introducido en el tejido o las células del músculo ciliar. 19. Utilización según la reivindicación 18, en la que los electrodos son distantes entre sí menos de 10 milímetros, preferentemente menos de 8 ó 5 milímetros, todavía más preferentemente menos de 2 milímetros. 20. Utilización según la reivindicación 18 ó 19, en la que un electrodo se aplica de manera reversible sobre la ES 2 367 921 T3 superficie de la esclerótica o la conjuntiva del ojo, preferentemente la conjuntiva límbica. 21. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20, en la que la etapa de iontoforesis se realiza antes, durante o después de la etapa de electroporación. 22. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, en la que el ácido desoxirribonucleico terapéutico es un ADN bicatenario, un ADN monocatenario o un ADN en forma de complejo. 23. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22, en la que el ácido desoxirribonucleico terapéutico es un plásmido. 24. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 23, en la que el ácido desoxirribonucleico terapéutico contiene secuencias que permiten y/o promueven la expresión en el tejido o las células del músculo ciliar. 25. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 24, en la que la composición se inyecta en múltiples lugares. 26. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 22 a 25, en la que el ácido desoxirribonucleico codifica una proteína seleccionada de entre enzimas, derivados de la sangre, hormonas, linfocinas, citocinas, quimiocinas, factores antiinflamatorios, factores de crecimiento, factores tróficos, factores neurotróficos, factores hematopoyéticos, factores angiogénicos, factores antiangiogénicos, inhibidores de la metaloproteinasa, reguladores de la apoptosis, factores de coagulación, sus receptores, un péptido que es un agonista o antagonista de un receptor o de una proteína de adhesión, antígenos, anticuerpos, sus fragmentos y otros constituyentes esenciales de la célula. 27. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26, en la que la enfermedad ocular tratada se selecciona de entre enfermedades oculares inflamatorias, enfermedades isquémicas, enfermedades proliferativas, enfermedades neurodegenerativas y glaucoma. 28. Utilización según la reivindicación 27, en la que la enfermedad proliferativa es una enfermedad neovascular o glial. 29. Utilización según la reivindicación 27, en la que la enfermedad ocular tratada se selecciona de entre escleritis, conjuntivitis, queratitis, endotelitis, uveítis, coroiditis, retinitis, retinocoroiditis, uveítis anterior, retinopatía del prematuro, retinopatía diabética, retinopatía proliferativa del vítreo, distrofias retinianas hereditarias, degeneración macular asociada a la edad, glaucoma de ángulo abierto, glaucoma neovascular y retinopatía isquémica. 30. Utilización de un ácido desoxirribonucleico (ADN) terapéutico para la preparación de una composición para el tratamiento de una enfermedad ocular mediante la administración de dicha composición en el tejido o las células del músculo ciliar del sujeto que se debe tratar, comprendiendo la administración una etapa de inyección y una etapa de electroporación, en la que durante la etapa de electroporación se aplican impulsos eléctricos entre por lo menos dos electrodos distantes entre sí menos de un centímetro, siendo un electrodo aplicado de manera reversible sobre la superficie de la esclerótica o la conjuntiva del ojo y siendo por lo menos un electrodo introducido en el tejido o las células del músculo ciliar. 31. Ácido desoxirribonucleico (ADN) terapéutico para su utilización en el tratamiento de una enfermedad ocular mediante la administración de dicho ADN terapéutico en el tejido o las células del músculo ciliar del sujeto que se debe tratar, comprendiendo la administración una etapa de inyección y una etapa de electroporación que implica la aplicación de un campo eléctrico. 31 ES 2 367 921 T3 32 ES 2 367 921 T3 33 ES 2 367 921 T3 34 ES 2 367 921 T3 ES 2 367 921 T3 36 ES 2 367 921 T3 37 ES 2 367 921 T3 38 ES 2 367 921 T3 39 ES 2 367 921 T3 ES 2 367 921 T3 41 ES 2 367 921 T3 42 ES 2 367 921 T3 43 ES 2 367 921 T3 44 ES 2 367 921 T3 ES 2 367 921 T3 46 ES 2 367 921 T3 47 ES 2 367 921 T3 48