Inhibidores de la MEK 1/2 para el tratamiento de la fibrosis peritoneal.

Fármacos útiles en la prevención y tratamiento de la fibrosis de la membrana peritoneal (opacificación peritoneal, síndrome del peritoneo bronceado, fibrosis mural y síndrome de peritonitis esclerosante) que se produce como consecuencia de una diálisis peritoneal a largo plazo, método de selección de estos fármacos, y método para la recolección de datos útiles en el diagnóstico de dicha enfermedad

Inhibidores de la MEK 1/2 para el tratamiento de la fibrosis peritoneal.

La presente invención se engloba dentro del campo de la biología molecular, de la biotecnología, y de la medicina, y específicamente se refiere a la prevención y tratamiento de la fibrosis de la membrana peritoneal (opacificación peritoneal, síndrome del peritoneo bronceado, fibrosis mural y síndrome de peritonitis esclerosante) que se produce como consecuencia de una diálisis peritoneal a largo plazo. También se refiere a un método de selección de fármacos útiles en el tratamiento de la fibrosis peritoneal y a un método para la recolección de datos útiles en el diagnóstico de dicha enfermedad.

Estado de la técnica anterior

La diálisis peritoneal (DP) es una alternativa a la hemodiálisis para el tratamiento de enfermedades renales en su último estadio. Durante estos procesos, la membrana peritoneal (MP) actúa como una barrera de permeabilidad a través de la cual tiene lugar la filtración y la difusión. La MP consiste en una capa simple de células mesoteliales (CM) cubriendo una región submesotelial compuesta de tejido conectivo y un pequeño número de fibroblastos, mastocitos, macrófagos y vasos sanguíneos. La exposición crónica a los estímulos exógenos de las soluciones de diálisis hiperosmóticas, hiperglucémicas y ácidas, así como episodios de peritonitis y hemoperitoneo, y otros factores endógenos (liberación de citoquinas proinflamatorias, menstruación retrógrada, migración transmural) puede causar inflamación aguda y crónica y dañar la MP, lo que progresivamente degenera en fibrosis (opacificación peritoneal, síndrome del peritoneo bronceado, fibrosis mural y síndrome de peritonitis esclerosante), angiogénesis y vasculopatía hialinizante, lo que conduce en grado extremo a la desmesotelización de la membrana peritoneal, modificando el intercambio de sustancias y conduciendo al abandono de la diálisis peritoneal.

La transición epitelio-mesénquima (TEM) se caracteriza por la adquisición por parte de células epiteliales de características mesenquimáticas que les permiten desprenderse de las células vecinas, reorganizar su citoesqueleto, degradar la lámina basal y la matriz extracelular subyacente, y adquirir la capacidad de migrar a través de esta última. Ejemplos de transiciones epitelio-mesénquimas son la formación del mesodermo a través de la línea primitiva, la diferenciación de la cresta neural, la disgregación del dermomiotomo o la formación del mesénquima valvuloseptal en los cojines endocárdicos, y es un mecanismo involucrado en la fibrosis tisular. Además, la TEM ha sido descrita como proceso fundamental en la progresión tumoral y en patologías inflamatorias crónicas que pueden afectar órganos como riñones, hígado, pulmón y el peritoneo de pacientes sometidos a diálisis peritoneal. En este caso, la TEM puede jugar un papel importante en el desarrollo y progresión de la fibrosis peritoneal, dando lugar a un fallo funcional de la membrana (Yanez-Mo et al., 2003. N Eng J Med 2003; 348: 403-13; Margetts et al., 2005. J Am Soc Nephrol 16: 425-36; Aroeira et al., 2005. Am J Kidney Dis 2005; 46: 938-48).

La TEM en el peritoneo está unida a una disfunción de la membrana peritoneal, y su establecimiento limita la efectividad de la diálisis peritoneal. La regulación molecular de la TEM en el peritoneo es de interés, por tanto, desde el punto de vista clínico.

Entre los mecanismos moleculares implicados en la TEM se conoce que la vía Ras está implicada, tanto in vitro como in vivo. Sin embargo, son necesarias distintas vías aguas abajo de Ras para llegar a una TEM completa. Así, en la fibrosis pulmonar, el desorden fibrótico pulmonar más común, parece que la vía de señales implicada en la TEM alveolar es dependiente de Smad2, puesto que existen estudios donde se describe que inhibidores de la MEK-1 y MEK-2, como PD98059 y U0126, han fracasado en revertir la modulación fenotípica de las células A549 inducida por TGF-β1 (Kasai et al., 2005. Respiratory Research 2005, 6:56). En lo que respecta a la fibrosis peritoneal, se conoce que una de las principales causas de la misma, que sucede como consecuencia de la diálisis, es la elevada concentración de glucosa en el líquido de diálisis, En Ogawa et al., 2001. Kidney International, 60: 996-1008 también emplean el PD98059 (2'-amino-3'-metoxiflavona) (20 μmol/L, Calbiochem), un inhibidor específico de MEK, para determinar si la modificación de la actividad proteínaquinasa tiene algún efecto sobre la gap junctional intercellular communications (GJIC) y/o Cx43, concluyendo que los inhibidores de MEK no restauran GJIC y no hay un cambio significativo en la fosforilación de Cx43 en presencia de estos inhibidores. Además, también parece que en la remodelación del citoesqueleto y en la formación de fibras de actina se encuentran implicados mayoritariamente genes independientes de la activación de ERK (Zavadil et al., 2001. PNAS 98(12): 6686-6691)

Entre las citoquinas y factores de crecimiento producidos durante la inflamación peritoneal, el factor de crecimiento β1 (TGF-β1) se considera como la molécula clave en la génesis de la fibrosis peritoneal, puesto que elevados niveles de TGF-β1 en el dializado peritoneal se relacionan con peores resultados. Más aún, el tratamiento combinado con interleukina-1β (IL-1β) y TGF-β1 induce cambios bioquímicos y morfológicos en las células mesoteliales omentales que son reminiscentes de aquel que tiene lugar durante la TEM. Sin embargo, los mecanismos que controlan el establecimiento y la progresión de TEM parecen ser múltiples y específicos del tipo de célula. Así, uno de los reguladores es el factor de transcripción Snail1, un potente represor transcripcional de cadherina-E. La expresión de Snail1 integra una red compleja de señales intracelulares, incluyendo la quinasa unida a integrina (ILK), fosfatidil inositol 3 quinasa (PI3-K) y las proteína quinasas activadas por mitógenos (MAP), GSK-3β, y el factor de transcripción nuclear kappa B (NF-κB). Se ha demostrado recientemente que NF-κB juega un papel principal en la inducción de TEM en el modelo de célula cancerosa transformada por Ras (Huber et al. 2004. J. Clin. Invest. 114(4): 569-581). En células en estadio basal, NF-κB es complejado por el inhibidor de kappaB (IκB), el cual bajo activación es fosforilado y subsiguientemente degradado, permitiendo la liberación y la translocación nuclear de NF-κB y la subsiguiente expresión de genes específicos.

Aunque la regulación molecular de TEM ha sido extensivamente estudiada en otros sistemas celulares, las vías de señales que subyacen en este proceso en CM aún no han sido descrito. Puesto que la TEM producida por CM es principal en el desarrollo de la fibrosis peritoneal y de la angiogénesis, y no existe un tratamiento efectivo para evitar la pérdida progresiva de la capacidad dialítica peritoneal en pacientes sometidos a DP. Dilucidar los elementos implicados en este proceso podría dar lugar a nuevas dianas terapéuticas que permitan establecer dichos tratamientos.

Descripción de la invención

Existe la necesidad de encontrar un tratamiento efectivo para evitar la pérdida progresiva de la capacidad dialítica peritoneal en pacientes sometidos a diálisis peritoneal. En la presente invención se describe como inhibidores de la MEK-1 y MEK-2 son capaces de revertir la TEM en células mesoteliales transdiferenciadas de pacientes peritoneales sometidos a diálisis peritoneal ambulatoria continua (DPAC).

Así, un primer aspecto de la invención se refiere a una composición, de ahora en adelante composición de la invención, que comprende un agente modulador de la actividad de MEK 1/2 para la prevención y el tratamiento de la fibrosis peritoneal. Se refiere también al uso de una composición que comprende un agente modulador de la actividad de MEK 1 y/o MEK 2, de ahora en adelante composición de la invención, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de la fibrosis peritoneal.

El término "MEK 1/2" ó "MEK 1" y "MEK 2", también llamadas en la literatura "MAPKK 1/2", "MEK1a", "MAPKK1", "MKK1a", "PRKMK1", "MAP kinase kinase 1" ó "y" ó "MAP2K2", "MAPKK2", "MEK2", "MKK2", "PRKMK2", "ERK activator kinase 2", "MAP kinase kinase 2" ó "FLJ26075", se refiere a unas enzima Ser/Thr/Thr-quinasa que fosforila el enzima MAPK en sus residuos Thr y Tyr de la secuencia Thr-XTyr 185/187. A no ser que se indique lo contrario,... [Seguir leyendo]

1. Uso de una composición que comprende el agente U0126 para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de la fibrosis peritoneal.

2. Uso según la reivindicación 1, donde dicha composición además comprende adyuvantes o vehículos farmacéuticamente aceptables.

3. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, donde la composición se presenta en una forma adaptada a la administración intraperitoneal, intratecal, intravenosa, intramuscular, subcutánea, intraventricular, oral, enteral, parenteral, intranasal o dérmica.

4. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde la fibrosis peritoneal se identifica mediante la determinación de una cantidad menor de cualquier ácido nucleico transcrito que codifica para MEK 1 y/o MEK 2, o de una cantidad menor de proteína MEK 1 y/o MEK 2, en comparación con células normales.