INDAZOLES SUSTITUIDOS CON AMIDA COMO INHIBIDORES DE POLI(ADP-RIBOSA)POLIMERASA (PARP).

Un compuesto de formula I: **Fórmula** en la que: R1 es hidrogeno o fluor;

y R2 es hidrogeno o fluor; o sales, estereoisomeros o tautomeros farmaceuticamente aceptables del mismo

La presente invención se refiere a indazoles sustituidos con amida que son inhibidores de la enzima poli(ADPribosa) polimerasa (PARP), anteriormente conocida como poli(ADP-ribosa) sintasa y poli(ADP-ribosil) transferasa. Los compuestos de la presente invención son útiles como monoterapias en tumores con defectos específicos en las rutas de reparación de ADN y como potenciadores de ciertos agentes de daño de ADN tales como agentes antineoplásicos y radioterapia. Además, los compuestos de la presente invención son útiles para reducir necrosis celular (en apoplejía e infarto de miocardio), regular negativamente la inflamación y las lesiones tisulares, tratar infecciones retrovirales y proteger contra la toxicidad de la quimioterapia.

La poli(ADP-ribosa) polimerasa (PARP) constituye una súper familia de dieciocho proteínas que contienen dominios catalíticos PARP (Bioessays (2004) 26:1148). Estas proteínas incluyen PARP-1, PARP-2, PARP-3, tankirasa-1, tankirasa-2, vaultPARP y TiPARP. PARP-1, el miembro fundador, consiste en tres dominios principales: un dominio de unión a ADN amino (N)-terminal (DBD) que contiene dos dedos de zinc, el dominio de automodificación y un dominio catalítico carboxi (C)-terminal.

Las PARP son enzimas nucleares y citoplásmicas que escinden NAD+ a nicotinamida y ADP-ribosa para formar polímeros de ADP-ribosoma ramificados y largos en proteínas diana, incluyendo topoisomerasas, histonas y la propia PARP (Biochem. Biophys. Res. Commun. (1998) 245:1-10).

Se han implicado la poli(ADP-ribosil)ación en varios procesos biológicos, incluyendo reparación de ADN, transcripción génica, progresión del ciclo celular, muerte celular, funciones de cromatina y estabilidad genómica.

Se ha mostrado que la actividad catalítica de PARP-1 y PARP-2 se estimula rápidamente por roturas de cadena de ADN (véase Pharmacological Research (2005) 52:25-33). En respuesta a daño de ADN, PARP-1 se une a muescas de ADN sencillas y dobles. En condiciones fisiológicas normales existe una actividad PARP mínima, sin embargo, tras daño de ADN se produce una actividad inmediata de actividad PARP de hasta 500 veces. Tanto PARP-1 como PARP-2 detectan interrupciones de cadenas de ADN actuando como sensores de muescas, que proporcionan señales rápidas para detener la transcripción y reclutar las enzimas requeridas para reparación de ADN en el sitio del daño. Puesto que la radioterapia y muchos enfoques de quimioterapia para terapia de cáncer actúan induciendo daño a ADN, los inhibidores de PARP son útiles como quimio y radiosensibilizadores para tratamiento de cáncer. Se ha indicado que los inhibidores de PARP son eficaces en radiosensibilización células tumorales hipóxicas (documentos US 5.032.617, US 5.215,738 y US 5.041.653).

La mayoría de los efectos biológicos de PARP se relacionan con este proceso de poli (ADP-ribosil)ación que influye en las propiedades y función de las proteínas diana; con los oligómeros de PAR que, cuando se escinden de proteínas poli (ADP-ribosil)adas, confieren distintos efectos celulares; la asociación física de PARP con proteínas nucleares para formar complejos funcionales y la reducción del nivel celular de su sustrato NAD+ (Nature Review (2005) 4:421-440).

Además de estar implicado en reparación de ADN, PARP también puede actuar como un mediador de muerte celular. Su activación excesiva en condiciones patológicas tales como isquemia y lesión de reperfusión puede dar como resultado un agotamiento sustancial del NAD+ intercelular, que puede conducir a la alteración de varias rutas metabólicas dependientes de NAD+ y da como resultado muerte celular (véase Pharmacological Research (2005) 52:44-59). Como resultado de activación de PARP, los niveles de NAD+ disminuyen significativamente. La activación extensiva de PARP conduce a agotamiento grave de NAD+ en células que padecen daño de ADN masivo. La corta semivida de poli(ADP-ribosa) da como resultado una velocidad de renovación rápida, puesto que una vez que se ha formado poli(ADP-ribosa), se degrada rápidamente por la poli(ADP-ribosa) glicohidrolasa (PARG) activa constitutivamente. PARP y PARG forma un ciclo que convierte una gran cantidad de NAD+ a ADP-ribosa, causando una reducción de NAD+ y ATP a menos de 20% del nivel normal. Un escenario tal es especialmente perjudicial durante isquemia cuando la deprivación de oxígeno ya ha deteriorado drásticamente la producción de energía celular. Se asume que la producción de radicales libres posterior durante reperfusión es una causa principal de daño tisular. Parte de la reducción de ATP, que es típica en muchos órganos durante isquemia y reperfusión, podría ligarse a agotamiento de NAD+ debido a renovación de poli(ADP-ribosa). Por lo tanto, se espera que la inhibición de PARP conserve el nivel de energía celular potenciando de este modo la supervivencia de tejidos isquémicos después de la lesión. Los compuestos que son inhibidores de PARP son por lo tanto útiles para tratar afecciones que resultan de muerte celular mediada por PARP, incluyendo afecciones neurológicas tales como apoplejía, traumatismo y enfermedad de Parkinson.

Los inhibidores de PARP han demostrado que son útiles para la muerte específica de tumores deficientes en BRCA1 y BRCA-2 (Nature (2005) 434:913-916 y 917-921; y Cancer Biology & Therapy (2005) 4:934-936).

Los inhibidores de PARP han mostrado que potencian la eficacia de fármacos antineoplásicos (Pharmacological Research (2005) 52:25-33), incluyendo compuestos de platino tales como cisplatino y carboplatino (Cancer Chemother Pharmacol (1993) 33:157-162 y Mol Cancer Ther (2003) 2:371-382). Los inhibidores de PARP han mostradoaumentan la actividad anti tumoral de los inhibidores de topoisomerasa I tales como Irinotecan y Topotecan (Mol Cancer Ther (2003) 2:371-382; y Clin Cancer Res (2000) 6:2860-2867) y esto se ha demostrado en modelos in vivo (J Natl Cancer Inst (2004) 96:56-67).

Los inhibidores de PARP han mostrado que restauran la susceptibilidad a efectos antiproliferativos y citotóxicos de temozolomida (TMZ) (véase Curr Med Chem (2002) 9:1285-1301 y Med Chem Rev Online (2004) 1:144-150). Esto se ha demostrado en varios modelos in vitro (Br J Cancer (1995) 72:849-856; Br J Cancer (1996) 74:1030-1036; Mol Pharmacol (1997) 52:249-258; Leukemia (1999) 13:901-909; Glia (2002) 40:44-54; y Clin Cancer Res (2000) 6: 2860-2867 y (2004) 10:881-889) y modelos in vivo (Blood (2002) 99:2241-2244; Clin Cancer Res (2003) 9:53705379 y J Natl Cancer Inst (2004) 96:56-67). También Los inhibidores de PARP han mostradoprevienen la aparición de necrosis inducida por agentes metilantes de N3-adenina selectivos tales como MeOSO2(CH2)-lexitropsina (Me-Lex) (Pharmacological Research (2005) 52:25-33).

Los inhibidores de PARP han mostrado que actúan como sensibilizadores de radiación. Se ha indicado que los inhibidores de PARP son eficaces en la radiosensibilización de células tumorales (hipóxicas) y eficaces en la prevención de la recuperación de células tumorales de daño de ADN potencialmente letal (Br. J. Cancer (1984) 49 (Supl. VI):34-42; y Int. J. Radiat. Bioi. (1999) 75:91-100) y sub-letal (Clin. Oncol. (2004) 16(1):29-39) después de terapia de radiación, presumiblemente por su capacidad para evitar la reincorporación de rotura de cadena de ADN y afectando a varias rutas de señalización de daño de ADN.

También, los inhibidores de PARP han mostrado que son útiles para tratar enfermedades miocárdicas agudas y crónicas (véase Pharmacological Research (2005) 52:34-43). Por ejemplo, se ha demostrado que inyecciones sencillas de inhibidores de PARP han reducido el tamaño del infarto causado por isquemia y reperfusión de músculo cardiaco o esquelético en conejos. En estos estudios, una inyección de 3-amino-benzamida (10 mg/kg), un minuto antes de la oclusión o un minuto antes de la reperfusión, causó reducciones similares en tamaño del infarto en el corazón (32-42%) mientras que 1,5-dihidroxisoquinolina (1 mg/kg), otro inhibidor de PARP, redujo el tamaño del infarto en un grado comparable (38-48%). Estos resultados hacen razonable asumir que los inhibidores de PARP podrían recuperar un corazón previamente isquémico o lesión por reperfusión de tejido muscular esquelético (PNAS (1997) 94:679-683). Se han indicado hallazgos similares en cerdos (Eur. J. Pharmacol. (1998) 359:143-150 y Ann. Thorac. Surg. (2002) 73:575-581) y en perros (Shock. (2004) 21:426-32).

Los inhibidores de PARP han demostrado que son útiles para tratar ciertas enfermedades vasculares, choque séptico, lesión isquémica y neurotoxicidad (Biochim. Biophys. Acta (1989)... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto de formula I:

**(Ver fórmula)**

en la que: R1 es hidrógeno o flúor; y R2 es hidrógeno o flúor;

o sales, estereoisómeros o tautómeros farmacéuticamente aceptables del mismo.

2. Un compuesto de la reivindicación 1 de fórmula II:

**(Ver fórmula)**

10 en la que R1 y R2 son como se ha definido en la reivindicación 1;

o sales, estereoisómeros o tautómeros farmacéuticamente aceptables del mismo.

3. Un compuesto de la reivindicación 1 de fórmula III:

**(Ver fórmula)**

en la que R1 y R2 son como se ha definido en la reivindicación 1; 15 o sales o tautómeros farmacéuticamente aceptables del mismo.

4. Un compuesto de la reivindicación 1 de fórmula IV:

**(Ver fórmula)**

en la que R1 y R2 son como se ha definido en la reivindicación 1;

o sales o tautómeros farmacéuticamente aceptables del mismo.

5. Un compuesto de cualquier reivindicación previa en el que R1 es hidrógeno y R2 es hidrógeno o flúor.

6. Un compuesto de la reivindicación 1 seleccionado de: 2-(4-piperidin-3-ilfenil)-2H-indazol-7-carboxamida; 2-{4-[(3R)-piperidin-3-il]fenil}-2H-indazol-7-carboxamida; 2-{4-[(3S)-piperidin-3-il]fenil}-2H-indazol-7-carboxamida; 5-fluoro-2-(4-piperidin-3-ilfenil)-2H-indazol-7-carboxamida; 5-fluoro-2-{4-[(3S)-piperidin-3-il]fenil}-2H-indazol-7-carboxamida; 5-fluoro-2-{4-[(3R)-piperidin-3-il]fenil}-2H-indazol-7-carboxamida; 5-fluoro-2-(3-fluoro-4-piperidin-3-ilfenil)-2H-indazol-7-carboxamida; 5-fluoro-2-{3-fluoro-4-[(3R)-piperidin-3-il]fenil}-2H-indazol-7-carboxamida; 5-fluoro-2-{3-fluoro-4-[(3S)-piperidin-3-il]fenil} -2H-indazol-7-carboxamida;

y sales, tautómeros, estereoisómeros farmacéuticamente aceptables de los mismos.

7. Un compuesto de la reivindicación 6 que es: 2-(4-piperidin-3-ilfenil)-2H-indazol-7-carboxamida;

o una sal o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo.

8. Un compuesto de la reivindicación 6 que es: 2-{4-[(3R)-piperidin-3-il]fenil}-2H-indazol-7-carboxamida;

o una sal o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo.

9. Un compuesto de la reivindicación 6 que es: 2-{4-[(3S)-piperidin-3-il]fenil}-2H-indazol-7-carboxamida;

o una sal o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo.

10. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de cualquier reivindicación previa o una sal, tautómero o estereoisómero farmacéuticamente aceptable del mismo en asociación con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

11. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal, estereoisómero o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo y un agente antineoplásico para administración simultánea, separada o secuencial.

12. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal, estereoisómero o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en terapia.

13. El uso de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 o una sal, estereoisómero o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de

afecciones que pueden aliviarse por la inhibición de poli(ADP-ribosa) polimerasa (PARP).

14. El uso de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 o una sal, estereoisómero o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo para fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de cáncer, enfermedades inflamatorias, lesiones de reperfusión, afecciones isquémicas, apoplejía, insuficiencia renal, enfermedades cardiovasculares, enfermedades vasculares distintas de enfermedades cardiovasculares, diabetes, enfermedades neurodegenerativas, infección retroviral, daño retinal o senescencia de la piel y daño de la piel inducido por UV.

15. El uso de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 o una sal, estereoisómero o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de cáncer.

16. El uso de la reivindicación 15 en el que el cáncer es un cáncer que es deficiente en actividad reparadora de DSB de ADN dependiente de Recombinación Homóloga (RH).

17. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 o una sal, estereoisómero o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento o prevención de afecciones que pueden aliviarse por la inhibición de poli(ADP-ribosa) polimerasa (PARP).

18. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 o una sal, estereoisómero o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento o prevención de cáncer, enfermedades inflamatorias, lesiones de reperfusión, afecciones isquémicas, apoplejía, insuficiencia renal, enfermedades cardiovasculares, enfermedades vasculares distintas de enfermedades cardiovasculares, diabetes, enfermedades neurodegenerativas, infección retroviral, daño retinal o senescencia de la piel y daño de la piel inducido por UV.

19. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 o una sal, estereoisómero o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento o prevención de cáncer.

20. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 o una sal, estereoisómero o tautómero farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento o prevención de cáncer que es deficiente en actividad reparadora de DSB de ADN dependiente de Recombinación Homóloga (RH).