PROCEDIMIENTO PARA LA PREPARACIÓN DE FERUTININA A PARTIR DE PLANTAS DEL GÉNERO FERULA.

Procedimiento para la preparación de ferutinina a partir de plantas del género Ferula 5 Campo de la invención La presente invención se refiere a extractos vegetales de Ferula spp y a un procedimiento para aislar ferutinina a partir de dichos extractos. 10 Antecedentes de la invención Diversas plantas del género Ferula contienen terpenos con actividad estrógena, conocidos también como fitoestrógenos, es decir sustancias que regulan funciones hormonales y son aparentemente una alternativa válida para el uso de hormonas sintéticas en el tratamiento de trastornos y el síndrome premenstruales relacionados con la 15 menopausia y el envejecimiento. Extractos de algunos tipos de Ferula se usaron en tiempos antiguos como anticonceptivos y en el tratamiento de trastornos menopáusicos e impotencia. Recientemente, se han dado a conocer extractos alcohólicos de Ferula asafoetida L. (documento WO 0230438) como fármacos anticancerígenos. Los compuestos más abundantes en plantas del género Ferula son derivados de jaeschkenadiol (II): en particular ésteres de daucano que tienen la fórmula general (I) Los ésteres de daucano son compuestos conocidos y se dan a conocer por ejemplo en Phytochemistry, vol. 37, n.º 3, páginas 597 - 623, 1994. En la fórmula (I) R es un residuo de acilo alifático saturado o insaturado, lineal o 25 ramificado, o un residuo de acilo aromático opcionalmente sustituido. Ejemplos de grupos R son iso-valeroílo, angeloílo, benzoílo, p-hidroxibencilo, veratroílo o cinamoílo. Los ésteres de daucano de Ferula spp son moduladores de estrógenos similares a los SERM (moduladores selectivos del receptor de estrógenos); entre ellos, la ferutinina (Ia) muestra una actividad estrógena marcada, 30 mientras que los otros tienen una actividad bastante leve. ES 2 367 361 T3 En particular, la ferutinina es un agonista del receptor de estrógenos alfa (ER) y un agonista/ antagonista del receptor de estrógenos beta (ERß). También se ha demostrado que la ferutinina tiene una unión superior a los receptores de estrógenos que el tamoxifeno. Existe por tanto la necesidad de obtener extractos enriquecidos con ferutinina u optimizar la extracción de ferutinina en la forma pura a partir de materiales vegetales que contienen sus precursores. 2 Se conoce un procedimiento que comprende la hidrólisis de un extracto total de ésteres de daucano para dar jaeschkenadiol bruto y la posterior resterificación de jaeschkenadiol con ácido p-hidroxibenzoico adecuadamente protegido, por ejemplo con ácido p-acetoxibenzoico, de la bibliografía (J. Org. Chem. USSR (traducción al inglés); 5 EN; 28; 10; 1992; 1666-1673). No obstante, este procedimiento proporciona rendimientos bastante pobres (aproximadamente el 45%), principalmente debido a reacciones de transesterificación competitivas. Descripción detallada de la invención 10 Se ha encontrado ahora que el uso de ácido p-pivaloiloxibenzoico como agente de esterificación permite evitar reacciones competitivas responsables de los bajos rendimientos de conversión. El objeto de la presente invención es por tanto un procedimiento para la preparación de ferutinina (Ia) 15 que comprende las siguientes etapas: a) extracción de ésteres de daucano de Ferula spp; b) hidrólisis básica de ésteres de daucano para dar jaeschkenadiol (II) c) esterificación de jaeschkenadiol (II) con ácido p-pivaloiloxibenzoico (III) para dar p-pivaloilferutinina (IV) ES 2 367 361 T3 3 d) hidrólisis de p-pivaloilferutinina (IV) para dar ferutinina. Ésteres de daucano significa compuestos de fórmula general (I) tal como se definió anteriormente; dichos ésteres pueden obtenerse mediante extracción de los rizomas o partes aéreas de Ferula spp, preferiblemente Ferula communis y Ferula hermonis, con métodos convencionales, por ejemplo mediante extracción con alcoholes inferiores. Partiendo de los rizomas de Ferula hermonis que contienen éster benzoico de jaeschkenadiol y ferutinina (no pueden separarse fácilmente mediante cromatografía) en una razón de 1:1, puede aislarse ferutinina pura extrayendo las raíces con metanol, tratando el extracto con KOH al 5% y extrayendo de nuevo el extracto saponificado con hidrocarburos alifáticos, éteres, ésteres o disolventes clorados. Alternativamente, los ésteres de daucano pueden obtenerse mediante extracción con CO2 supercrítico a temperaturas que oscilan entre 35 y 65ºC, preferiblemente a 45ºC, y presiones que oscilan entre 200 y 260 bar, preferiblemente a 245 bar. En el separador (o en los separadores) la temperatura oscila entre 25 y 45ºC y la presión es de aproximadamente 50 bar. En estas condiciones experimentales no se extraen los materiales pegajosos, que hacen que sea difícil la recuperación de los compuestos deseados. El residuo puede someterse directamente a saponificación según lo que se notifica en los ejemplos. Se esterifica jaeschkenadiol con ácido p-pivaloiloxibenzoico y se trata, en el mismo disolvente de reacción, con una base, preferiblemente una amina primaria, más preferiblemente etilendiamina, para dar ferutinina pura. Según una realización preferida de la invención, las etapas c) y d) se llevan a cabo convenientemente en secuencia sin la recuperación de p-pivaloilferutinina intermedia. Un objeto adicional de la presente invención es el uso cosmético de ferutinina, p-pivaloilferutinina y extractos, de Ferula spp, preferiblemente extractos de Ferula communis y Ferula hermonis tal como se define en las reivindicaciones 8-10. Cuando se aplican sobre la piel, los extractos de Ferula spp y ferutinina demostraron sorprendentemente que pueden aumentar la biosíntesis de colágeno y ejercer una acción de hidratación, tónica y trófica, proporcionando así firmeza y elasticidad. Además, reducen la secreción de sebo y desempeñan un papel notable en el control del hirsutismo y la virilización facial. Por tanto, las composiciones que contienen extractos de Ferula spp o ferutinina pueden usarse en el campo cosmético o dermatológico para el tratamiento de arrugas superficiales o profundas u otros antiestetismos, así como para el tratamiento de diversas formas de acné y seborrea. Los extractos de Ferula spp y ferutinina pueden formularse en forma de cremas, geles y lociones en mezcla con excipientes convencionales, por ejemplo los descritos en Remingtons Pharmaceutical Sciences Handbook, XVII ed., Mack Pub., N.Y., EE.UU., preferiblemente en presencia de lecitina de soja o fosfolípidos, tales como lauroilfosfatidilcolina y miristoilfosfatidilcolina, que pueden incorporarse en emulsiones de agua/aceite y aceite/agua o en emplastos transdérmicos. Los siguientes ejemplos ilustran la invención en mayor detalle. EJEMPLOS ES 2 367 361 T3 Ejemplo 1 - Aislamiento de jaeschkenadiol a partir de raíces de Ferula hermonis Se extraen 250 g de raíces de Ferula hermonis finamente molidas (distribución de tamaño de partícula: 2 mm) mediante percolación con MeOH 11. Tras la maceración durante dos días y percolación del disolvente, se repite la operación (4 x 11), para obtener 112,2 g de extracto de metanol (45%). Se monitoriza el agotamiento del fármaco mediante CCF (éter de petróleo/EtOAc 8/2, ferutinina Rf: 0,14). Se somete a reflujo el extracto de metanol con 513 ml de una disolución de KOH al 10%-metanol. Tras 1 h, el análisis de CCF (éter de petróleo-EtOAc 8/2, ferutinina Rf: 0,14; Rf de jaeschkenadiol: 0,31) muestra que se ha completado la reacción. Tras enfriar, se diluye la mezcla de reacción con agua (500 ml) y se extrae con éter de petróleo (4 x 500 ml). Se lavan las fases de éter de petróleo combinadas con salmuera, se secan y se evaporan. Se lava el residuo semicristalino resultante con éter de petróleo frío (temperatura del refrigerador) para obtener 7,5 g de jaeschkenadiol cristalino. Se purifican las aguas madres mediante cromatografía (50 g de gel de sílice, éter de petróleo-EtOAc 95:5), para obtener -bisabolol (870 mg), una mezcla de -bisabolol y jaeschkenadiol, y jaeschkenadiol puro (3,4 g tras la cristalización). Se junta la mezcla de jaeschkenadiol y -bisabolol con el agua madre y se cromatografía (50 g de gel de sílice, éter de petróleo-EtOAc 95:5), para obtener 1,95 g de jaeschkenadiol cristalino (rendimiento global: 12,85 g, 5,1%). El compuesto tiene las siguientes propiedades fisicoquímicas y espectroscópicas: espectro IR (KBr, cm -1 ): 3339, 2965, 2905, 2875, 1470, 1375, 1047, 968, 858 4 espectro de masas (C.I.) M + +1 - H2O=221; M + +1 - 2H2O=203 espectro de 1 H-RMN (300 MHZ, CDCl3) : H9 5,43 m, H2 3,9 m, H14 1,78 s, H15 1,00s, H12 0,95 d J 4,98, H13 0,91 d J 5,13. Ejemplo 2 - Aislamiento de jaeschkenadiol a partir de raíces de Ferula communis Se extraen 250 g de raíces de Ferula communis finamente molidas (distribución de tamaño de partícula: 2 mm) mediante percolación usando MeOH 11. Tras la maceración durante dos días y percolación del disolvente,... [Seguir leyendo]

1. Procedimiento para la preparación de ferutinina (Ia) que comprende las siguientes etapas: a) extracción de ésteres de daucano de Ferula spp; b) hidrólisis básica de ésteres de daucano para dar jaeschkenadiol (II) c) esterificación de jaeschkenadiol (II) con ácido p-pivaloiloxibenzoico (III) para dar p-pivaloilferutinina (IV) 15 d) hidrólisis de p-pivaloilferutinina (IV) para dar ferutinina. ES 2 367 361 T3 2. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que los ésteres de daucano se extraen de Ferula communis. 3. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que los ésteres de daucano se extraen de Ferula hermonis. 4. Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en el que los ésteres de daucano se extraen con dióxido de carbono supercrítico a temperaturas que oscilan entre 35 y 65ºC y presiones que oscilan entre 200 y 260 bar. 25 5. Procedimiento según la reivindicación 4, en el que la temperatura es de 45ºC. 9 6. Procedimiento según la reivindicación 4 ó 5, en el que la separación se lleva a cabo a temperaturas que oscilan entre 25 y 45ºC y presiones que oscilan entre 45 y 55 bar. 7. Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en el que las etapas c) y d) se llevan a 5 cabo en secuencia sin recuperar el compuesto (IV). ES 2 367 361 T3 8. Uso de extractos de Ferula spp para el tratamiento cosmético de las arrugas. 9. Uso de ferutinina para el tratamiento cosmético de las arrugas. 10. Uso de p-pivaloiloxiferutinina para el tratamiento cosmético de las arrugas.