BIARILCARBOXIARILAMIDAS COMO MODULADORES DEL RECEPTOR VANILLOIDE-1.

Biarilcarboxiarilamidas como moduladoras del receptor vanilloide-1. Campo de la invención La presente invención se refiere a moduladores del receptor vanilloide, en particular a antagonistas del TRPV1. 5 Estado de la técnica El potencial receptor transitorio vanilloide 1 (TRPV1) está fuertemente implicado en la génesis de la hiperalgesia térmica y mecánica y se le ha presentado como el responsable de un papel clave en diferentes estados patológicos que incluyen el dolor neuropático y trastornos urológicos. Se conocen antagonistas del receptor vanilloide que contienen un resto biarilo; La Patente WO 2004/056774 1 divul- 10 ga, entre otras, las arilamidas del ácido biaril-4-carboxílico substituidas siguientes: 15 Descripción de la invención Se ha encontrado ahora que reemplazando el resto piridilo o el anilo quinolein-3-ilo en los compuestos anteriores con un anillo isoquinolein-5-ilo, pueden obtenerse antagonistas del TRPV1 con propiedades mejoradas. De acuerdo con ello, la invención proporciona moduladores del receptor vanilloide-1 mejorados de fórmula general (I) en la que: A es CH o N; ES 2 366 240 T3 Z es un anillo fenilo o piridilo, opcionalmente substituido con uno o dos grupos R, los cuales pueden ser el mismo o diferentes entre sí y están seleccionados entre alquilo de C1-C4, preferiblemente metilo, isopropilo 25 o terc-butilo, haloalquilo de C1-C4, preferiblemente trifluorometilo, o halógeno. Para los fines de la presente invención, halógeno significa un átomo de halógeno seleccionado entre flúor, cloro, bromo y yodo, preferiblemente cloro. 2 Un primer grupo de compuestos preferidos de la invención es el de fórmula (Ia) en la cual Z es tal como se ha definido anteriormente. Un segundo grupo de compuestos preferidos de la invención es el de fórmula (Ib) en la cual Z es tal como se ha definido anteriormente. En los compuestos de fórmula (Ia) y (Ib), Z es preferiblemente un anillo fenilo substituido en la posición para con un grupo R distinto de hidrógeno, preferiblemente cloro. El compuesto el más preferido de acuerdo con la invención es N-(4-clorofenil)-6-(isoquinolein-5-il)piridino-3-carboxamida (denominada en la presente invención en adelante como 10 V394) Los compuestos de fórmula (I) pueden prepararse mediante procedimientos convencionales, tales como la reacción de un compuesto de fórmula (II) 15 en la que A es tal como se ha definido anteriormente y el grupo carboxi está activado tal como cloruro, con un compuesto de fórmula (III) en la que Z es tal como se ha definido anteriormente. ES 2 366 240 T3 Z-NH2 (III) Preferiblemente, los compuestos de fórmula (I) pueden obtenerse mediante la reacción de Suzuki 2 entre un com- 20 puesto de fórmula (IV) 3 en la que A y Z son tal como se ha definido anteriormente y X es un halógeno seleccionado entre yodo y bromo y ácido borónico (V) Por ejemplo, el compuesto V394 se prepara de manera conveniente mediante la reacción de Suzuki entre 6-bromoó 6-cloro-N-(4-clorofenil)piridino-3-carboxamida y ácido isoquinolein-5-il-5-borónico. Los compuestos de fórmula (I) modulan el receptor vanilloide TRPV1; el compuesto preferido V394 mostró un valor K1 de 15 nM (13-17) en la médula espinal de rata y un valor IC50 de 0,83 nM (0,74-0,93) en neuronas de ganglios de la raíz dorsal de rata cultivadas. De acuerdo con ello, los compuestos de la invención pueden usarse para la preparación de composiciones farmacéuticas para el tratamiento de estados inflamatorios, tales como dolor crónico e hiperalgesia inflamatoria. Estas formulaciones pueden prepararse mediante procedimientos y excipientes convencionales, tales como los divulgados en el Remingtons Pharmaceutical Science Handbook, XVII ed. Mack Publ., N.Y., USA. La invención se ilustrará aquí a continuación mediante el ejemplo siguiente. Ejemplo Materiales y procedimientos Todos los compuestos disponibles comercialmente se adquirieron de Aldrich y se usaron sin purificación adicional. Los desarrollos de las reacciones se monitorizaron mediante cromatografía de capa fina sobre gel de sílice (previamente recubierta con placas Merck F254), las manchas se examinaron con luz UV y se visualizaron con KMnO4 acuoso. Las cromatografía ultrarrápida se realizó usando gel de sílice de Merck (malla 230-240). Los espectros de RMN- 1 H se registraron sobre un espectrómetro Varian 400 MHz usando TMS como patrón interno. Los espectros de masa se obtuvieron con un espectrómetro Waters-Micromass ZMD. Los puntos de fusión se determinaron sobre un aparato Buchi-Tottoli y están sin corregir. Ejemplo - N-(4-clorofenil)-6-(isoquinolein-5-il)piridino-3-carboxamida (V394) Etapa a) - 6-cloro-N-(4-clorofenil)piridino-3-carboxamida Se disolvió cloruro 6-cloro-nicotínico disponible comercialmente (56,8 mmol, 10 g) en 50 ml de CH2Cl2 anhidro y se agregó, gota a gota, a una solución de diisopropiletilamina (DIEA) (1,2 equiv., 68,2 mmol, 11,67 ml) y 4-cloroanilina (1,2 equiv., 68,2 mmol, 8,70 g) en 50 ml de CH2Cl2 a 0ºC. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas y, a continuación, se diluyó con CH2Cl2 (200 ml) y se lavó con agua (1 x 200 ml) y salmuera (1 x 100 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato sódico y se concentró. El producto bruto se cristalizó a partir de éter dietílico, proporcionando 13 g de un sólido de color blanco. Rendimiento = 86%. RMN- 1 H (CDCl3, 200 MHz) 7,35 (2H, d, J= 8,8 Hz), 7,47 (1H, d, J= 8,2 Hz), 7,58 (2H, d, J= 8,8 Hz), 7,88 (1H, s ancho), 8,16 (1H, dd, J= 8,4 Hz, J= 2,8 Hz), 8,84 (1H, d, J= 2,4 Hz). Etapa b) - ácido isoquinolein-5-il-5-borónico ES 2 366 240 T3 Una solución 2,5 M de n-BuLi (1,2 equiv., 3 mmol, 1,2 ml) en 20 ml de THF recién destilado, enfriado a -78ºC, se agregó con una solución de 5-bromoisoquinoleina (2,5 mmol, 520 mg) en 5 ml de THF. La mezcla resultante se dejó reaccionar a esta temperatura durante 45 minutos. A continuación, se agregó una solución de borato de triisopropilo (1,2 equiv., 3 mmol, 0,7 ml) y la mezcla se agitó a la misma temperatura durante 5 minutos y, a continuación, se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante un tiempo adicional de una hora. La mezcla se interrumpió mediante la lenta adición de una solución de NaOH al 5% (30 ml). La capa acuosa se separó y se acidificó a pH 5/6 mediante la adición de HCl al 10% a 0ºC.La extracción con acetato de etilo, evaporación de la fase orgánica y cristalización a partir de éter dietílico, proporcionó 250 mg de un sólido de color blanco. Rendimiento = 58%. RMN- 1 H (d6- 4 DMSO, 200 MHz) 7,66 (1H, t, J= 7,2 Hz), 8,07 (1H, d, J= 5,8 Hz), 8,13 (1H, d, J= 8,0 Hz), 8,34 (1H, d), 8,47 (1H, d), 8,50 (2H, s ancho), 9,29 (1H, s); [M +1 ] 174,1 (C9H8BNO2 requiere 172,98). Etapa c) - N-(4-clorofenil)-6-(isoquinolein-5-il)piridino-3-carboxamida (reacción de Suzuki) Una mezcla de ácido isoquinolein-5-il-5-borónico (1,5 equiv., 8,4 mmol, 1,46 g), 6-cloro-N-(4-clorofenil)piridino-3carboxamida (5,6 mmol, 1,5 g), acetato de paladio (4% mol, 48 mg), trifenilfosfina (2 equiv., 2,94 g), Na2CO3 al 15% (4 ml), EtOH (4 ml) y tolueno (50 ml), se calentó a 80ºC durante 16 horas. Después de evaporación, se agregó una solución de bicarbonato sódico saturada y el sólido precipitado se filtró y, a continuación, se lavó con acetato de etilo. El residuo se recristalizó a partir de metanol, obteniéndose 1,4 g compuesto V394 en forma de un sólido de color blanco. P.fus. (éter dietílico) = 258ºC. Rendimiento = 69%. RMN- 1 H (d6-DMSO, 400 MHz) 7,471 (2H,d, J= 8,8 Hz), 7,838 (1H, m), 7,852 (2H, d, J= 8,8 Hz), 7,953 (1H, d, J= 8,0 Hz), 8,049 (1H, dd, J= 7,2 Hz, J= 0,8 Hz), 8,085 (1H, d, J= 6,0 Hz), 8,290 (1H, d, J= 8,4 Hz), 8,490 (1H, dd, J= 8,4 Hz, J= 2,2 Hz), 8,543 (1H, d, J= 6,0 Hz), 9,300 (1H, d, J= 1,6 Hz), 9,438 (1H, s), 10,695 (1H, s); [M +1 ] 360,4 (C21H14ClN3O requiere 359,81). Ensayo biológico Se usaron ratas Sprague-Dawley recién nacidas y adultas (~250 g) (Harlam, Italia). Todos los experimentos cumplieron con las directrices nacionales y fueron aprobados por el Comité de Etica Regional. Ensayo de unión de radioligando ES 2 366 240 T3 Se usaron ratas Sprague-Dawley macho con pesos corporales entre 250 a 350 g en el momento del ensayo. Para los ensayos de unión, las ratas se sacrificaron por decapitación bajo anestesia y la médula espinal se retiró y rompió usando un homogeneizador de tejidos Polytron en tampón enfriado en hielo que contenía KCl 5 mM, NaCl 5,8 mM, CaCl2 0,75 mM, MgCl2 2 mM, sacarosa 320 mM, Hepes 10 mM, pH 8,6 5 . El tejido homogeneizado se centrifugó a 1000 x g durante 10 minutos a 4ºC y el sobrenadante se centrifugó nuevamente a 35000 x g durante 30 minutos a 4ºC (Beckman Avanti J25). El gránulo se volvió a suspender en el mismo tampón tal como se ha descrito anteriormente y se usó en los experimentos de unión. En los experimentos de saturación, se incubaron 150 µg de proteína/muestra... [Seguir leyendo]

Z es un anillo fenilo o piridilo, opcionalmente substituido con uno o dos grupos R, los cuales pueden ser el mismo o diferentes entre sí y están seleccionados entre alquilo de C1-C4, haloalquilo de C1-C4, o halógeno. 2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R está seleccionado entre metilo, isopropilo, tercbutilo o trifluorometilo. 10 3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de fórmula (Ia) en la cual Z es tal como se define en la reivindicación 1. 4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de fórmula (Ib) 15 en la cual Z es tal como se define en la reivindicación 1. ES 2 366 240 T3 5. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 4 de fórmula 7 ES 2 366 240 T3 6. Compuestos de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 para uso como medicamentos. 7. Uso de los compuestos de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para la preparación de medicamentos para el tratamiento de enfermedades inflamatorias y trastornos urológicos. 8. Uso de acuerdo con la reivindicación 7, en la que la enfermedad inflamatoria es dolor neuropático. 9. Composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 mezclado con vehículos y/o excipientes aceptables farmacéuticamente. 8