AGENTE INMUNOTERAPÉUTICO PARA CD37 Y COMBINACIÓN CON UN AGENTE QUIMIOTERAPÉUTICO BIFUNCIONAL DEL MISMO.

Agente Inmunoterapéutico para CD37 y Combinación con un Agente Quimioterapéutico Bifuncional del Mismo ANTECEDENTES Campo Técnico La presente descripción proporciona generalmente composiciones y su uso en métodos para tratar trastornos de las células B y, más específicamente, una molécula inmunofarmacéutica modular pequeña (SMIP) anti-CD37 humanizada, así como terapias combinadas sinérgicas de moléculas de unión específica a CD37 con agente quimioterapéuticos bifuncionales para su uso en el tratamiento o la prevención de enfermedades auto-inmunitarias, inflamatorias, o hiperproliferativas relacionadas con las células B. Descripción de la Técnica Relacionada El sistema inmunitario humano protege generalmente el organismo de sustancias foráneas invasoras y patógenos. Un componente del sistema inmunitario son los linfocitos B, también referidos como células B, que producen anticuerpos que protegen el organismo uniéndose a, y en algunos casos mediando la destrucción de, una sustancia foránea o patógeno. En algunos casos, no obstante, las funciones del sistema inmunitario pueden fracasar y producir enfermedades. Por ejemplo, existen numerosos cánceres, enfermedades autoinmunitarias, y enfermedades inflamatorias que implican proliferación no controlada de células B. Las células B pueden ser identificadas por las moléculas de su superficie celular, tales como CD37. CD37 es una proteína de 40-52 kDa altamente glicosilada que pertenece a la familia de los antígenos de la superficie celular transmembrana de la tetraspanina, que es altamente expresada sobre células B productoras de anticuerpos normales pero no sobre pre-células B o células plasmáticas . Además de las células B normales, casi todas las malignidades con origen en las células B son positivas para la expresión de CD37, incluyendo la leucemia linfocítica crónica (LLC), el linfoma no Hodgkins (LNH), y la leucemia de las células pilosas (Moore et al., J. Pathol. 152:13 (1987); Merson y Brochier, Immunol. Lett. 19:269 (1988); y Faure et al., Am. J. Dermatopathol. 12:122 (1990)). Se han desarrollado algunas terapias específicas para CD37. Un anticuerpo monoclonal murino IgG1 específico para CD37, MB-1, se marcó con I 131 y se sometió a ensayo en una prueba clínica en el tratamiento del LNH (véase Press et al., J. Clin. Oncol. 7:1027 (1989); Bernstein et al., Cancer Res. (Suppl.) 50:1017 (1990); Press et al., Front. Radiat. Ther. Oncol. 24:204 (1990); Press et al., Adv. Exp. Med. Biol. 303:91 (1991) y Brown et al., Nucl. Med. Biol. 24:657 (1997)). El anticuerpo MB-1 carece de funciones efectoras Fc, tales como citotoxicidad celular dependiente de anticuerpo (CCDA), y el anticuerpo MB-1 desnudo no inhibió el crecimiento tumoral en un modelo de xenoinjerto in vivo (Buchsbaum et al., Cancer Res. 52:6476 (1992)). Además, se administró un producto inmunoconjugado que tenía adriamicina ligada a G28-1, otro anti-CD37 monoclonal murino, a ratones y se demostró que era internalizado con adriamicina siendo liberado intracelularmente (véase, Braslawsky et al., Cancer Immunol. Immunother. 33:367 (1991)). Una proteína de fusión diseñada, denominada producto inmunofarmacéutico modular pequeño (SMIP®), dirigido a CD37 está siendo sometida a ensayo en la actualidad en seres humanos (véase, p. ej., Publicaciones de las Solicitudes de Patente de los Estados Unidos 2003/0133939 y 2007/0059306). Aunque se ha llevado a cabo una investigación exhaustiva sobre las terapias basadas en anticuerpos, sigue existiendo la necesidad en la técnica de composiciones y métodos alternativos y mejorados para tratar los trastornos y enfermedades asociados con las células B. La presente invención proporciona una molécula de unión específica a CD37 que comprende la secuencia de aminoácidos mostrada en el SEQ ID NO: 253. En ciertas realizaciones, la molécula de unión específica a CD37 consiste esencialmente en la secuencia de aminoácidos mostrada en el SEQ ID NO: 253. En ciertas realizaciones, la molécula de unión específica a CD37 consiste en la secuencia de aminoácidos mostrada en el SEQ ID NO: 253. En un aspecto relacionado, la presente invención también proporciona una molécula de ácido nucleico aislada que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una molécula de unión específica a CD37 humanizada de la presente invención. En otro aspecto relacionado, la invención proporciona un vector que comprende una molécula de ácido nucleico aislada que codifica una molécula de unión específica a CD37 humanizada de la presente invención. En otro aspecto relacionado, la invención proporciona una célula anfitriona que comprende el vector descrito más arriba. La invención también proporciona una composición que comprende una molécula de unión específica a CD37 humanizada de la presente invención y un portador farmacéuticamente aceptable. 2   En otro aspecto, la presente invención proporciona el uso de los compuestos de la invención en un método para reducir las células B o tratar una enfermedad asociada con la actividad aberrante de las células B, que comprende administra a un sujeto que lo necesite, una cantidad eficaz de una molécula de unión específica a CD37 humanizada proporcionada en la presente memoria. En ciertas realizaciones, la enfermedad asociada con la actividad aberrante de las células B es un linfoma de células B, una leucemia de células B, un mieloma de células B, una enfermedad caracterizada por la producción de autoanticuerpos, o una enfermedad caracterizada por la estimulación inapropiada de células T asociada con una ruta de células B. En ciertas realizaciones, la enfermedad caracterizada por la producción de auto-anticuerpos es una miopatía inflamatoria idiopática, artritis reumatoide, miastenia grave, enfermedad de Graves, diabetes melitus de tipo I, esclerosis múltiple, una enfermedad auto-inmunitaria, dermatomiositis, polimiositis, o macroglobinemia de Waldenstrom. En ciertas realizaciones, la enfermedad asociada con la actividad aberrante de las células B es la leucemia linfocítica crónica (LLC). BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La Figura 1 muestra los alineamientos de las secuencias de aminoácidos de la región variable de la cadena pesada y ligera de las secuencias G28.1 y CAS-024 de ratón, junto con una secuencia identidad consenso. Las Figuras 2A-2D muestran los cromatogramas de la cromatografía de exclusión por tamaños (SEC) de CAS- 001, CAS-002, CAS-003, y CAS-024. Los picos de interés (PDI) tienen 98-99% de moléculas SMIP que están siendo purificadas. CAS-024 tiene un pico muy agudo y simétrico (que indica homogeneidad), mientras los picos de CAS-001, CAS-002, y CAS-003 tienen un hombro ligero (donde después de la integración, el hombro representa aproximadamente un 35% de PDI), lo que indica una población heterogénea de moléculas. La Figura 3 es un gráfico que muestra cómo compiten diferentes proteínas SMIP específicas anti-CD37 con la molécula CAS-006 parental (proteína SMIP anti-CD37 quimérica, mVLmVH) por la unión a CD37 sobre células Ramos, lo que proporciona una indicación de la afinidad de la unión en comparación con la molécula parental. CAS-024 (hVHhVL) tiene sustancialmente la misma afinidad por CD37 que CAS-006, mientras las otras moléculas (CAS-001, CAS-002, y CAS-003, todas hVLhVH) tienen un descenso de afinidad de 2 a 4 veces. Las Figuras 4A y 4B son gráficos de análisis competitivo por la unión adicionales frente a CAS-006 (marcada como SMIP-016 en estos gráficos). Aquí, las moléculas SMIP híbridas de ratón-humano (CAS-014 mVHhVL y CAS-017 hVLmVH) tienen una afinidad que es superior a CAS-006, mientras CAS-024 muestra la misma afinidad de unión que CAS-006 y CAS-003 (hVLhVH) tiene una afinidad de unión inferior. Las Figuras 5A-5E muestran la unión competitiva entre varios anticuerpos anti-CD37 diferentes y CAS-006 (una molécula SMIP anti-CD37 quimérica). Las Figuras 6A y 6B demuestran que CAS-024 era estadísticamente superior a Rituxán® en el tratamiento in vivo de un modelo animal de linfoma folicular como se muestra por medio de (A) la tasa de supervivencia y (B) el porcentaje sin tumores. La Figura 7 demuestra que CAS-024 actúa sinérgicamente con los agentes quimioterapéuticos fludarabina y vincristina para eliminar las células del linfoma de células del manto (LCM), células Rec-1. La Figura 8 es un gráfico de barras que muestra el nivel de agotamiento de los linfocitos de sangre periférica en pacientes humanos tratados con una molécula SMIP anti-CD37 de esta descripción. La Figura 9 muestra el agotamiento de los linfocitos y el transcurso del tratamiento para el paciente BJB. BJB (parte de la Cohorte 7) se trató con 3,0 mg/kg los días 1, 3 y 5 la primera semana seguido de 3 dosis semanales en el primer ciclo, y este mismo tratamiento se administró en un segundo ciclo. El paciente... [Seguir leyendo]

1. Una molécula de unión específica a CD37, que comprende una secuencia de aminoácidos como se muestra en el SEQ ID NO. 253. 2. Una molécula de unión específica a CD37 de la reivindicación 1, que consiste en la secuencia de aminoácidos mostrada en el SEQ ID NO: 253. 3. Una molécula de ácido nucleico aislada, que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica la molécula de unión específica a CD37 humanizada de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores. 4. Un vector que comprende la molécula de ácido nucleico de acuerdo con la reivindicación 3. 5. Una célula anfitriona que comprende un vector de acuerdo con la reivindicación 4. 6. Una composición que comprende una molécula de unión específica a CD37 humanizada de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2 y un portador farmacéuticamente aceptable. 7. Una molécula de unión de la reivindicación 1 o 2 o la composición de la reivindicación 6 para su uso en terapia. 8. Una molécula de unión específica a CD37 humanizada de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2 para su uso en un método para reducir las células B o tratar una enfermedad asociada con la actividad aberrante de las células B. 9. Una molécula de unión de la reivindicación 8, donde la enfermedad asociada con la actividad aberrante de las células B es un linfoma de las células B, una leucemia de células B, un mieloma de células B, una enfermedad caracterizada por la producción de auto-anticuerpos, o una enfermedad caracterizada por la estimulación inapropiada de las células B asociada con una ruta de las células B. 10. La molécula de unión de la reivindicación 9, donde la enfermedad caracterizada por la producción de autoanticuerpos es la miopatía inflamatoria idiopática, la artritis reumatoide, la artritis reumatoide juvenil, la miastenia grave, la enfermedad de Graves, la diabetes melitus de tipo I, la enfermedad de la membrana del basamento antiglomerular, la glomerulonefritis de progreso rápido, la enfermedad de Berger (nefropatía IgA), el lupus eritematoso generalizado (LEG), la enfermedad de Crohn, la colitis ulcerativa, la púrpura trombocitopénica idiopática (PTI), el síndrome de anticuerpos anti-fosfolípidos, la neuromielitis óptica, la esclerosis múltiple, una enfermedad autoinmunitaria, la dermatomiositis, la polimiositis, o la macroglobinemia de Waldenstrom. 11. La molécula de unión de la reivindicación 9, donde la enfermedad asociada con la actividad aberrante de las células B es la leucemia linfocítica crónica (LLC), el linfoma no Hodgkins (LNH), la leucemia de las células pilosas, el linfoma linfocítico de células pequeñas, el linfoma linfoplasmacítico, el linfoma esplénico de la zona marginal, el linfoma de células B de la zona marginal extra-nodal de tipo tejido linfoide asociado a la mucosa (TLAM), el linfoma de células B de la zona marginal nodal, el linfoma folicular, el linfoma de las células del manto, el linfoma de células B grandes difuso, el linfoma de células B grandes de mediastino (tímico), el linfoma de células B grandes intravascular, el linfoma de efusión primaria, o el linfoma/leucemia de Burkitt. 12. El uso de la molécula de unión específica a CD37 humanizada de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2 para la fabricación de un medicamento para su uso en un método para reducir las células B o tratar una enfermedad asociada con la actividad aberrante de las células B. 13. El uso de la reivindicación 12, donde la enfermedad asociada con la actividad aberrante de las células B es un linfoma de células B, una leucemia de células B, un mieloma de células B, una enfermedad caracterizada por la producción de auto-anticuerpos, o una enfermedad caracterizada por la estimulación inapropiada de las células T asociada con una ruta de las células B. 14. El uso de la reivindicación 13, donde la enfermedad caracterizada por la producción de auto-anticuerpos es la miopatía inflamatoria idiopática, la artritis reumatoide, la artritis reumatoide juvenil, la miastenia grave, la enfermedad de Graves, la diabetes melitus de tipo I, la enfermedad de la membrana del basamento anti-glomerular, la glomerulonefritis de progreso rápido, la enfermedad de Berger (nefropatía IgA), el lupus eritematoso generalizado (LEG), la enfermedad de Crohn, la colitis ulcerativa, la púrpura trombocitopénica idiopática (PTI), el síndrome de anticuerpos anti-fosfolípidos, la neuromielitis óptica, la esclerosis múltiple, una enfermedad autoinmunitaria, la dermatomiositis, la polimiositis, o la macroglobinemia de Waldenstrom. 15. El uso de la reivindicación 13, donde la enfermedad asociada con la actividad aberrante de las células B es la leucemia linfocítica crónica (LLC), el linfoma no Hodgkins (LNH), la leucemia de las células pilosas, el linfoma linfocítico de células pequeñas, el linfoma linfoplasmacítico, el linfoma esplénico de la zona marginal, el linfoma de células B de la zona marginal extra-nodal de tipo tejido linfoide asociado a la mucosa (TLAM), el linfoma de células B de la zona marginal nodal, el linfoma folicular, el linfoma de las células del manto, el linfoma de células B grandes difuso, el linfoma de células B grandes de mediastino (tímico), el linfoma de células B grandes intravascular, el linfoma de efusión primaria, o el linfoma/leucemia de Burkitt.   206   207   208   209     211   212   213   214     216   217   218   219     221   222   223   224     226   227   228   229