ÁCIDO ARAQUIDÓNICO Y PROCEDIMIENTO DE PRODUCCIÓN Y USO DEL MISMO.

Ácido araquidónico y procedimientos de producción y uso del mismo. La presente invención se refiere a una fórmula para criaturas que contiene ácido araquidónico. El ácido araquidónico (ARA) es un ácido graso poliinsaturado (AGPI) de cadena larga de la clase omega-6 (ácido 5,8,11,14-eicosatetraenoico, es decir, 20:4). El ARA es el AGPI C20 más abundante en el cuerpo humano. Es particularmente prevalente en órganos, músculo y tejidos sanguíneos, cumpliendo un papel principal como lípido estructural asociado predominantemente con fosfolípidos en sangre, hígado, músculo y otros sistemas orgánicos principales. Además de su papel principal como lípido estructural, el ARA es también el precursor directo de varios eicosanoides circulantes tales como prostaglandina E2 (PGE2), prostaciclina I2 (PGI2), tromboxano A2 (TxA2) y leucotrienos B4 (LTB4) y C4 (LTC4). Estos eicosanoides muestran efectos reguladores sobre el metabolismo de lipoproteínas, la reología sanguínea, el tono vascular, la función leucocitaria y la activación de plaquetas. A pesar de su importancia para el metabolismo humano, el ARA no puede sintetizarse de novo en seres humanos. El ARA se sintetiza por elongación y desaturación de ácido linoleico (LOA), un ácido graso esencial. Este procedimiento requiere la presencia de la enzima 6-desaturasa, una enzima presente en el cuerpo humano a bajos niveles, Burre y col., Lipids, 25: 354-356 (1990). Por consiguiente, la mayor parte del ARA debe suministrarse en la dieta y esto es especialmente importante durante momentos de crecimiento corporal muy rápido, tales como la infancia. Durante su primer año de vida, un lactante puede duplicar o triplicar su peso. Por consiguiente, son necesarios niveles elevados de ARA en la dieta. Para satisfacer esta demanda aumentada, la leche materna humana contiene altos niveles de ARA. Sanders y col., Am. J. Clin. Nutr., 31: 805-813 (1970). El ARA es el AGPI C20 más prevalente en la leche materna. De las madres, especialmente las vegetarianas, que dan de mamar a sus criaturas, muchas se beneficiarían de ARA adicional en la dieta. Sin embargo, muchas madres no dan de mamar a sus criaturas, o no les dan de mamar durante todo el periodo de crecimiento rápido infantil, optando en su lugar por utilizar una fórmula para criaturas. Ninguna fórmula para criaturas comercial conocida por el Solicitante contiene ARA. La Patente de Estados Unidos Nº 4.670.285 (Clandinin y col.) desvela la necesidad del lactante de ácidos grasos incluyendo ARA. Para proporcionar estos ácidos grasos, Clandinin y col. sugieren una mezcla de yema de huevo, aceite de pescado o fosfolípidos de eritrocitos y aceites vegetales como el componente graso de una fórmula para criaturas propuesta. Sin embargo, el aceite de pescado contiene altas cantidades de ácido eicosapentaenoico (EPA). Se sabe que el EPA reduce la síntesis de ARA en criaturas. Carlson, y col., INFORM, 1: 306 (1990). Por lo tanto, sería deseable poder proporcionar ARA sin proporcionar también EPA adicional. Además, las yemas de huevo contienen una concentración relativamente baja de ARA, de modo que la mezcla de Clandinin y col. no es económicamente viable. Debido a que el ARA está presente en aceites animales, pero no vegetales, su producción en cantidades comerciales ha continuado siendo un objetivo deseable pero difícil de conseguir. Shinmen, y col., Microbiol. Biotech. 31: 11-16 (1989), han descrito la producción de ARA por un hongo aislado, Mortierella alpina, usando una fermentación en tanque con agitación convencional. (Véase también la Patente Japonesa 1.215.245 para Shinmen y col.). Después del cultivo, los organismos se recogen, se secan y sus lípidos se extraen de la biomasa fúngica con un disolvente orgánico y los lípidos se modifican químicamente (covalentemente). Por ejemplo, la mezcla de lípidos se hidroliza o se convierte en ésteres etílicos y después se combina con ciclodextrina antes de su uso como un complemento dietético. Shinmen y col. no desvelan ni sugieren la administración de aceites microbianos no modificados. Porphyridium cruentum, una microalga roja, puede cultivarse en estanques en grandes cantidades y tiene un contenido de lípidos que puede contener hasta el 40% de ARA. Ahern, y col. Biotech. Bioeng. 25; 1057-1070 (1983). Desgraciadamente, el ARA está principalmente asociado con galactolípidos, un lípido polar complejo no presente en la leche materna. Por lo tanto, el ARA utilizable total producido no sólo es una fracción del uno por ciento de la biomasa, sino que la forma del ARA no es adecuada para su uso como aditivo para una fórmula para criaturas sin modificaciones adicionales. La Patente de Estados Unidos Nº 4.870.011 (Suzuki y col.) desvela un procedimiento para obtener lípidos tales como ácido -linoleico a partir de hongos del género Mortierella. El ácido -linoleico se purifica a partir de la mezcla de lípidos contenidos en los hongos. El documento DE 3603000A1 (Milupa) desvela una mezcla de grasa de ácidos altamente poliinsaturados y su uso como componente graso de una fórmula para criaturas. La mezcla de grasa tiene un alto contenido de ácidos ARA y docosahexanoico (DHA) en una proporción de 2,5:1, respectivamente, así como un alto contenido de colesterol. Se enumera que son fuentes de los ácidos grasos ciertos tipos de macroalgas, aceites de pescado, grasas orgánicas de vaca y cerdo o aceite de yema de huevo altamente refinado. Se dice que son una fuente del DHA y ARA macroalgas de los tipos faecofita y rodofita. No hay sugerencias del uso de ningún microbio como fuente de aceite. Los aceites de algas y pescado también incluyen típicamente EPA, que reduce la síntesis de ARA in vivo. Además, el aceite de yema de huevo altamente refinado no es una fuente económica de ARA. Además, no hay ninguna divulgación en el 2 mismo de un aditivo concentrado en ARA para complementar una fórmula para criaturas preexistente. El documento JP 01-196255 describe el uso de ácidos grasos derivados de Mortierella en una fórmula para criaturas. En el Ejemplo 4, se lleva a cabo la fermentación de M. elongata para formar un lípido esterificado con etilo que incluye EPA y ARA en una proporción de 1:2. Por consiguiente, continúa existiendo la necesidad de un procedimiento económico, comercialmente factible, de producción de ARA, preferentemente sin la producción concomitante de EPA. Un objeto de la presente invención es satisfacer esa necesidad. Un objeto adicional de la invención es proporcionar una fórmula para criaturas de modo que los niveles de ARA en la fórmula se aproximen a los niveles en la leche materna humana. Sumario de la invención ES 2 366 101 T3 La presente invención se refiere a una fórmula para criaturas que contiene un aceite fúngico (ARASCO) que contiene ácido araquidónico. Puede hacerse referencia al aceite como aceite de una sola célula. Se cultivan hongos en condiciones de producción de aceite, se recogen y el aceite se extrae y se recupera. El aceite, sin modificaciones químicas adicionales, puede usarse directamente para proporcionar ARA complementario. Las ventajas del aceite usado en la invención incluyen su facilidad de producción y su alta pureza, y la ausencia de cantidades detectables de EPA. En particular, la presente invención proporciona una fórmula para criaturas que comprende entre 50 y 1000 mg por litro de fórmula para criaturas de un aceite fúngico (ARASCO) que contiene ácido araquidónico (ARA), en la que (i) está presente EPA en el aceite en menos de un quinto de la cantidad de ARA en el aceite, (ii) el contenido de ARA en el aceite es del 10 al 50% de los ácidos grasos en el aceite; (iii) el aceite es predominantemente un triglicérido y no está modificado; y (iv) la proporción de ARA:EPA en la fórmula para criaturas es de al menos 5:1. Descripción detallada de la realización preferida de la invención La presente invención logra proporcionar una fuente económica de ácido araquidónico (ARA). En la fórmula para criaturas de la presente invención, el EPA está presente en menos de aproximadamente un quinto de la cantidad de ARA en el aceite. Este aceite, un aceite de una sola célula, se incluye en la fórmula para criaturas en una forma no modificada. Como se usa en el presente documento, el término "no modificado" significa que las propiedades químicas de los ácidos grasos, o los propios aceites, no se han alterado covalentemente. Por lo tanto, por ejemplo, una modificación temporal en el ARASCO o ARA que pudiera revertirse después del consumo del aceite no estaría fuera del alcance de la presente invención. Tabla 1. Composición de ácidos grasos de varias especies fúngicas. Ácido graso grasa Especie 14:0 16:0 16:1 18:1 18:2 18:3 20:4 20:5 total Mortierella alpina -- 8,2 -- 33,5 16,3 23,3 13,0 -- 3,0 Mortierella elongata 2,0 13,2 -- 26,6 11,9 13,2 13,8 2,4 4,0 Mortierella... [Seguir leyendo]

1. Fórmula para criaturas que comprende entre 50 y 1000 mg por litro de fórmula para criaturas de un aceite fúngico (ARASCO) que contiene ácido araquidónico (ARA), en la que (i) EPA está presente en el aceite en menos de un quinto de la cantidad de ARA en el aceite, (ii) el contenido de ARA en el aceite es del 10 al 50% de los ácidos grasos en el aceite, (iii) el aceite es predominantemente un triglicérido y no está modificado; y (iv) la proporción de ARA:EPA en la fórmula para criaturas es de al menos 5:1. 2. Fórmula para criaturas de acuerdo con la reivindicación 1, en la que la proporción de ARA:EPA en la fórmula para criaturas es de al menos 10:1. 3. Fórmula para criaturas de acuerdo con la reivindicación 1, en la que la proporción de ARA:EPA en la fórmula para criaturas es de al menos 20:1. 4. Fórmula para criaturas de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que el ARASCO está refinado. 5. Fórmula para criaturas de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en la que el ARASCO puede obtenerse por cultivo de hongos en condiciones de producción de aceite en un medio de cultivo, recolección de dichos hongos, extracción de dicho aceite de dichos hongos recolectados y recuperación del ARASCO. 6. Fórmula para criaturas de acuerdo con la reivindicación 5, en la que el ARASCO se ha producido por Mortierella alpina y en la que la Mortierella alpina se cultiva a de 25ºC a 30ºC. 7. Fórmula para criaturas de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 6, en la que la recolección da como resultado una torta micelial, y en la que se ha eliminado cualquier agua residual de la torta antes de la extracción. 8. Fórmula para criaturas de acuerdo con la reivindicación 7, en la que se usa un disolvente no polar para extraer el ARASCO. 9. Fórmula para criaturas de acuerdo con la reivindicación 8, en la que el disolvente no polar es hexano. 10. Fórmula para criaturas de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 9, en la que la recolección da como resultado una torta micelial, y en la que la torta está suelta o prensada, desmenuzada o no desmenuzada. 11. Fórmula para criaturas de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 10, en la que el medio de cultivo contiene glucosa, melazas, jarabe de maíz de alto contenido en fructosa o almidón hidrolizado. 12. Fórmula para criaturas de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 11, en la que el medio de cultivo contiene de 10 a 100 gramos de glucosa por litro de medio de cultivo. 13. Fórmula para criaturas de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 12, en la que se añade carbono durante el transcurso del cultivo. 14. Fórmula para criaturas de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 13, en la que el medio de cultivo contiene peptona, triptona o agua de macerado de maíz. 15. Fórmula para criaturas de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 14, en la que el medio de cultivo contiene extracto de levadura a una concentración de 2 a 15 gramos por litro de medio de cultivo. 16. Fórmula para criaturas de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 15, en la que se reduce el nivel de nitrógeno durante el transcurso del cultivo. 17. Fórmula para criaturas de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 16, en la que se proporciona agitación mediante un impulsor. 8