USO DE AGONISTAS DE RECEPTORES DE 1-FOSFATO DE ESFINGOSINA (S1P) PARA EL TRATAMIENTO DE ENFERMEDADES CEREBRALES DEGENERATIVAS.

Uso de 2-amino-2-[2-(4-octilfenil)etil]propano-1,3-diol en forma libre o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la enfermedad de Pick o la aterosclerosis cerebral

La presente invención se refiere a un nuevo uso para un agonista de receptores de 1-fosfato de esfingosina (S1P), FTY720, en el tratamiento de la demencia progresiva o enfermedades cerebrales degenerativas, seleccionadas del grupo que consiste en enfermedad de Pick o aterosclerosis cerebral.

Los agonistas de receptores de S1P son compuestos que se señalan como agonistas en uno o más receptores de 1-fosfato de esfingosina, p. ej. S1P1 a S1P8. La unión de un agonista a un receptor de S1P puede dar como resultado, p. ej., la disociación de proteínas G heterotrímeras intracelulares en Gα-GTP y Gβγ-GTP, y/o una fosforilación incrementada del receptor ocupado por agonista y una activación de rutas de señalización/quinasas aguas abajo, o internalización/desensibilización de los receptores como resultado de superagonismo y por consiguiente un antagonismo de la señalización del receptor por el ligando natural S1P.

La afinidad de unión de agonistas de receptores de S1P a receptores de S1P

humanos individuales puede determinarse en el siguiente ensayo: Las actividades agonistas para receptores de S1P de los compuestos se ensayan sobre los receptores de S1P humanos S1P1, S1P3, S1P2, S1P4 y S1P5. La activación del receptor funcional se determina cuantificando la unión de GTP [γ-35S] inducida por compuesto a proteína de membrana preparada a partir de células CHO o RH7777 transfectadas que expresan establemente el receptor de S1P humano apropiado. La tecnología de ensayo usada es SPA (ensayo de centelleo basado en la proximidad, por sus siglas en inglés). Brevemente, compuestos disueltos en DMSO se diluyen en serie y se añaden a una cuenta de SPA (Amersham-Pharmacia) inmobilizada en proteína de membrana que expresa receptor de S1P (10-20 µg/pocillo) en presencia de Hepes 50 mM, NaCl 100 mM, MgCl2 10 mM, GDP 10 µM, 0,1% de BSA libre de grasa y GTP[γ-35S] 0,2 nM (1200 Ci/mmol). Después de la incubación en placas de microvaloración de 96 pocillos a TA durante 120 min, el GTP [γ-35S] no unido se separa mediante una etapa de centrifugación. La luminiscencia de cuentas de SPA activadas por GTP [γ-35S] unido a la membrana se cuantifica con un lector de placas TOPcount (Packard). Las EC50 se calculan usando un software de ajuste de curvas estándar. En este ensayo, los agonistas de receptores de S1P tienen preferiblemente una afinidad de unión al receptor de S1P < 50 nM. La internalización y la desensibilización de receptores de S1P se determina

usando, p. ej., células de ovario de hámster chino (CHO, por sus siglas en inglés) transfectadas con un receptor de S1P humano etiquetado con myc. La internalización del receptor como resultado de la estimulación por agonistas se determina mediante análisis de FACS usando anticuerpos anti-myc marcados fluorescentemente.

Los agonistas de receptores de S1P son, p. ej., compuestos que, además de sus propiedades de unión a S1P, también tienen propiedades de guiado (“homing”) acelerado de linfocitos, p. ej. compuestos que provocan una linfopenia resultante de una redistribución, preferiblemente reversible, de linfocitos desde la circulación hasta tejido linfático secundario, sin generar una inmunosupresión generalizada. Las células simples son secuestradas; las células T y las células B CD4 y CD8 de la sangre son estimuladas para migrar a los nódulos linfáticos (LN, por sus siglas en inglés) y los parches de Peyer (PP).

La propiedad de guiado de linfocitos puede medirse en el siguiente ensayo de

agotamiento de linfocitos sanguíneos: Un agonista de receptor de S1P o el vehículo se administra oralmente mediante sonda a ratas. Se obtiene sangre de la cola para el control hematológico el día -1 para dar los valores individuales de la línea de base, y a las 2, 6, 24, 48 y 72 horas después de la aplicación. En este ensayo, el agonista de receptor de S1P agota los linfocitos de sangre periférica, p. ej. en 50%, cuando se administra en una dosis de, p. ej. < 20 mg/kg. Agonistas de receptores de S1P preferidos son compuestos adicionales que además de sus propiedades de unión a S1P internalizan/desensibilizan los receptores de S1P, antagonizando se ese modo procesos inflamatorios conducidos por lisofosfolípidos, incluyendo, p. ej. 1-fosfato de esfingosina (S1P), esfingofosforilcolina (SPC), ácido lisofosfatídico (LPA) y otros, sobre células de la vasculatura, p. ej. células endoteliales. La capacidad de internalización/desensibilización de los compuestos se determinará usando células CHO transfectadas con receptor de S1P etiquetado con myc humano.

Ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales con ácidos inorgánicos, tales como hidrocloruro, hidrobromuro y sulfato, sales con ácidos orgánicos, tales como sales de acetato, fumarato, maleato, benzoato, citrato, malato, metanosulfonato y bencenosulfonato, o, cuando sea apropiado, sales con metales tales como sodio, potasio, calcio y aluminio, sales con aminas, tales como trietilamina, y sales con aminoácidos dibásicos, tales como lisina. Los compuestos y las sales de la

10 combinación de la presente invención abarcan formas de hidrato y solvato. El agonista de receptor de S1P usado en la presente invención es FTY720, es decir, 2-amino-2-[2-(4-octilfenil)etil]propano-1,3-diol en forma libre o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable (denominado en lo sucesivo en la presente memoria Compuesto A), p. ej. el hidrocloruro, según se muestra:

**(Ver fórmula)**

Las enfermedades cerebrales degenerativas se están haciendo más comunes en las naciones desarrolladas a medida que la población incluye cada vez más personas ancianas. No se conoce la causa de las enfermedades. No se sabe por qué algunas personas presentan demencia tan pronto como a los 30 ó 40 años de edad mientras que otras no la presentan hasta que tienen 70 u 80. La enfermedad de Alzheimer es una enfermedad degenerativa progresiva del cerebro caracterizada por el comienzo pernicioso de demencia. El deterioro de la memoria, el juicio, la duración de la atención y las habilidades para resolver problemas es seguido por una pérdida global de las capacidades cognitivas. Sigue existiendo una necesidad médica de agentes que sean eficaces en el tratamiento de tales enfermedades y trastornos, p. ej. para reducir

o prevenir la progresión de la enfermedad y/o aliviar los síntomas y/o mejorar la calidad de vida. WO03/094965 menciona el uso de agonistas de SP1, tales como péptidos,

moléculas pequeñas, anticuerpos o aficuerpos, para reducir los síntomas de trastornos 30 neurológicos, tales como trastornos neurodegenerativos, incluyendo, p. ej., enfermedad de Alzheimer, demencia por infarto múltiple y demencia de los cuerpos de Lewy.

US6004565A describe compuestos que tienen propiedades inmunosupresoras del guiado acelerado de linfocitos, tales como compuestos de 2-aminopropano-1,3diol y en particular 2-amino-2-[2-(4-octilfenil)etil]propano-1,3-diol, y menciona el uso de tales compuestos en la prevención y el tratamiento de una larga lista de enfermedades, incluyendo la amiloidosis.

EP0812588A menciona la preparación externa para administración tópica que contiene 2-amino-2-[2-(4-octilfenil)etil]propano-1,3-diol como ingrediente activo. EP0 8 125 8 8A describe que este compuesto puede usarse en la prevención y el tratamiento de una larga lista de enfermedades, incluyendo la amiloidosis.

Se ha encontrado ahora que los agonistas de receptores de S1P tienen propiedades interesantes que los hacen útiles para tratar demencia progresiva y degeneración cerebral.

De acuerdo con los hallazgos particulares de la presente invención, se proporciona:

1. El uso de una cantidad terapéuticamente eficaz de un agonista de receptor de 1-fosfato de esfingosina (S1P) seleccionado de 2-amino-2-[2-(4ºctilfenil)etil]propano-1,3-diol o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la enfermedad de Pick o la aterosclerosis cerebral.

2. Un agonista de receptor de 1-fosfato de esfingosina (S1P), seleccionado del compuesto A o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para el uso en la preparación de una composición farmacéutica para el uso que se define bajo 1 anteriormente.

3. Una composición farmacéutica para el uso que se define bajo 1 anteriormente, que comprende un agonista de receptor de 1-fosfato de esfingosina (S1P) seleccionado del compuesto A o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo junto con uno o más diluyentes o portadores farmacéuticamente...

1. Uso de 2-amino-2-[2-(4-octilfenil)etil]propano-1,3-diol en forma libre o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la enfermedad de Pick o la aterosclerosis cerebral.

2. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que se usa la sal de hidrocloruro de 2-amino-2-[2-(4-octilfenil)etil]propano-1,3-diol.