Antagonista de proteína 4 de tipo angiopoyetina (ANGPTL4), para su uso en un procedimiento de bloqueo o reducción del crecimiento de tumores o el crecimiento de una célula cancerosa en un sujeto,

comprendiendo dicho procedimiento:

a) administrar al tumor o las células cancerosas una cantidad efectiva de un agente contra el cáncer, y

b) administrar al tumor o a las células cancerosas una cantidad efectiva de un antagonista de ANGPTL4,

en donde las cantidades efectivas combinadas bloquean o reducen el crecimiento del tumor o el crecimiento de la célula cancerosa

Inhibidores de proteína 4 de tipo angiopoyetina, combinaciones y su utilización.

Campo de la invención

Esta invención se refiere en general al tratamiento de enfermedades humanas y condiciones patológicas, como el cáncer. La invención se refiere a inhibidores de la proteína 4 de tipo angiopoyetina (ANGPTLA) y combinaciones de y a inhibidores de ANGPTL4 con otros agentes terapeúticos y procedimientos de utilización de tales composiciones para el diagnóstico y tratamiento de enfermedades o condiciones patológicas.

Antecedentes de la invención

El cáncer es una causa principal de muerte en los Estados Unidos. Se han utilizado varios tipos de terapias para tratar el cáncer. Por ejemplo, los procedimientos quirúrgicos se usan para eliminar los tejidos cancerosos o muertos. La radioterapia, que trabaja mediante la reducción de los tumores sólidos, y la quimioterapia, que mata células en rápida división, se utilizan como terapias para el cáncer.

En 1971, Folkman propuso que la anti-angiogénesis podría ser una estrategia eficaz contra el cáncer. Folkman, N. Engl. J. Med 285, 1182-1186 (1971). La angiogénesis es el desarrollo de nuevo tejido vascular a partir de los vasos sanguíneos preexistentes y/o de células madre endoteliales en circulación (véase, por ejemplo, Ferrara y Alitalo, Nature Medicine 5(12)1359-1364 (1999)). La angiogénesis es una cascada de procesos que consiste en 1) la degradación de la matriz extracelular de un sitio local después de la liberación de la proteasa, 2) la proliferación de células endoteliales capilares, y 3) la migración de los túbulos capilares hacia el estímulo angiogénico. Ferrara et al. Endocrine Rev. 13:18-32 (1992).

El crecimiento de nuevos vasos sanguíneos es un requisito previo durante los procesos fisiológicos normales del desarrollo embrionario y postnatal, por ejemplo, la embriogénesis, la cicatrización de heridas y la menstruación. Véase, por ejemplo, Folkman y Klagsbrun Science 235:442-447 (1987). Esa proliferación de nuevos vasos sanguíneos a partir de capilares pre-existentes, juega además un papel clave en el desarrollo patológico de una variedad de trastornos, incluyendo pero no limitándose a, por ejemplo, tumores, retinopatías proliferativas, degeneración macular relacionada con la edad, psoriasis, inflamación, diabetes, y artritis reumatoide (AR). Véase, por ejemplo, Ferrara, Recent Prog. Horm. Res. 55:15-35 (2000), discusión 35-6.

En vista de la notable importancia fisiológica y patológica de la angiogénesis, se ha dedicado mucho trabajo a la elucidación de los factores capaces de regular este proceso. Se sugiere que el proceso de angiogénesis es regulado por un equilibrio entre moléculas pro y anti-angiogénicas, y se transformó en diversas enfermedades, especialmente el cáncer. Véase, por ejemplo, Carmeliet y Jain Nature 407:249-257 (2000).

Por ejemplo, la angiogénesis es dependiente de factores secretados como factor de crecimiento endotelial vascular A (VEGF, también conocido como factor de permeabilidad vascular (VPF)) y el factor de crecimiento de fibroblastos (FGF). Véase, por ejemplo, Ferrara y Davis-Smyth Endocrine Rev. 18:4-25 (1997), y, Ferrara J. Mol. Med. 77:527-543 (1999). Además de ser un factor angiogénico en la angiogénesis y vasculogénesis, el VEGF, como un factor de crecimiento pleiotrópico, exhibe múltiples efectos biológicos en otros procesos fisiológicos, como la supervivencia de células endoteliales, permeabilidad de los vasos y la vasodilatación, la quimiotaxis de los monocitos y flujo de entrada de calcio. Ferrara y Davis-Smyth (1997), supra. Además, los estudios han reportado efectos mitógenos del VEGF en algunos pocos tipos de células no endoteliales, como las células del epitelio pigmentario de la retina, células de los conductos pancreáticos y células de Schwann. Véase, por ejemplo, Guerin et al. J. Cell Physiol. 164:385-394 (1995); Oberg-Gales et al. Mol. Cell. Endocrinol. 126:125-132 (1997), y, Sondell et al. J. Neurosci. 19:5731-5740 (1999).

El VEGF pertenece a una familia de genes que incluye el factor de crecimiento placentario (PIGF), VEGF-B, VEGF-C, VEGF-D y VEGF-E. Éstos ligandos se unen a y ligan a los receptores de la tirosina quinasa expresados en las células endoteliales. Por ejemplo, la familia del receptor tirosina quinasa VEGF incluye Flt1 (VEGF-R1) (que une ligandos VEGF, VEGF-B y PIGF), Flk1/KDR (VEGF-R2) (que une VEGF, VEGF-C, VEGF-D, y, VEGF-E), y FLT4 (VEGF-R3) - (que se une VEGF-C y VEGF-D). Véase, por ejemplo, Ferrara et al., Nature Medicine.9(6):669-676 (2003), y, Robinson & Stringer, Journal of Cell Science, 114(5):853-65 (2001).

Las angiopoyetinas son otro grupo de factores de crecimiento para el endotelio vascular. Véase, por ejemplo, Davis et al., Cell, 87:1161-1169 (1996); Suri et al., Cell, 87:1171-1180 (1996); Maisonpierre et al. Science 277:55-60 (1997), y Valenzuela et al., Proc. Natl. Acad. EE.UU. 96:1904-1909 (1999). Angiopoyetinas parecen funcionar de manera complementaria y coordinada con VEGF, donde el VEGF actúa en el desarrollo vascular, mientras que angiopoyetinas actúan más probablemente mediante la modulación de la remodelación, maduración y estabilización de la vasculatura. Véase, e.g, Holash et al., Oncogene 18:5356-5362 (1999). Angiopoyetina 1, angiopoyetina 2, angiopoyetina 3 y angiopoyetina 4 se unen a los receptores tirosina quinasa Tie2 (también conocidos como Tek), que son receptores que se encuentran en las células endoteliales. Véase, por ejemplo, Ward & Dumont, Seminars in Cell & Developmental Biology, 13:19-27 (2002). Hay también un receptor huérfano de Tiel.

La angiogénesis no sólo depende de factores de crecimiento, sino que también está influenciada por las moléculas de adhesión celular (CAMs), incluyendo las integrinas, uniéndose a sus ligandos presentes en la matriz extracelular. Véase, por ejemplo, Ferrara y Alitalo, Nature Medicine 5(12)1359-1364 (1999), y, Carmeliet, Nature Medicine, 6(3):389-395 (2000). Las integrinas facilitan la adhesión celular y la migración de las proteínas de la matriz extracelular en los espacios intercelulares y las membranas basales. La familia de las integrinas de las proteínas de adhesión celular se compone de al menos 18 subunidades a y 8 ß que se expresan en al menos 22 combinaciones heterodiméricas aß. Véase, por ejemplo, Byzova et al., Mol. Cell., 6(4):851-860 (2000), y, Hood y Cheresh, Nature Reviews, 2:91-99 (2002). Entre estos, por lo menos seis (a_vß₃, a_vß₅, a₅ß₁, a₂ß₁, a_vß₁ y a₁ß₁) de las combinaciones han sido implicadas en la angiogénesis (véase, por ejemplo, Hynes y Bader, Thromb. Haemost., 78 (1):83-87 (1997), y, Hynes et al., Braz. J. Med. Biol Res., 32 (5):501-510 (1999)). La inactivación de diferentes genes que codifican receptores de adhesión específicos o la administración de anticuerpos bloqueantes en modelos animales ha tenido profundos efectos en la respuesta angiogénica de las células endoteliales. Véase, por ejemplo, Elicieri y Cheresh, Mol. Med., 4:741-750 (1998).

Estas moléculas han sido objetivo de las terapias del cáncer. Por ejemplo, el reconocimiento de VEGF como regulador primario de la angiogénesis en condiciones patológicas ha conducido a numerosos intentos de bloquear las actividades de VEGF. Anticuerpos receptores anti-VEGF inhibidores, construcciones solubles, estrategias antisentido, aptámeros ARN contra el VEGF e inhibidores quinasa tirosina receptor VEGF de bajo peso molecular (RTK) han sido propuestos para su uso en la interferencia de la señalización VEGF. Véase, por ejemplo, Siemeister et al. Cancer Metastasis Rev. 17:241-248 (1998). Anticuerpos neutralizantes anti-VEGF han demostrado que inhiben el crecimiento de una variedad de líneas celulares de tumores humanos en ratones nude (Kim et al. Nature 362:841-844 (1993); Warren et al. J. Clin. Invest. 95:1789-1797 (1995); Borgstrom et al. Cancer Res. 56:4032-4039 (1996), y Melnyk et al. Cancer Res. 56:921-924 (1996)) y también inhibir la angiogénesis intraocular en los modelos de trastornos de isquemia de la retina (Adamis et al. Arco. Ophthalmol. 114:66-71 (1996)). De hecho, un anticuerpo anti-VEGF humanizado, bevacizumab (Avastin®, Genentech) ha sido aprobado por la FDA de los EE.UU. como tratamiento de primera línea para el cáncer colorrectal metastásico. Ver,...

1. Antagonista de proteína 4 de tipo angiopoyetina (ANGPTL4), para su uso en un procedimiento de bloqueo o reducción del crecimiento de tumores o el crecimiento de una célula cancerosa en un sujeto, comprendiendo dicho procedimiento:

a) administrar al tumor o las células cancerosas una cantidad efectiva de un agente contra el cáncer, y

b) administrar al tumor o a las células cancerosas una cantidad efectiva de un antagonista de ANGPTL4,

en donde las cantidades efectivas combinadas bloquean o reducen el crecimiento del tumor o el crecimiento de la célula cancerosa.

2. Antagonista de ANGPTL4, para su uso en un procedimiento de bloqueo o reducción del crecimiento de un tumor o el crecimiento de una célula cancerosa en un sujeto, comprendiendo dicho procedimiento:

administrar al sujeto una composición de combinación que comprende una cantidad efectiva de agente anti-angiogénesis y una cantidad efectiva de un antagonista de proteína 4 de tipo angiopoyetina (ANGPTL4), en el que las cantidades efectivas combinadas bloquean o reducen el crecimiento del tumor o el crecimiento de la células cancerosa.

3. Antagonista de ANGPTL4, para su uso en un procedimiento de bloqueo o reducción de una recaída del crecimiento de un tumor o una recaída del crecimiento de células cancerosas en un sujeto, comprendiendo el procedimiento:

administrar al sujeto una cantidad efectiva del antagonista de ANGPTL4, en donde el sujeto estaba o está al mismo tiempo en tratamiento de cáncer con un agente contra el cáncer; y

en donde la administración de la cantidad efectiva del antagonista de ANGPTL4 bloquea o reduce la recaída del crecimiento del tumor o la recaída del crecimiento de las células cancerosas.

4. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 3, en el que el agente contra el cáncer es uno o más agentes quimioterapéuticos.

5. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 1 o la reivindicación 3, en el que el agente contra el cáncer cuenta con un agente anti-angiogénesis.

6. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 1 o la reivindicación 3, en el que el agente contra el cáncer comprende un agente anti-angiogénesis y en el que el agente anti-angiogénesis es un antagonista de VEGF o inhibidor de anti-VEGF, respectivamente.

7. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 6, en el que el antagonista de VEGF o un inhibidor de anti-VEGF es un anticuerpo anti-VEGF.

8. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 7, en el que el anticuerpo anti-VEGF es A4.6.1 humanizado.

9. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 1 o la reivindicación 3, en el que el antagonista de ANGPTL4 es un anticuerpo anti-ANGPTL4.

10. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 1, en el que el antagonista de ANGPTL4 es un anticuerpo anti-ANGPTL4 y en el que el anticuerpo anti-ANGPTL4 se une a ANGPTL4 (184-406).

11. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 1 o la reivindicación 3, en el que el antagonista de ANGPTL4 es un anticuerpo anti-a_vß₅.

12. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 7, 9 u 11, en el que el anticuerpo es un anticuerpo humanizado.

13. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 1 o la reivindicación 3, en el que el antagonista de ANGPTL4 comprende una molécula de SiARN.

14. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 13, en el que la molécula de SiARN es una molécula de ANGPTL4-SiARN.

15. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 14, en donde la molécula de ANGPTL4-SiARN marca una secuencia de ADN de un ácido nucleico que codifica ANGPTL4, en el que la secuencia de ADN comprende, al menos GTGGCCAAGCCTGCCCGAAGA (SEC ID NO. 3).

16. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 1, en el que el procedimiento también comprende administrar al tumor o la célula cancerosa un tercer agente contra el cáncer.

17. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 16, en el que el tercer agente contra el cáncer es un agente quimioterapéutico.

18. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 16, en el que el tercer agente contra el cáncer es otro inhibidor de la angiogénesis.

19. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 1, en el que las etapas de administración (a) y (b) se realizan de forma secuencial.

20. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 1, en el que las etapas de administración (a) y (b) se realizan simultáneamente.

21. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 1, en el que las etapas de administración (a) y (b) se realizan tanto en forma secuencial como simultáneamente.

22. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 1, en el que las etapas de administración se realizan en cualquier orden.

23. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 1, en el que el sujeto es un humano.

24. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 1, en el que el sujeto tiene una recaída en el crecimiento del tumor o una recaída en el crecimiento de las células cancerosas.

25. Antagonista de ANGPTL4 según la reivindicación 2, o la reivindicación 3, en el que el procedimiento también comprende la administración de un agente adicional, en el que el agente adicional es un agente contra el cáncer.

26. Antagonista de ANGPTL4, para su uso en un procedimiento de bloqueo o reducción del crecimiento de un tumor o el crecimiento de una célula cancerosa, comprendiendo el procedimiento la administración al tumor o a la célula cancerosa de una cantidad efectiva de un antagonista de proteína 4 de tipo angiopoyetina (ANGPTL4), en el que el antagonista de ANGPTL4 es un anticuerpo que se une a ANGPTL4 (184-406) y en el que la cantidad efectiva bloquea o reduce el crecimiento del tumor o el crecimiento de la célula cancerosa.

27. Utilización de un antagonista de ANGPTL4 en la fabricación de un medicamento para su utilización en el tratamiento del cáncer, en el que el antagonista de ANGPTL4 y el tratamiento son como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26.

28. Procedimiento de bloqueo o reducción del crecimiento de una célula cancerosa, no realizada sobre el cuerpo humano o animal, comprendiendo dicho procedimiento:

a) administrar a la célula cancerosa una cantidad efectiva de un agente contra el cáncer, y

b) administrar a la célula cancerosa una cantidad efectiva de un antagonista de proteína 4 de tipo angiopoyetina (ANGPTL4),

en donde las cantidades efectivas combinadas bloquean o reducen el crecimiento de la célula cancerosa.

29. Procedimiento según la reivindicación 28, en el que el agente contra el cáncer es como se define en cualquiera de las reivindicaciones 5 a 8 y 12.

30. Procedimiento según la reivindicación 28, en el que el antagonista de ANGPTL4 es como se define en cualquiera de las reivindicaciones 9 a 15.

31. Procedimiento según la reivindicación 28, que también comprende la administración de un tercer agente contra el cáncer, según se definen en cualquiera de las reivindicaciones 16 a 18.

32. Procedimiento según la reivindicación 28, en el que las etapas de administración se realizan como se define en cualquiera de las reivindicaciones 19 a 22.

33. Procedimiento de bloqueo o reducción del crecimiento de una célula cancerosa, comprendiendo el procedimiento la administración a la célula cancerosa de una cantidad efectiva de un antagonista de proteína 4 de tipo angiopoyetina (ANGPTL4), en el que el antagonista de ANGPTL4 es un anticuerpo que se une a ANGPTL4 (184-406) y en el que la cantidad efectiva bloquea o reduce el crecimiento de la célula cancerosa, no realizándose dicho procedimiento en el cuerpo humano o animal.

34. Composición que comprende un anticuerpo que se une a ANGPTL4 (184-406) y un antagonista de VEGF.

35. Composición que comprende una molécula de ANGPTL4-SiARN, en el que la molécula de ANGPTL4-SiARN marca una secuencia de ADN de un ácido nucleico que codifica ANGPTL4, en el que la secuencia de ADN comprende al menos GTGGCCAAGCCTGCCCGAAGA (SEC ID NO. 3).

36. Equipo que comprende una primera cantidad de un agente anti-angiogénesis, una segunda cantidad de un antagonista de proteína 4r de tipo angiopoyetina (ANGPTL4) y un portador, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable, y un contenedor.

37. Equipo que comprende una cantidad de un agente anti-angiogénesis y un portador, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable en una primera forma de dosificación de unidad; una cantidad de un antagonista de proteína 4 de tipo angiopoyetina (ANGPTL4) y un portador, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable en una segunda forma de dosificación de unidad, y un contenedor.