ENSAYO PARA LA DETECCION DE GENES PARA MEJORAR LA PROBABILIDAD DE UNA RESPUESTA EFICAZ A UNA TERAPIA CONTRA EL CANCER BASADA EN ANTAGONISTAS DE ERBB.

Uso de un antagonista de ErbB que es un anticuerpo anti-proteína HER2 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento del cáncer en un sujeto,

en el que el sujeto es un sujeto en el que se ha observado que el gen her2 está amplificado en células tumorales en una muestra de tejido procedente del sujeto y las células tumorales del sujeto tienen un nivel de expresión de HER2 de 0 ó 1+ por inmunohistoquímica en una muestra de tejido fijada en formaldehído

Ensayo para la detección de genes para mejorar la probabilidad de una respuesta eficaz a una terapia contra el cáncer basada en antagonistas de ErbB.

Campo de la invención

La presente invención se refiere al tratamiento de cánceres caracterizados por la sobreexpresión de antígeno tumoral, el HER2. Más específicamente, la invención se refiere a un tratamiento más eficaz de pacientes humanos susceptibles a o diagnosticados con cáncer, en los que las células tumorales sobreexpresan HER2 tal y como se determina mediante el ensayo de amplificación génica, con un antagonista de ErbB, un anticuerpo anti-HER2. La invención proporciona adicionalmente envases farmacéuticos para ese tratamiento.

Antecedentes de la invención

Los avances en la comprensión de la genética y los desarrollos en tecnología y epidemiología han permitido la correlación de anomalías genéticas con ciertas enfermedades malignas, así como la valoración del riesgo de que un individuo desarrolle ciertas enfermedades malignas. No obstante, la mayoría de las metodologías disponibles para la evaluación de tejido buscando la presencia de genes asociados o que predisponen a un individuo a una enfermedad maligna tienen inconvenientes muy conocidos. Por ejemplo, los procedimientos que requieren la disgregación del tejido, tales como los análisis de transferencia de Southern, Northern, o Western, se vuelven menos precisos por la dilución de las células malignas en las células normales o no malignas que están presentes en el mismo tejido. Además, la pérdida de la arquitectura tisular resultante anula la capacidad de correlacionar las células malignas con la presencia de anomalías genéticas en un contexto que permita una especificidad morfológica. Este asunto es particularmente problemático en tipos tisulares que se sabe son heterogéneos, tales como en el carcinoma de mama humano, en el que un porcentaje significativo de las células presentes en cualquier área puede ser no maligno.

El gen her2/neu codifica un producto proteico, a menudo identificado como p185HER2. La proteína p185HER2 nativa es una molécula similar a un receptor de membrana con homología al receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR). La amplificación y sobreexpresión de HER2 en cáncer de mama humano se ha correlacionado con un intervalo libre de enfermedad más corto y una supervivencia general más corta en algunos estudios (van de Vijer y col. New Eng. J. Med. 317:1239 (1988); Walker y col. Br. J. Cancer 60:426 (1989); Tandon y col. J. Clin. Invest. 7:1120 (1989); Wright y col. Cancer Res. 49:2087 (1989); McCann y col. Cancer Res 51:3296 (1991); Paterson y col. Cancer Res. 51:556 (1991); y Winstanley y col. Br. J. Cancer 63:447 (1991)) pero no en otros (Zhou y col. Oncogene 4:105 (1989); Heintz y col. Arch Path Lab Med 114:160 (1990); Kury y col. Eur. J. Cancer 26:946 (1990); Clark y col. Cancer Res. 51:944 (1991); y Ravdin y col. J. Clin. Oncol. 12:467-74 (1994)).

En una evaluación inicial de 103 pacientes con cáncer de mama, aquéllos que tenían más de tres nódulos linfáticos axilares positivos en células tumorales (nódulos positivos) tenían más probabilidades de sobreexpresar la proteína HER2 que pacientes con menos de tres nódulos positivos (Slamon y col. Science 235:177 (1987)). En una evaluación posterior de 86 pacientes de cáncer de mama con nódulos positivos, había una correlación significativa entre el grado de amplificación génica, una recaída temprana, y una supervivencia corta. La sobreexpresión de HER2 se determinó usando análisis de transferencia de Southern y Northern, que se correlaciona con la expresión de la oncoproteína HER2 evaluada por análisis de transferencia de Western e inmunohistoquímica (IHC) (Slamon y col. Science 235: 177 (1987); Slamon y col. Science 244: 707 (1989)). Se encontró que el período de supervivencia media era aproximadamente cinco veces más corto en pacientes con más de cinco copias del gen her2 que en pacientes sin amplificación génica. Esta correlación estaba presente incluso después de la corrección para el estatus nodal y otros factores pronósticos en análisis multivariados. Estos estudios se extendieron a 187 pacientes con nódulos positivos e indicaron que la amplificación génica, las cantidades incrementadas de ARNm (determinadas por análisis de transferencia de Northern), y la expresión incrementada de proteína (determinada inmunohistoquímicamente) también estaban correlacionadas con un tiempo de supervivencia acortado (Slamon y col. Science 244:707 (1989)); (véase también patente de EE.UU. 4.968.603). Nelson y col. han comparado la amplificación del gen her2/neu usando FISH con sobreexpresión determinada inmunohistoquímicamente en cáncer de mamá (Nelson y col. Modem Pathology 9 (1) 21A (1996)).

La tinción inmunohistoquímica de secciones de tejido ha demostrado ser un procedimiento fiable para la valoración de la alteración de proteínas en tejido heterogéneo. Las técnicas inmunohistoquímicas (IHC) utilizan un anticuerpo para sondear y visualizar antígenos celulares in situ, generalmente mediante procedimientos cromogénicos o fluorescentes. Esta técnica sobresale debido a que evita los efectos no deseados de la disgregación y permite la evaluación de células individuales en el contexto de la morfología. Además, la proteína diana no es alterada por los procesos de congelación.

No obstante, en el ensayo clínico (CTA), la IHC de muestras tisulares fijadas con formaldehído y embebidas en parafina sólo demostraron una sensibilidad del 50%-80%, en relación a muestras IHC congeladas (Press, Cancer Research 54:2771 (1994)). Así, la IHC puede dar lugar a resultados de falso negativo, excluyendo del tratamiento a pacientes que se podrían beneficiar del tratamiento.

La hibridación in situ fluorescente (FISH) es un procedimiento desarrollado recientemente para valorar directamente la presencia de genes en células intactas. La FISH es un medio atractivo para evaluar tejido embebido en parafina para la presencia de una enfermedad maligna debido a que proporciona especificidad celular, mientras supera los problemas de entrecruzamiento y otros efectos que alteran la proteína provocados por la fijación en formalina. La FISH históricamente se ha combinado con metodologías de tinción clásicas en un intento de correlacionar anomalías genéticas con la morfología celular (véase, por ejemplo, Anastasi y col., Blood 77:2456-2462 (1991); Anastasi y col., Blood 79:1796-1801 (1992); Anastasi y col., Blood 81:1580 1585 (1993); van Lom y col., Blood 82:884-888 (1992); Wolman y col., Diagnostic Molecular Pathology 1(3): 192-199 (1992); Zitzelberger, Journal of Pathology 172:325-335 (1994)).

Hasta la fecha, no se ha producido una correlación entre la amplificación del gen her2 y un resultado en el tratamiento con un anticuerpo anti-HER2, sólo con el pronóstico de la enfermedad. El ensayo estándar ha sido la IHC sobre muestras fijadas con formalina y embebidas en parafina. Estas muestras, cuando tienen una puntuación de 3+ o 2+, identifican a pacientes que probablemente se beneficiarían del tratamiento con un anticuerpo anti-HER2, como el Herceptin®. Las puntuaciones de 3+ y 2+ se correlacionan con la amplificación del gen her2, por ejemplo, tal y como se somete a ensayo con FISH. No obstante, aún existe la necesidad de una identificación de candidatos más eficaz para terapias con éxito con el antagonista de ErbB, tal como el tratamiento con Herceptin®. El documento WO 99/31140 describe el uso médico de un anticuerpo anti-ErbB2 para el tratamiento de trastornos caracterizados por la sobreexpresión de ErB2, incluyendo el cáncer de mama. Se describe que los criterios de elección para pacientes con cáncer de mama metastático incluyen la sobreexpresión del oncogen ErbB2 (HER2) (2+ a 3+ según se determina mediante inmunohistoquímica o hibridación in situ fluorescente (FISH)).

Resumen de la invención

La invención proporciona la materia objeto de las reivindicaciones.

La invención se refiere al incremento de la probabilidad de la eficacia de un tratamiento del cáncer con un antagonista de ErbB. Un procedimiento que comprende la administración de una dosis para el tratamiento del cáncer del antagonista de ErbB a un sujeto en el que se ha encontrado que está amplificado un gen erbB en células tumorales en una muestra de tejido procedente del sujeto. El ErbB es HER2. El procedimiento puede comprender adicionalmente la administración de una dosis para el tratamiento del cáncer de un agente quimioterapéutico, particularmente un taxol.

La invención proporciona el incremento de la probabilidad...

1. Uso de un antagonista de ErbB que es un anticuerpo anti-proteína HER2 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento del cáncer en un sujeto, en el que el sujeto es un sujeto en el que se ha observado que el gen her2 está amplificado en células tumorales en una muestra de tejido procedente del sujeto y las células tumorales del sujeto tienen un nivel de expresión de HER2 de 0 ó 1+ por inmunohistoquímica en una muestra de tejido fijada en formaldehído.

2. Uso según la reivindicación 1, en el que el cáncer es cáncer de mama.

3. Uso según la reivindicación 1, en el que el anticuerpo es el anticuerpo monoclonal humanizado recombinante rhuMAb 4D5-8.

4. Uso según la reivindicación 1, en el que la amplificación del gen her2 se detecta detectando la fluorescencia de una sonda de ácido nucleico marcada por fluorescencia hibridada al gen.

5. Uso según la reivindicación 1, en el que el medicamento es para su administración en un método de tratamiento que comprende adicionalmente el tratamiento del cáncer con una dosis de un fármaco quimioterapéutico.

6. Uso según la reivindicación 5, en el que el fármaco quimioterapéutico es un taxoide.

7. Procedimiento para identificar a un paciente predispuesto a responder de manera favorable a un antagonista de ErbB para el tratamiento del cáncer, en el que el antagonista de ErbB es un anticuerpo anti-proteína HER2, cuyo procedimiento comprende la detección de la amplificación del gen her2 en células tumorales en una muestra de tejido procedente del paciente, en el que las células tumorales del paciente tienen un nivel de expresión de HER2 de 0 ó 1+ por inmunohistoquímica en una muestra de tejido fijada en formaldehído.

8. Antagonista de ErbB para su uso en un método para el tratamiento del cáncer en un sujeto, en el que el antagonista de ErbB es un anticuerpo anti-proteína HER2, en el que el sujeto es un sujeto en el que se ha observado que el gen her2 está amplificado en células tumorales en una muestra de tejido procedente del sujeto y las células tumorales del sujeto tienen un nivel de expresión de HER2 de 0 ó 1+ por inmunohistoquímica en una muestra de tejido fijada en formaldehído.

9. Antagonista de ErbB según la reivindicación 8, en el que el cáncer es cáncer de mama.

10. Antagonista de ErbB según la reivindicación 8, en el que el anticuerpo es el anticuerpo monoclonal humanizado recombinante rhuMAb 4D5-8.

11. Antagonista de ErbB según la reivindicación 8, en el que la amplificación del gen her2 se detecta detectando la fluorescencia de una sonda de ácido nucleico marcada por fluorescencia hibridada al gen.

12. Antagonista de ErbB según la reivindicación 8, en el que el procedimiento comprende adicionalmente el tratamiento del cáncer con una dosis de un fármaco quimioterapéutico.

13. Antagonista de ErbB según la reivindicación 12, en el que el fármaco quimioterapéutico es un taxoide.