Un método para eliminar células neoplásicas mediadas por ras de una composición celular que se sospecha que contiene dichas células neoplásicas,

comprendiendo dicho método poner en contacto la composición celular con reovirus en condiciones que provoquen la oncolisis de las células neoplásicas mediadas por ras

Eliminación con reovirus de células neoplásicas mediadas por ras de composiciones celulares mixtas.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a un método para eliminar células neoplásicas mediadas por ras de composiciones celulares mixtas infectando las composiciones celulares mixtas con reovirus que lisan selectivamente las células neoplásicas mediadas por ras en las composiciones.

Referencias

Patente de Estados Unidos Nº 6.136.307.

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Antecedentes de la invención

Normalmente, la proliferación celular está regulada tanto por señales promotoras del crecimiento como por señales que inhiben el crecimiento. Estos dos tipos de señales para cada célula normalmente llegarían a un equilibrio de un modo que refleja la necesidad del cuerpo por la célula particular. Si una célula falla en la respuesta las señales que inhiben en crecimiento o responde en exceso a las señales promotoras del crecimiento, proliferaría de forma anormalmente rápida (mencionada como célula neoplásica) y finalmente puede desarrollar un cáncer, un neoplasma maligno.

La quimioterapia, un método actual para tratar el cáncer, se basa en líneas generales en la propiedad de rápida proliferación de las células cancerosas. Como las células cancerosas proliferan rápidamente, son más sensibles a fármacos que inhiben la proliferación celular. En teoría, eligiendo cuidadosamente la dosificación de los fármacos quimioterapéuticos, se puede inhibir la proliferación de las células cancerosas sin dañar seriamente las células normales. Sin embargo, algunas células normales, tales como células madre hematopoyéticas, también proliferan rápidamente. Por lo tanto, cualquier dosis que sea dañina para las células cancerosas a menudo también daña las células madre hematopoyéticas. Por otro lado, si la dosificación no es suficientemente alta para eliminar las células cancerosas, existe el riesgo de que el cáncer reaparezca por después de que se termine la quimioterapia.

Como es difícil encontrar una dosificación que elimine selectivamente las células cancerosas, la quimioterapia de elevada dosis seguida de transplante de células madre progenitoras hematopoyéticas autólogas ha obtenido aplicación extensiva como enfoque terapéutico en muchos cánceres (véase, por ejemplo, Winter, 1999; Nieto y Shpall, 1999). En este enfoque, se retira una parte de las células madre hematopoyéticas de un paciente con cáncer, y el paciente se trata después con quimioterapia de elevada dosis que es letal para las células de proliferación rápida, tales como las células cancerosas y las células madre hematopoyéticas. Posteriormente, el paciente recibe el transplante de células madre hematopoyéticas autólogas que se había retirado previamente del mismo paciente para regenerar el sistema hematopoyético.

Un grave inconveniente de esta terapia es que cuando las células madre progenitoras hematopoyéticas se retiran de los pacientes, a menudo se contaminan con células cancerosas. Esto es especialmente un problema cuando el paciente tiene un cáncer de origen hematopoyético, pero pacientes con un tumor sólido también pueden sufrir contaminación de las células madre hematopoyéticas, particularmente si el tumor sólido ha metastatizado. Como resultado, cuando las células retiradas se transplantan de nuevo para reestablecer el sistema hematopoyético, algunas células cancerosas también pueden colocarse de nuevo en el paciente con cáncer donde pueden proliferar otra vez y contribuir a la recurrencia del cáncer. Por lo tanto es deseable purgar los autoinjertos antes del transplante.

Se han empleado varios métodos para purgar los autoinjertos (Spyridonidis et al., 1998; Bensinger 1998). El autoinjerto puede tratarse con quimioterapia para eliminar las células neoplásicas contaminantes in vitro. Sin embargo, como se ha analizado anteriormente, es difícil encontrar una dosificación para el fármaco quimioterapéutico que elimine selectivamente las células neoplásicas o células cancerosas pero que deje intactas las células madre hematopoyéticas normales. Los autoinjertos también pueden tratarse con una toxina conjugada con anticuerpos que reconozcan un antígeno que sea específico para las células neoplásicas, pero dicho antígeno específico de tumor no siempre existe.

Se han propuesto adenovirus recombinantes que expresan p53 de tipo silvestre humano para terapia génica contra el cáncer y purga de la médula ósea (Seth et al., 1996). También se ha propuesto el virus del herpes simple atenuado para purgar de neuroblastoma la médula ósea en escenarios de transplante (Wu et al., 1998).

También es posible separar las células...

1. Un método para eliminar células neoplásicas mediadas por ras de una composición celular que se sospecha que contiene dichas células neoplásicas, comprendiendo dicho método poner en contacto la composición celular con reovirus en condiciones que provoquen la oncolisis de las células neoplásicas mediadas por ras.

2. El método de la reivindicación 1, en el que la composición celular comprende células madre hematopoyéticas.

3. El método de la reivindicación 2, en el que las células madre hematopoyéticas se han recogido de médula ósea.

4. El método de la reivindicación 2, en el que las células madre hematopoyéticas se han recogido de la sangre.

5. El método de la reivindicación 1, en el que la composición celular comprende un tejido, un órgano o cualquier parte de un tejido o un órgano.

6. El método de la reivindicación 5, en el que el tejido o el órgano se selecciona entre el grupo compuesto por hígado, riñón, corazón, córnea, piel, pulmón, células de los islotes pancreáticos, y sangre completa.

7. El método de la reivindicación 5, en el que el tejido, el órgano o la parte del tejido o el órgano es útil para transplante.

8. El método de la reivindicación 1, en el que la composición celular comprende células cultivadas, semen u óvulos.

9. El método de la reivindicación 1, en el que el reovirus es un reovirus de mamífero.

10. El método de la reivindicación 1, en el que el reovirus es un reovirus aviar.

11. El método de la reivindicación 9, en el que el reovirus de mamífero es un reovirus humano.

12. El método de la reivindicación 9, en el que el reovirus de mamífero es virus serotipo 3.

13. El método de la reivindicación 12, en el que el virus serotipo 3 es la cepa Dearing.

14. El método de la reivindicación 1 que comprende adicionalmente la etapa de congelar y almacenar la composición tratada con reovirus en una solución que contiene DMSO.

15. El método de la reivindicación 1 que comprende adicionalmente la etapa de tratar la composición tratada con reovirus con anticuerpos anti-reovirales y el complemento.

16. El método de la reivindicación 1 que comprende adicionalmente la etapa de someter las células tratadas a un gradiente que separar las células del reovirus y recoger la capa que contiene células.

17. El método de la reivindicación 1 que comprende adicionalmente formular la composición celular en forma de una composición farmacéutica.

18. Un kit que comprende una composición celular que se puede obtener por el método de la reivindicación 1 y un anticuerpo anti-reoviral.