El uso de Proteosomas y liposacáridos en la preparación de una composición inmunoestimuladora para provocar una respuesta inmune inespecífica

Composiciones y procedimientos para activar una inmunidad innata y alérgica.

Campo técnico

La presente invención se refiere generalmente a la inmunomodulación y, más específicamente, a los usos terapéuticos de composiciones inmunoestimuladoras con Proteosomas para inducir una respuesta inmune no específica (tal como una respuesta inmune innata) de manera que se potencie o aumente una respuesta inmune adaptativa o para inducir tanto una respuesta inmune no específica como una respuesta inmune adaptativa específica, de manera que la enfermedad infecciosa se trata o se previene o para modular una respuesta inmune para el tratamiento o prevención de una reacción inflamatoria, tal como asma alérgica.

Antecedentes de la invención

Algunos patógenos microbianos pueden causar infecciones fatales incluso cuando se enfrentan con una fuerte respuesta inmune del huésped. Sin embargo, el control de enfermedades infecciosas descontroladas han tenido éxito generalmente en la sociedad moderna usando medidas estrictas de salud pública, fármacos (tales como antibióticos), y vacunas. Típicamente las vacunas incluyen un microbio o un antígeno microbiano atenuado para activar una respuesta inmune específica (adaptativa). La capacidad de un antígeno para inducir una respuesta inmune protectora en un huésped puede potenciarse formulando el antígeno con un inmunoestimulante o un adyuvante. Los adyuvantes basados en alumbre se usan casi exclusivamente para vacunas humanas inyectables certificadas. Sin embargo, la respuesta inmune adaptativa requiere señales que proporcionen información sobre el origen del antígeno (es decir, auto antígenos frente a no auto antígenos) y el tipo de respuesta a inducir (es decir, una respuesta a célula T y/o a célula B). Recientemente se han acumulado pruebas que indican que el sistema inmune innato puede proporcionar estas señales (véase, por ejemplo, Fearon y Locksley, Science 272:50, 1996; Medzhitov y Janeway, Curr. Opin. Immunol. 9:4, 1997).

La inmunidad innata es la primera línea de defensa independiente de anticuerpos contra infecciones y, en algunos casos, puede eliminar agentes infecciosos. Los componentes de la inmunidad innata reconocen estructuras que son características de los patógenos microbianos y no se encuentran presentes en las células de mamíferos. Las células efectoras principales de la inmunidad innata son neutrófilos, fagocitos mononucleares y linfocitos citolíticos naturales (NK). Los neutrófilos y los macrófagos expresan receptores superficiales que reconocen microbios en la sangre y tejidos y estimulan la ingestión (fagocitosis, por ejemplo, manosa o receptores de opsonina) o activan fagocitos no implicados en la ingestión (por ejemplo, receptores de tipo Toll, TLR). Los mecanismos efectores de la inmunidad innata a menudo se usan para eliminar microbios, incluso en una respuesta inmune adaptativa. Por lo tanto, la respuesta inmune innata puede proporcionar señales que funcionan conjuntamente con antígenos para estimular la proliferación y diferenciación de los linfocitos T y B específicos de antígeno (adaptativo).

Una respuesta inmune eficaz depende de la comunicación entre las respuestas inmune innata y adaptativa. El linfocito T es importante para coordinar la respuesta inmune adaptativa controlando la liberación de moléculas efectoras. Por ejemplo, las células auxiliares T1 (Th) producen interleucina-2 (IL-2), el factor alfa de necrosis tumoral (TNF-a), e interferón gamma (IFN-?), que son importantes para el desarrollo de la inmunidad mediada por células (Mosmann y col., J. Immunol. 136: 2348, 1986; Street y Mosmann, FASEB J. 5: 171, 1991). En cambio, las células Th2 producen IL-4, IL-13, IL-5, IL-9, IL-6 e IL-10, que son importantes para la estimulación de la producción de IgE, mastocitosis y eosinofilia mucosa (Mosmann y col., Street y Mosmann). Aunque un cambio hacia un fenotipo Th1 o Th2 puede ser importante para la defensa contra patógenos, un cambio en una dirección u otra también puede asociarse con la inducción de enfermedades autoinmunes (Th1) o enfermedades inflamatorias (Th2).

En las enfermedades inflamatorias, tales como alergia o asma, el equilibrio preciso entre las respuestas de citocinas reguladoras Th1, Th2 y T parece cambiar hacia un fenotipo Th2. Por ejemplo, el asma es una enfermedad pulmonar inflamatoria compleja caracterizada por la obstrucción variable del flujo del aire, hipersensibilidad de las vías respiratorias (AHR) e inflamación de las vías respiratorias. Aunque el asma es de origen multifactorial, se considera que el proceso inflamatorio (denominado asma extrínseco o alérgico, en la forma más común de asma) es el resultado de una respuesta inmune anómala contra alérgenos comúnmente inhalados. La presentación de los alérgenos inhalados a las células T CD4+ en los pulmones de individuos susceptibles da como resultado la producción de citocinas Th2, IL-4, IL-13 IL-5, que controlan la diferenciación, reclutamiento y activación de mastocitos y eosinófilos en la mucosa de las vías respiratorias. Estas células efectoras liberan una diversidad de mediadores inflamatorios (por ejemplo, histamina, secretagogos mucosos, proteínas básicas derivadas de eosinófilos, proteasas). Los mediadores ya sea individual o conjuntamente causan broncoconstricción aguda, rotura de la capa epitelial de las vías respiratorias, modificaciones en el control neural del tono de las vías respiratorias, producción de moco aumentada y masa celular del músculo liso aumentada. Cada una de estas consecuencias del proceso inflamatorio puede causar o producirse en combinación con la hipersensibilidad de las vías respiratorias AHR. La incidencia, morbilidad y mortalidad del asma ha aumentado en todo el mundo durante las dos últimas décadas y las medicaciones anti-inflamatorias existentes (tales como corticoides) tienen limitaciones ya que la enfermedad no se modifica (es decir, únicamente se tratan los síntomas, que volverán a presentarse si la medicación es discontinuada) y estas medicaciones están asociadas con posibles efectos secundarios significativos.

Mallet y col., (Infection and Immunity, American Society for Microbiology, 63(6), 1995, págs. 2382-2386) desvelan la inmunización con una composición de vacuna de proteosomas de Neisseria meningitidis combinados con lipopolisacáridos de S. sonnei o S. flexneri.

Por tanto, existe una necesidad para identificar y desarrollar composiciones inmunoestimuladoras que sean terapéuticamente eficaces contra infecciones microbianas y respuestas inmunopatológicas (por ejemplo, inflamatorias) contra dichas infecciones, particularmente composiciones que puedan potenciar o aumentar la inmunidad protectora y composiciones que puedan suprimir una respuesta inmunopatológica. La presente invención reúne dichas necesidades y proporciona adicionalmente otras ventajas asociadas.

Breve sumario de la invención

La presente invención descrita en el presente documento proporciona procedimientos para fabricar y usar formulaciones terapéuticas de composiciones inmunoactivas basadas en liposacáridos y proteosomas. Las composiciones inmunoestimuladoras, que incluyen proteosomas y liposacáridos, pueden usarse para provocar o potenciar una respuesta inmune innata no específica para tratar o prevenir enfermedades infecciosas. Además, después de la activación del sistema inmune innato, pueden usarse composiciones inmunogénicas que contengan adicionalmente un antígeno para provocar una respuesta inmune adaptativa específica. Adicionalmente, se proporcionan composiciones que pueden modificar respuestas hiperreactivas o respuestas inmunes inflamatorias, tales como reacciones alérgicas.

En una realización de la divulgación se proporciona un procedimiento para provocar una respuesta inmune no específica, que comprende administrar a un sujeto una composición inmunoestimuladora en una cantidad suficiente para provocar una respuesta inmune no específica, en el que la composición inmunoestimuladora comprende proteosomas y liposacáridos. En una realización, la respuesta inmune no específica es una respuesta inmune innata que previene o trata una infección microbiana, en el que la infección microbiana es una infección viral, parasitaria, fúngica o bacteriana. En una realización particular, la infección microbiana es una infección viral, en la que la infección viral es una infección por gripe. En una realización, la composición inmunoestimuladora se administra mediante una vía seleccionada al menos entre una de la vía mucosa, enteral, parenteral, transdérmica, transmucosa, nasal y por inhalación. En una realización, el contenido final del liposacárido...

1. El uso de Proteosomas y liposacáridos en la preparación de una composición inmunoestimuladora para provocar una respuesta inmune inespecífica.

2. El uso de a) una composición inmunoestimuladora que comprende Proteosomas y un liposacárido capaz de provocar una respuesta inmune innata y b) una composición inmunogénica que comprende Proteosomas, liposacáridos y un agente microbiano capaz de provocar una respuesta inmune adaptativa para preparar una preparación combinada para el tratamiento o la prevención de una infección microbiana.

3. El uso de los Proteosomas y del liposacárido en la preparación de una composición inmunomoduladora para suprimir una respuesta inmune inflamatoria.

4. El uso de a) una composición inmunomoduladora que comprende Proteosomas y un liposacárido capaz de suprimir una respuesta inmune inflamatoria y b) una composición inmunogénica que comprende Proteosomas, un liposacárido y un alergeno, capaz de provocar una tolerancia al alérgeno, para preparar una preparación combinada para el tratamiento o prevención de una reacción alérgica.

5. El uso de los Proteosomas y el liposacárido en la preparación de una composición inmunoestimuladora en una cantidad suficiente para provocar una respuesta inmune innata para el tratamiento o prevención de una infección microbiana.

6. El uso de los Proteosomas y el liposacárido en la preparación de una composición inmunoestimuladora en una cantidad suficiente para provocar una respuesta inmune innata para el tratamiento o prevención de una infección por el virus de la gripe.

7. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en el que cada una de las composiciones se administra por una vía seleccionada entre al menos la vía mucosa, enteral, parenteral, sublingual, transdérmica, transmucosa, nasal y por inhalación.

8. El uso de acuerdo con la reivindicación 7, en el que cada una de las composiciones se administra por vía nasal.

9. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en el que el contenido final en peso del liposacárido, como un porcentaje de proteína de Proteosoma varía del 1% al 500% en cada una de las composiciones.

10. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en el que los Proteosomas y los liposacáridos de las composiciones inmunoestimuladora, inmunogénica o inmunomoduladora, respectivamente, se obtienen a partir de la misma especie bacteriana Gram-negativa.

11. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1, 3, 5 ó 6, en las que los Proteosomas se obtienen a partir de una primera especie bacteriana Gram-negativa y los liposacáridos se obtienen a partir de una segunda especie bacteriana Gram-negativa.

12. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2 ó 4, en el que los Proteosomas y el liposacárido de las composiciones inmunoestimuladora, inmunogénica o inmunomoduladora, respectivamente, se obtienen a partir de diferentes especies bacterianas Gram-negativas.

13. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que al menos uno de los liposacáridos de las composiciones se obtiene a partir de una bacteria Gram-negativa seleccionada al menos de una de las especies de Shigella, especies de Chlamydia, especies de Yersinia, especies de Pseudomonas, especies de Plesiomonas, especies de Escherichia, especies de Porphyromonas y especies de Salmonella.

14. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 - 6, en el que los Proteosomas de las composiciones se obtienen a partir de especies de Neisseria.

15. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 - 6, en el que los Proteosomas de las composiciones se obtienen de Neisseria meningitidis, y el liposacárido se obtiene de Shigella flexneri.

16. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el uso comprende adicionalmente administrar a un sujeto una composición inmunogénica después de administrar la composición inmunoestimuladora, en el que la composición inmunogénica comprende Proteosomas, un liposacárido y un antígeno microbiano.

17. El uso de acuerdo con la reivindicación 3, que adicionalmente comprende administrar a un sujeto una composición inmunogénica después de administrar la composición inmunoestimuladora, en el que la composición inmunogénica comprende Proteosomas, un lipopolisacárido y un antígeno.

18. El uso de acuerdo con la reivindicación 17, en el que el antígeno comprende al menos un antígeno microbiano.

19. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2 ó 16, en el que la composición inmunogénica comprende al menos dos antígenos microbianos.

20. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2, 16, ó 18, en el que el antígeno es un antígeno viral, un antígeno viral fragmentado, un antígeno bacteriano, un antígeno fúngico o un antígeno parasitario.

21. El uso de acuerdo con la reivindicación 19, en el que al menos se obtienen dos antígenos microbianos a partir del mismo microorganismo, en el que el microorganismo es una bacteria, un virus, un hongo o un parásito.

22. El uso de acuerdo con la reivindicación 19, en el que al menos se obtienen dos antígenos microbianos a partir de diferentes microorganismos.

23. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2, 4, 16 y 17, en el que la proporción entre el peso de los Proteosomas y el liposacárido de la composición inmunogénica y el peso del antígeno microbiano definido en la reivindicación 2 ó 16, el antígeno definido en la reivindicación 17, o el alérgeno definido en la reivindicación 4 de la composición inmunogénica, está dentro de un intervalo de 4:1 a 1: 4; 1:1 a 1:500 ó 1:1 a 1:200.

24. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2, 4, 16, ó 17, en el que el antígeno microbiano definido en la reivindicación 2 ó 16, el antígeno definido en la reivindicación 17, o el alergeno definido en la reivindicación 4, de la composición inmunogénica es recombinante.

25. El uso de acuerdo con la reivindicación 20, en el que el antígeno bacteriano se obtiene de Bacillus anthracis, Chlamydia trachomatis, Yersinia pestis, o Escherichia coli enteropatógena.

26. El uso de acuerdo con la reivindicación 20, en el que el antígeno viral fragmentado es un antígeno fragmentado de la gripe.

27. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2, 4, 16 y 17, en el que la composición inmunogénica se administra aproximadamente de uno a aproximadamente siete ó diez días después de la administración de la composición inmunoestimuladora o inmunomoduladora, respectivamente.

28. El uso de acuerdo con la reivindicación 16, en el que la composición inmunogénica provoca una respuesta inmune adaptativa.

29. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que la respuesta inmune no específica es una respuesta inmune innata que previene o trata una infección microbiana.

30. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2, 5 y 29, en el que la infección microbiana es una infección viral, parasitaria, fúngica o bacteriana.

31. El uso de acuerdo con la reivindicación 30, en el que la infección bacteriana es una infección por Chlamydia trachomatis.

32. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, 16 y 17, en el que al menos una de las composiciones comprende adicionalmente un transportador/excipiente farmacéuticamente aceptable.

33. El uso de acuerdo con la reivindicación 3, en el que la respuesta inmune inflamatoria es asma o una reacción alérgica.

34. El uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que la composición inmunogénica comprende adicionalmente al menos dos alérgenos.

35. El uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que el alérgeno de la composición inmunogénica es un antígeno microbiano.

36. El uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que el alérgeno de la composición inmunogénica es un antígeno bacteriano.

37. El uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que el alérgeno de la composición inmunogénica se selecciona al menos entre uno de una partícula inhalada, polen, vapor, gas, un alimento, una bebida, un fármaco, una toxina, un antígeno microbiano, un producto de descamación, compuestos derivados de animales, heces de ácaros del polvo, un polipéptido, un carbohidrato y un ácido nucleico.

38. El uso de acuerdo con la reivindicación 37, en el que el polen es polen de abedul.

39. El uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que la reacción alérgica es al menos una de asma, alveolitis alérgica, aspergilosis alérgica broncopulmonar, conjuntivitis alérgica, coriza alérgica, dermatitis alérgica, vasculitis alérgica y rinitis alérgica.

40. El uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2, 5 y 29, en el que la infección microbiana es una infección viral.

41. El uso de acuerdo con la reivindicación 40, en el que la infección viral es una infección viral de la gripe.

42. Una composición que comprende una composición inmunoestimuladora que comprende

43. Una composición que comprende una composición inmunomoduladora que comprende

44. Un kit que comprende

para su uso simultáneo o secuencial en la terapia o prevención de una infección microbiana, en el que la composición inmunoestimuladora provoca una respuesta inmune innata y la composición inmunogénica provoca una respuesta inmune adaptativa.

45. Un kit que comprende

como una preparación combinada para su uso simultáneo o secuencial en la terapia o prevención de una reacción alérgica, en el que la composición inmunomoduladora provoca una respuesta inmune inflamatoria y la composición inmunogénica provoca tolerancia al alérgeno.