PROCEDIMIENTO Y ESTUCHE DE ENSAYO PARA DETECTAR ESFINGOMIELINASA ALCALINA.
Un procedimiento para detectar in Vitro esfingomielinasa alcalina en una muestra de material biológico de un paciente,
que comprende las etapas de a) poner en suspensión la muestra en un tampón de homogeneización que contiene sacarosa 0,24-0,26 M, KCl 0,14-0,16 M, KH 2PO 4 45-55 mM, ajustado a aproximadamente pH 7,4; b) centrifugar la muestra al menos una vez y recuperar la materia sobrenadante; c) medir el contenido de proteína en la materia sobrenadante; d) añadir a una muestra de la materia sobrenadante un tampón del ensayo que contiene Tris/HCl 45-55 mM, EDTA 1,9-2,2 mM, NaCl 0,14-0,16 M, pH 8,9-9,1, esfingomielina 28-31 muM y un tampón del ensayo que contiene las sales de bilis TC, TDC, GC, GCDC a una concentración de 2,9-3,1 mM; e) incubar la mezcla del ensayo a aproximadamente 37ºC durante aproximadamente 1 hora; f) mezclar una muestra de la etapa d) con esfingomielina 28-30 muM e incubar durante aproximadamente 1 h a aproximadamente 37ºC; g) adición de un tampón de reacción que contiene Tris/HCl 45-55 mM, pH 7,3-7,5, Beta-glicerofosfato 9-11 mM, ATP 745-755 muM, EDTA 4-6 mM, EGTA 4-6 mM, reactivo de rojo Amplex 95.105, 7-9 U/ml de fosfatasa alcalina, 0,1-0,3 U/ml de colina oxidasa y 1,5-2,5 U/ml de peroxidasa de rabanillo; y h) incubar la mezcla de reacción durante al menos 1 hora a aproximadamente 37ºC, protegida de la luz; i) medir la fluorescencia usando una excitación en el intervalo de 530-560 y emisión a aproximadamente 590 nm.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: ACTIAL FARMACEUTICA LDA.
Nacionalidad solicitante: Portugal.
Dirección: RUA DOS FERREIROS, 260,P-9000-082 FUNCHAL.
Inventor/es: DE SIMONE, CLAUDIO.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 17 de Septiembre de 2008.
Clasificación PCT:
- C12Q1/44 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › esterasa.
Patentes similares o relacionadas:
Solución de sustrato para medir la actividad de lipasa y método y reactivo para medir la actividad lipasa en una muestra, del 11 de Marzo de 2020, de Shino-Test Corporation: Uso de una composicion que comprende un aceite de silicona modificado de tipo modificado con polieter no reactivo de tipo cadena lateral junto con ester de (6'-metilresorufina) […]
Proceso de producción de una solución de sustrato para medir la actividad lipasa y método de simplificación de la producción, del 30 de Octubre de 2019, de Shino-Test Corporation: Un proceso de producción de una solución de sustrato que se usa para medir la actividad lipasa en una muestra y que comprende, como sustrato para medir […]
SONDAS DE ACIDO NUCLEICO Y SU USO COMO SUSTRATO EN UN METODO PARA LA DETECCION DE SALMONELA, del 6 de Septiembre de 2019, de CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS (CSIC): Sondas de ácido nucleico y su uso como sustrato en un método para la detección de salmonella. La presente invención se refiere a sondas de ácido nucleico diseñadas […]
Método para la prueba de disolución de composiciones sólidas que contienen enzimas digestivas, del 8 de Mayo de 2019, de Allergan Pharmaceuticals International Limited: Un proceso para medir una cantidad de enzimas digestivas liberadas de una composición sólida de pancrelipasa en un medio de disolución que comprende utilizar espectroscopía […]
Método para la detección de tiras para prueba de orina con compromiso por humedad, del 4 de Abril de 2019, de SIEMENS HEALTHCARE DIAGNOSTICS INC.: Un método para detectar el exceso de humedad en una tira reactiva que emplea reactivos sensibles a la humedad e incluye un colorante de referencia infrarrojo, […]
Fosfodiesterasa 4D7 como marcador para cáncer maligno de próstata sensible a hormonas, del 4 de Abril de 2019, de KONINKLIJKE PHILIPS N.V: Una composición para su uso en un método para diagnosticar, detectar, supervisar o pronosticar in vivo cáncer maligno de próstata sensible a hormonas o para diagnosticar, […]
Ensayos rápidos, con bajo volumen de muestra, para colesterol y triglicéridos, del 20 de Marzo de 2019, de Theranos IP Company, LLC: Un método para medir al menos dos componentes lipoproteicos en una muestra de sangre procedente de un sujeto, en donde dichos al menos dos componentes lipoproteicos se seleccionan […]
Fosfodiesterasa 4D7 como marcador de cáncer de próstata, del 19 de Febrero de 2019, de KONINKLIJKE PHILIPS N.V: Fosfodiesterasa 4D7 (PDE4D7) para uso en un método de diagnóstico, detección, monitorización o pronóstico in vivo del cáncer de próstata, o de diagnóstico, […]