MONTAJE DIRIGIDO POR ORDENADOR DE UN POLINUCLEOTIDO QUE CODIFICA UN POLIPEPTIDO DIANA.
Procedimiento de síntesis de un polinucleótido diana que comprende:
# a) proporcionar una secuencia de polinucleótido diana;# b) identificar por lo menos un polinucleótido de iniciación presente en el polinucleótido diana de a), en el que el polinucleótido de iniciación comprende por lo menos un oligonucleótido con cadena más apareado con por lo menos un oligonucleótido con cadena menos dando como resultado un polinucleótido parcialmente bicatenario compuesto de una prolongación en 5'' y una prolongación en 3''; #c) identificar un segundo polinucleótido presente en el polinucleótido diana de a), en el que el segundo polinucleótido es contiguo al polinucleótido de iniciación y comprende por lo menos un oligonucleótido con cadena más apareado con por lo menos un oligonucleótido con cadena menos dando como resultado un polinucleótido parcialmente bicatenario compuesto por una prolongación en 5'', una prolongación en 3'' o una prolongación en 5'' y una prolongación en 3'', en el que por lo menos una prolongación del segundo polinucleótido es complementaria con por lo menos una prolongación del polinucleótido de iniciación; #d) identificar un tercer polinucleótido presente en el polinucleótido diana de a), en el que el tercer polinucleótido es contiguo a la secuencia de iniciación y comprende por lo menos un oligonucleótido con cadena más apareado con por lo menos un oligonucleótido con cadena menos dando como resultado un polinucleótido parcialmente bicatenario compuesto de una prolongación en 5'', una prolongación en 3'' o una prolongación en 5'' y una prolongación en 3'', en el que por lo menos una prolongación del tercer polinucleótido es complementaria con por lo menos una prolongación del polinucleótido de iniciación que no es complementaria con una prolongación del segundo polinucleótido;# e) poner en contacto el polinucleótido de iniciación de b) con el segundo polinucleótido de c) y el tercer polinucleótido de d) en condiciones y durante un tiempo tal adecuado para su apareamiento, resultando la puesta en contacto en un polinucleótido bicatenario contiguo, en el que la secuencia de iniciación se extiende en dos direcciones; #f) poner en contacto la mezcla de e) con una ligasa en condiciones adecuadas para la ligadura; y# g) repetir opcionalmente b) a f) para añadir secuencialmente polinucleótidos bicatenarios al polinucleótido de iniciación extendido mediante ciclos repetidos de apareamiento y ligadura, sintetizándose un polinucleótido diana.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: CENTOCOR, INC..
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 200 GREAT VALLEY PARKWAY,MALVERN, PA 19355.
Inventor/es: EVANS, GLEN, A.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 2 de Julio de 2008.
Clasificación PCT:
- C07K1/00 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › Procedimientos generales de preparación de péptidos.
- C12N15/09 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Tecnología del ADN recombinante.
- C12N15/10 C12N 15/00 […] › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
- C12N15/66 C12N 15/00 […] › Métodos generales para insertar un gen en un vector para formar un vector recombinante, utilizando la escisión y la unión; Utilización de "linkers" no funcionales o de adaptadores, p. ej. "linkers" que contienen la secuencia para una endonucleasa de restricción.
- C12P21/02 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 21/00 Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00). › que tienen una secuencia conocida de varios aminoácidos, p. ej. glutation.
- C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
- G06F15/00 FISICA. › G06 CALCULO; CONTEO. › G06F PROCESAMIENTO ELECTRICO DE DATOS DIGITALES (sistemas de computadores basados en modelos de cálculo específicos G06N). › Computadores digitales en general (detalles G06F 1/00 - G06F 13/00 ); Equipo de procesamiento de datos en general.
- G06F19/00
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