METODOS PARA REPLEGAMIENTO DE PROTEINAS QUE CONTIENEN RESIDUOS DE CISTEINA LIBRE.

Método para preparar una forma replegada, soluble de una proteína insoluble o agregada que es un miembro de la familia del supergén de la hormona de crecimiento y que contiene uno o más residuos de cisteína libre añadidos,

que comprende las etapas de: a) hacer que una célula huésped exprese una proteína que contiene uno o más residuos de cisteína libre añadidos que es un miembro de la familia del supergén de la hormona de crecimiento en una forma insoluble o agregada; b) lisar las células por medios químicos, enzimáticos o físicos; c) solubilizar y reducir la proteína insoluble o agregada exponiendo la proteína insoluble o agregada a un agente desnaturalizante, un agente reductor y un agente bloqueante de cisteína; y d) replegar la proteína reduciendo las concentraciones del agente desnaturalizante y los agente reductores hasta niveles suficientes para permitir que la proteína se renaturalice en una forma soluble, biológicamente activa, en la que dicho agente bloqueante de cisteína forma un disulfuro mixto reversible con al menos un residuo de cisteína libre en dicha proteína.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: BOLDER BIOTECHNOLOGY, INC.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 678 WEST WILLOW STREET,LOUISVILLE, CO 80027.

Inventor/es: DOHERTY, DANIEL, H., ROSENDAHL, MARY S., COX,GEORGE,N.

Fecha de Publicación: .

Fecha Concesión Europea: 18 de Julio de 2007.

Clasificación PCT:

  • C07K1/02 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02;   proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 1/00 Procedimientos generales de preparación de péptidos. › en solución.
  • C07K1/113 C07K 1/00 […] › sin cambio de la estructura primaria.
  • C07K14/00 C07K […] › Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados.
  • C07K14/505 C07K […] › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › Eritropoyetina (EPO).
  • C07K14/515 C07K 14/00 […] › Factor angiogénico; Angiogenina.
  • C07K14/535 C07K 14/00 […] › CSF de granulocitos; CSF de granulocitos-macrófagos.
  • C07K14/56 C07K 14/00 […] › IFN alfa.
  • C07K14/61 C07K 14/00 […] › Hormona del crecimiento (GH) (Somatotropina).
  • C07K14/78 C07K 14/00 […] › Péptidos del tejido conectivo, p. ej. colágeno, elastina, laminina, fibronectina, vitronectina, globulina insoluble en frío (CIG).
  • C12N15/09 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Tecnología del ADN recombinante.
  • C12P21/02 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA.C12P 21/00 Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00). › que tienen una secuencia conocida de varios aminoácidos, p. ej. glutation.
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