PROCEDIMIENTO DE IDENTIFICACION DE EFECTORES ALOSTERICOS DE UN RECEPTOR.

Procedimiento de detección de un efector alostérico de un receptor,

mediante determinación de la variación: - de la cinética de disociación y/o de asociación del complejo formado entre dicho receptor y uno de sus ligandos en presencia de dicho efector alostérico, con respecto a la cinética de disociación y/o de asociación del complejo formado entre dicho receptor y dicho ligando, en ausencia de dicho efector, - y/o de la amplitud de la unión formada entre dicho receptor y uno de sus ligandos en presencia de dicho efector alostérico, con respecto a la amplitud de la unión formada entre dicho receptor y dicho ligando, en ausencia de dicho efector, con la condición de que cuando la variación de dicha amplitud es negativa, se detecta igualmente la existencia de la variación de dicha cinética, estando dicho receptor y dicho ligando implicados en por lo menos una respuesta biológica en condiciones fisiológicas apropiadas, y siendo el efector alostérico capaz de modular por lo menos una de las respuestas, siendo dicho receptor marcado mediante una proteína fluorescente seleccionada de entre las proteínas fluorescentes que proceden o derivan de proteínas autofluorescentes de nematocistos, cuyo coeficiente de extinción molecular es superior a aproximadamente 14000M-1.cm-1, y el rendimiento cuántico de fluorescencia es superior a aproximadamente 0, 38, estando el ligando marcado mediante un marcador constituido: - o bien por una molécula susceptible de absorber la luz emitida por la proteína fluorescente, - o bien por una sustancia fluorescente, llevándose a cabo dichas determinaciones de la variación de la cinética de disociación y/o de asociación y de la variación de la amplitud, mediante transferencia de energía de fluorescencia: ? entra la proteína fluorescente mencionada anteriormente y dicha sustancia fluorescente, siendo la sustancia fluorescente de tal manera que, o bien es excitable a la longitud de onda de emisión de la proteína fluorescente mencionada anteriormente, o bien emite a la longitud de estimulación de la proteína fluorescente mencionada anteriormente, o ? entre la proteína fluorescente mencionada anteriormente y dicha molécula susceptible de absorber la luz emitida por la proteína fluorescente.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE
UNIVERSITE LOUIS PASTEUR DE STRASBOURG.

Nacionalidad solicitante: Francia.

Dirección: 3, RUE MICHEL ANGE,75974 PARIS.

Inventor/es: GALZI, JEAN-LUC, HIBERT, MARCEL, BOURGUIGNON, JEAN-JACQUES, MAILLET, EMELINE.

Fecha de Publicación: 1 de Mayo de 2007.

Fecha Solicitud PCT: 16 de Junio de 2003.

Clasificación Internacional de Patentes:

G01N33/557 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › utilizando medidas cinéticas, es decir medida de la evolución en función del tiempo de interacción antígeno-anticuerpo.

Clasificación PCT:

C07C229/14 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07C COMPUESTOS ACICLICOS O CARBOCICLICOS (compuestos macromoleculares C08; producción de compuestos orgánicos por electrolisiso electroforesis C25B 3/00, C25B 7/00). › C07C 229/00 Compuestos que contienen grupos amino y carboxilo unidos a la misma estructura carbonada. › a átomos de carbono de estructuras carbonadas que contienen ciclos.
G01N33/542 G01N 33/00 […] › con inhibición estérica o modificación de la señal, p. ej. extinción de fluorescencia.
G01N33/557 G01N 33/00 […] › utilizando medidas cinéticas, es decir medida de la evolución en función del tiempo de interacción antígeno-anticuerpo.
G01N33/566 G01N 33/00 […] › utilizando un soporte específico o proteínas receptoras como reactivos para la formación de uniones por ligando.

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Oficina Europea de Patentes, Lituania, Letonia, Ex República Yugoslava de Macedonia, Albania.

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