FABRICACION DE PROTEINAS EN HOJAS PLISADAS BETA CON PROPIEDADES DE UNION ESPECIFICAS.
Procedimiento para la preparación de una proteína con una estructura de lámina beta plegada y una propiedad de unión similar a anticuerpo frente a una ligando con las siguientes etapas:
a) Selección de una proteína con una estructura cristalina conocida o una estructura proteica 3D del grupo de las cristalinas, esferulinas, proteínas de choque por calor, proteínas de choque por frío, fibronectinas y proteínas de hélice fi; b) selección de un ligando; c) Determinación de los aminoácidos expuestos en superficie de la proteína de la etapa a); d) Mutagénesis del ADN que codifica la proteína con estructura de lámina beta plegada mediante la sustitución, deleción y/o inserción de aminoácidos expuestos en superficie en como mínimo dos cadenas beta expuestas en superficie de cómo mínimo dos láminas beta plegadas expuestas en superficie, manteniéndose la estructura de lámina beta plegada; e) Expresión de los mutantes obtenidos en la etapa d) en un sistema de expresión apropiado; f) Poner en contacto las proteínas obtenidas en la etapa d) con un ligando de la etapa b); g) Selección y aislamiento de las proteínas mutadas que se unen a las contrapartes de unión seleccionadas en la etapa b) formando una propiedad de unión similar a anticuerpo nueva o mejorada, entendiéndose como nueva propiedad de unión similar a anticuerpo frente a un ligando, que la proteína de la etapa a) no presenta ninguna propiedad de unión similar a anticuerpo sin la sustitución, deleción y/o inserción y que después de la sustitución, deleción y/o inserción presenta una nueva propiedad de unión similar a anticuerpo frente al ligando de b), o que la proteína de la etapa a) presenta una propiedad de unión similar a anticuerpo antes de la sustitución, deleción o inserción y que después de la sustitución, deleción o inserción posee otra propiedad de unión nueva o una propiedad de unión mejorada frente al ligando de b).
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: SCIL PROTEINS GMBH.
Nacionalidad solicitante: Alemania.
Dirección: HEINRICH-DAMEROW-STRASSE 1,06120 HALLE/SAALE.
Inventor/es: FIEDLER, ULRIKE, RUDOLPH, RAINER.
Fecha de Publicación: .
Fecha Solicitud PCT: 13 de Julio de 2000.
Fecha Concesión Europea: 11 de Octubre de 2006.
Clasificación Internacional de Patentes:
- C07K14/00 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados.
Clasificación PCT:
- C07K14/47 C07K […] › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › de mamíferos.
- C12N15/10 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
- C12N15/12 C12N 15/00 […] › Genes que codifican proteínas animales.
- C12N5/10 C12N […] › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células modificadas por introducción de material genético extraño, p. ej. células transformadas por virus.
- C12P21/02 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 21/00 Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00). › que tienen una secuencia conocida de varios aminoácidos, p. ej. glutation.
Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Finlandia, Chipre, Oficina Europea de Patentes.
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