PROCEDIMIENTO PARA LA DETECCION DE LA PRESENCIA DE MERCURIO CON LA AYUDA DE MICROORGANISMOS EXCITADOS MEDIANTE BIOLUMINISCENCIA ELEVADA MEDIANTE MERCURIO.

SELECTIVIDAD DE E. COLI C600 (PGL4) PARA MERCURIO. TASA DE LUMINISCENCIA CONTROL NEGATIVO.

SE DESCRIBE UN PROCEDIMIENTO, EN EL QUE SE PUEDEN EMPLEAR MICROORGANISMOS, EQUIPADOS CON VECTOR PLASMIDO, PGL4, CONSTRUIDO MEDIANTE TECNICAS BIOLOGICAS MOLECULARES, COMO BIOSENSORES PARA COMPUESTOS DE MERCURIO. LA BASE DE LA INVENCION ES LA COMBINACION DE UN COMPLEJO-GEN (MER-OPERON) INDUCIBLE MEDIANTE IONES DE MERCURIO CON EL SISTEMA DE GEN LUCEFERASA (LUX) DE VIBRIO-HARVEYI MEDIANTE LA TECNICA DE CRONACION MOLECULAR. EN ESTE CASO, LA DISPOSICION DE AMBAS UNIDADES DE GEN ESTA CONCEBIDA DE FORMA QUE EL PROMOTOR DEL MER-OPERON REGULADO POSITIVAMENTE MEDIANTE COMPUESTOS DE MERCURIO CONTROLA TAMBIEN LA TRANSCRIPCION DE LOS GENES-LUX. COMO CONSECUENCIA, LOS MICROORGANISMOS TRANSFORMADOS CON PLASMIDO PGL4 RESPONDEN AL INCREMENTO DE LAS CANTIDADES DE CATIONES DE MERCURIO EN EL MEDIO CIRCUNDANTE CON UN AUMENTO EN SU BIOLUMINISCENCIA EMITIDA. EL PROCESO ES ABSOLUTAMENTE ESPECIFICO DEL MERCURIO, RAPIDO Y ALTAMENTE SENSIBLE: EL LIMITE PROBADO PARA IONES DE MERCURIO ES DE APROXIMADAMENTE 0,2 PPB, ES DECIR, 5 VECES INFERIOR AL UMBRAL DE DETECCION DE LOS METODOS MAS POTENTES ESTABLECIDOS (ESPECTROMETRIA DE ABSORCION ATOMICA), QUE DETECTAN DE 1 A 5 PPB DE MERCURIO Y REQUIEREN UNA CANTIDAD CONSIDERABLE DE APARATOS. OTRA VENTAJA DE LA INVENCION ES LA POSIBILIDAD DE DETERMINAR VALORES DE MEDICION (SEÑALES DE BIOLUMINISCENCIA EMITIDAS POR MICROORGANISMOS TRANSFORMADOS POR PLASMIDO PGLK4) SIN CONTACTO DIRECTO ENTRE EL BIOSENSOR Y LA UNIDAD AMPLIFICADORA DE LAS SEÑALES (APARATO DE BIOLUMINISCENCIA). POR TANTO, EL METODO PERMITE LA DETERMINACION SENCILLA, CONTINUA, EN-LINEA DE CONCENTRACIONES CRITICAS DE MERCURIO.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: GENLUX FORSCHUNGSGESELLSCHAFT FUR BIOLOGISCHE VERFAHREN MBH.

Nacionalidad solicitante: Alemania.

Dirección: WALLSTRASSE 10,W-4050 MONCHENGLADBACH 1.

Inventor/es: MOLDERS, HORST.

Fecha de Publicación: 16 de Noviembre de 1994.

Fecha Solicitud PCT: 1 de Febrero de 1990.

Fecha Concesión Europea: 21 de Julio de 1993.

Clasificación Internacional de Patentes:

C12N15/53 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Oxidorreductasas (1).
C12Q1/02 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen microorganismos vivos.

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Finlandia, Oficina Europea de Patentes, Australia, Japón, Estados Unidos de América.

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