PROCEDIMIENTO DE PURIFICACION DE UNA PROTEINA QUE FIJA LA ERITROPOYETINA.

EL CAMPO EXTRACELULAR DEL RECEPTOR DE LA ERITROPOYETINA HUMANA (PROTEINA DE FIJACION DE LA EPO, EBP) HA SIDO EXPRESADO Y SUPERPRODUCIDO EN LA E. COLI. EL CONTROL DE LOS NIVELES DE OXIGENO Y DEL PH DURANTE LA FERMENTACION A GRAN DENSIDAD PERMITE LA PRODUCCION DE LA UNICA VARIANTE DE LA PROTEINA CON EL TERMINO AMINO NATIVO. SE EXPONEN PROCEDIMIENTOS QUE PERMITEN LA EFICIENTE RECUPERACION DE EBP PURIFICADO, QUE FIJA CUANTITATIVAMENTE LA EPO. LA PROTEINA ACTIVA PURIFICADA COMPITE CON EL RECEPTOR DE LA EPO ASOCIADO A LA MEMBRANA PARA FIJACION DE LA EPO [I 125 ] Y NEUTRALIZA LA ESTIMULACION DEPENDIENTE DE LA EPO EN UN ENSAYO DE PROLIFERACION BASADO EN LA CELULA. ADEMAS, SE HA DETERMINADO LA CONSTANTE DE FIJACION EN EQUILIBRIO DEL RADIOLIGANDO PARA ESTA INTERACCION, POR INMOVILIZACION DE LA EBP SOBRE GEL DE AGAROSA A TRAVES DE UNA CISTEINA LIBRE. LA EBP DE LA PRESENTE INVENCION TIENE MUCHOS USOS, INCLUIDA LA DETERMINACION ESTRUCTURAL DE LA PROTEINA POR NMR

(RESONANCIA MAGNETICA) O CRISTALOGRAFIA, EN EL DISEÑO Y DESCUBRIMIENTO DEL FARMACO, Y COMO TERAPIA. SE HAN PRODUCIDO TAMBIEN UNA PROTEINA DE FUSION DE LA PROTEINA EBP Y UNA CADENA PESADA DE INMUNOGLOBULINA. ESTA PROTEINA, DENOMINADA EBP IG, ES UNA PLANTILLA DE DIMERIZACION PREFORMADA Y ES IGUALMENTE UTIL EN LOS PROCEDIMIENTOS DE DISEÑO Y DESCUBRIMIENTO DE FARMACOS.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: ORTHO-MCNEIL PHARMACEUTICAL, INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: ONE JOHNSON & JOHNSON PLAZA, NEW BRUNSWICK, NEW JERSEY 0.

Inventor/es: MIDDLETON, STEVEN, A., JOHNSON, DANA, MCMAHON, FRANK, J., MULKAHY, LINDA, S., JOLLIFFE, LINDA, K.

Fecha de Publicación: .

Fecha Solicitud PCT: 22 de Enero de 1997.

Fecha Concesión Europea: 10 de Agosto de 2005.

Clasificación Internacional de Patentes:

  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas... > Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas;... > C07K14/705 (Receptores; Antígenos celulares de superficie; Determinantes celulares de superficie)

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Mónaco, Irlanda, Finlandia, Oficina Europea de Patentes, Burkina Faso, Benin, República Centroafricana, Congo, Costa de Marfil, Camerún, Gabón, Guinea, Malí, Mauritania, Niger, Senegal, Chad, Togo, Organización Africana de la Propiedad Intelectual.

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