Un péptido sustancialmente puro constituido por la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 1

Péptidos biológicamente activos.

Campo de la invención

La presente invención se refiere al campo de la inmunología. En particular, la presente invención se refiere a péptidos y sus composiciones farmacéuticas que son capaces de modular las respuestas inmunes.

Antecedentes de la invención

Los péptidos se conocen en la técnica para el tratamiento de enfermedades y como composiciones farmacéuticas. Por ejemplo, la Patente de Estados Unidos Nº 6.191.113 describe un péptido que tiene actividad inhibidora para el crecimiento de las células del músculo liso y por lo tanto es útil para prevenir y tratar afecciones patológicas asociadas con el crecimiento de las células del músculo liso tales como arteriosclerosis, reestenosis después de angioplastia, estenosis luminal después de injertar vaso sanguíneo y sarcoma de músculo liso. El documento US 6.184.208 describe otro péptido que se ha descubierto que modula los procesos fisiológicos tales como la actividad de aumento de peso de la zona de crecimiento epitelial y crecimiento del cabello.

Karelin c.s. (Peptides, VOL. 16, Nº 4, 693-697, 1995) describe los fragmentos de alfa-hemoglobina (33-38) y (33-46) que tienen respectivamente actividad inmunomoduladora y liberadora de ACTH. El documento US5861483 describe el fragmento de alfa-hemoglobina (1-97) que tiene actividad inmunomoduladora.

Sumario de la invención

Por lo tanto, un objeto de la presente invención es identificar polipéptidos biológicamente activos. Se sintetizaron muchos péptidos por métodos químicos convencionales y se exploraron para su actividad biológica. A los péptidos se les dan códigos que tienen las letras CMS seguidas de un número. Se ha identificado un total de 30 péptidos que tienen actividad biológica in vivo. Las secuencias los números ID correspondientes de estos péptidos biológicamente activos se muestran en la Tabla A.

(Tabla pasa a página siguiente)

Por consiguiente, un aspecto de la presente invención se refiere a un péptido sustancialmente puro que tiene una secuencia de aminoácidos identificada como la ID de secuencia Nº 1. Por lo tanto, la presente invención se refiere a un péptido sustancialmente puro constituido por la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 1. En una realización específica, el péptido puede modular, pero no se limita a modular, una o más de las siguientes: actividad inmune; infección de hepatitis, incluyendo, aunque sin limitación, infección de hepatitis B; nefritis; el desarrollo de un cáncer, incluyendo aunque sin limitación sarcoma, cáncer de hígado, leucemia y melanoma; y el peso corporal.

Otro aspecto más de la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende un péptido sustancialmente puro constituido por la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 1.

Otro aspecto adicional de la presente invención se refiere a un método para preparar una composición farmacéutica que comprende proporcionar un péptido sustancialmente puro constituido por una secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 1; y mezclar dicho péptido sustancialmente puro con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

En un aspecto adicional más, la invención proporciona un péptido sustancialmente puro constituido por la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 1 para su uso en terapia.

La invención también posibilita el uso de un péptido sustancialmente puro constituido por la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 1 para la fabricación de un medicamento para modular actividades inmunes, hepatitis vírica o el desarrollo de un cáncer.

Análogamente, la invención proporciona un péptido sustancialmente puro constituido por la SEC ID Nº 1 para su uso en la modulación de actividades inmunes, hepatitis vírica o el desarrollo de un cáncer.

Descripción detallada

Los péptidos pueden sintetizarse fácilmente por métodos sintéticos convencionales a partir de L-aminoácidos, pero también pueden sintetizarse por métodos de ingeniería genética usando ácidos nucleicos que tienen secuencias que codifican los péptidos individuales.

I. Actividad Biológica

Para investigar la posible actividad biológica de los péptidos, se examinó el efecto inmunológico de los péptidos sobre un modelo animal, con procedimientos que acatan los "Principios de Investigación Preclínica de Nuevos Fármacos" (Principles of Pre-clinical Research of New Drugs) presentados por el Ministerio de Salud de la República Popular de China ^[1].

Se usaron el ensayo de transformación de linfocitos T, el ensayo de actividad citotóxica de células NK, y el ensayo de secreción de IL-2 e IFN-? por linfocitos T para detectar cualquier posible efecto de los péptidos sobre la función inmune celular específica. Se usó el ensayo de eliminación de partículas de carbono para detectar cualquier efecto posible de los péptidos sobre la función inmune celular no específica. Se usó el ensayo de hemólisis de glóbulos rojos de oveja (SRBC) para detectar cualquier efecto posible de los péptidos sobre la función inmune humoral. Se usó el ensayo de peso del órgano inmunitario para detectar cualquier efecto posible de los péptidos a nivel orgánico.

En este estudio, se usó el grupo de solución salina como control negativo, mientras que se usaron los grupos IL-2 e IFN-? como controles positivos, ya que IL-2 e IFN-? son inmunoestimulantes bien estudiados ^[10]. Se usaron cuatro concentraciones arbitrarias de los péptidos de muestra en este estudio, para cubrir un intervalo de dosificación de factor 1.000. Debido a la complejidad intrínseca de la respuesta inmunológica in vivo, y la ausencia de conocimiento previo sobre la función de la dosificación frente a la respuesta, por lo tanto, se ha valorado cualquier diferencia estadísticamente significativa sobre el control negativo en cualquier grupo de dosificación como actividad biológica positiva.

Los resultados de este estudio fueron los siguientes:

1. Se descubrió que los péptidos CMS001, CMS002, CMS003, CMS007, CMS008, CMS009, CMS010, CMS011, CMS012, CMS015, CMS019, CMS021, CMS029, y CMS034 eran capaces de potenciar la transformación de linfocitos T, que tiene una diferencia estadísticamente significativa del grupo de control normal de solución salina. También se descubrió que los péptidos CMS014 y CMS036 eran capaces de inhibir la transformación de linfocitos T, que tiene una diferencia estadísticamente significativa del grupo de control normal de solución salina.

2. Se descubrió que los péptidos CMS001, CMS002, CMS003, CMS008, CMS009, CMS010, CMS011, CMS012, CMS013, CMS015, CMS016, CMS020, CMS021, CMS022, CMS023, CMS024, CMS026, CMS027, CMS028, CMS029, CMS030, CMS032, CMS033, CMS034, CMS035, y CMS036 eran capaces de aumentar la actividad citotóxica de células NK, que tiene una diferencia estadísticamente significativa del grupo de control normal de solución salina. También se descubrió que los péptidos CMS008 y CMS012, a concentración adecuada, eran capaces de aumentar la actividad citotóxica de células NK, que tiene una diferencia estadísticamente significativa del grupo de control normal de solución salina.

3. Se descubrió que los péptidos CMS001, CMS003, CMS007, CMS009, CMS010, CMS011, CMS012, CMS015, CMS020, CMS022, y CMS034 eran capaces de potenciar la secreción de interleuquina-2 (IL-2) por linfocitos T, que tiene una diferencia estadísticamente significativa del grupo de control normal de solución salina.

4. Se descubrió que los péptidos CMS001, CMS003, CMS009, CMS010, CMS011, CMS012, CMS013, CMS016, CMS021, CMS022, y CMS028 eran capaces de potenciar la secreción de IFN por linfocitos T, que tiene una diferencia estadísticamente significativa del grupo de control normal de solución salina.

5. Se descubrió que los péptidos CMS001, CMS002, CMS003, CMS007, CMS008, CMS009, CMS010, CMS011, CMS012, CMS013, CMS014, CMS015, CMS016, CMS018, CMS019, CMS020, CMS021, CMS022, CMS023, CMS024, CMS026, CMS027, CMS028, CMS029, CMS030, CMS032, CMS033, CMS034, CMS035, y CMS036 eran capaces de potenciar la síntesis de anticuerpo anti-SRBC tras la estimulación antigénica, que tiene una diferencia estadísticamente significativa del grupo de control normal de solución salina. También se descubrió que los péptidos...

1. Un péptido sustancialmente puro constituido por la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 1.

2. El péptido de acuerdo con la reivindicación 1, donde dicho péptido modula al menos una de las siguientes afecciones: actividades inmunes, infección por hepatitis, infección por hepatitis B y el desarrollo de un cáncer.

3. Una composición farmacéutica que comprende un péptido sustancialmente puro constituido por la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 1.

4. Un método de preparación de una composición farmacéutica que comprende proporcionar un péptido sustancialmente puro constituido por la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 1 y mezclar dicho péptido sustancialmente puro con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

5. Un péptido sustancialmente puro constituido por la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 1 para su uso en terapia.

6. Uso de un péptido sustancialmente puro constituido por la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 1 para la fabricación de un medicamento para modular actividades inmunes, hepatitis vírica o el desarrollo de un cáncer.

7. Un péptido sustancialmente puro constituido por la secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 1 para su uso en la modulación de actividades inmunes, hepatitis vírica o el desarrollo de un cáncer.