10 inventos, patentes y modelos de SWARTZ, JAMES R.

Métodos para controlar el flujo en rutas metabólicas mediante la reubicación de enzimas.

(04/07/2019) Un método para producir un producto de una ruta biosintética de interés, el cual comprende: (a) células bacterianas en crecimiento que expresan enzimas de una ruta biosintética de interés para la producción de un producto, en donde al menos una de las enzimas: (i) es una enzima que controla el flujo metabólico en la ruta biosintética y (ii) es una enzima que se modifica genéticamente para contener una secuencia peptídica de orientación periplásmica y se reubica en el periplasma de la célula; produciendo así células bacterianas que contienen al menos una enzima modificada que es secuestrada en el espacio periplásmico, en donde la modificación genética y el secuestro periplásmico no tienen efecto negativo sobre el crecimiento de las células bacterianas; (b) lisar las células…

Proceso para la producción de polipéptidos.

(05/11/2014) Un proceso para la producción y aumento de los rendimientos de un polipéptido heterólogo en E. coli que comprende (a) cultivar, en un medio de cultivo, células de E. coli que comprenden el ácido nucleico que codifica el polipéptido, alimentando al mismo tiempo el medio de cultivo con un organofosfato transportable que se selecciona del grupo que consiste en alfa-glicerofosfato, beta-glicerofosfato, glicerol-3-fosfato y una mezcla de glicerol-2-fosfato y glicerol-3-fosfato, de tal manera que se exprese el ácido nucleico y (b) recuperar el polipéptido de las células, de tal manera que los rendimientos del polipéptido aumenten,…

PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR LA PROPENSION DE BACTERIAS A LA INESTABILIDAD DE OXIGENO DISUELTO.

(20/10/2009) Procedimiento para determinar la propensión de un cultivo de células bacterianas a la inestabilidad del oxígeno disuelto en un fermentador a gran escala con al menos 1000 litros de capacidad volumétrica que comprende (a) cultivar el cultivo celular en presencia de una fuente de carbono/energía introducida a una velocidad de alimentación establecida en un fermentador a pequeña escala que no tiene más de 100 litros de capacidad volumétrica configurado para que la concentración de oxígeno disuelta a través del cultivo celular no sea homogénea durante la fermentación, (b) cuando el cultivo tiene una capacidad de captar de oxígeno suficiente para exceder la velocidad de transferencia de oxígeno del reactor, incrementar la velocidad…

PROCEDIMIENTO DE FERMENTACION QUE UTILIZA CEPAS DE CELULAS HUESPEDES MICROBIANAS MARCADAS.

(16/03/2007) Procedimiento para producir, en un único recipiente de cultivo, múltiples productos polipeptídicos a partir de cepas de células huéspedes microbianas que utilizan más de una fuente de carbohidrato como sustrato, en donde las cepas de células huéspedes microbianas son cepas de células huéspedes bacterianas, de levadura, o fúngicas, cuyo proceso comprende: (a) cultivar en el recipiente una primera cepa de células huésped que comprende un ácido nucleico que codifica un primer producto polipeptídico que se está fabricando actualmente, y la cual está marcada genéticamente para que carezca de su capacidad nativa para usar una primera fuente de carbohidrato como sustrato; (b) sembrar una muestra aislada del cultivo de la paso (a) en un medio de cultivo suplementado con una fuente de carbohidratos…

PROCEDIMIENTO DE PRODUCCION DE BACTERIAS DE POLIPEPTIDOS HETEROLOGOS CON ENLACES DISULFUROS.

(01/10/2006) SE PROPORCIONA UN PROCEDIMIENTO PARA PRODUCIR UN POLIPEPTIDO HETEROLOGO EN BACTERIAS, EL CUAL COMPRENDE: (A) CULTIVAR CELULAS BACTERIANAS, LAS CUALES COMPRENDEN ACIDO NUCLEICO QUE CODIFICA UNA PROTEINA DSBA O DSBC, ACIDO NUCLEICO QUE CODIFICA EL POLIPEPTIDO HETEROLOGO, UNA SECUENCIA DE SEÑAL PARA SECRECION TANTO DE LA PROTEINA DSBA O DSBC COMO EL POLIPEPTIDO HETEROLOGO, Y UN PROMOTOR INDUCIBLE PARA TANTO EL ACIDO NUCLEICO QUE CODIFICA LA PROTEINA DSBA O DSBC COMO EL ACIDO NUCLEICO QUE CODIFICA EL POLIPEPTIDO HETEROLOGO, BAJO CONDICIONES POR LAS QUE LA EXPRESION DEL ACIDO NUCLEICO QUE CODIFICA LA PROTEINA DSBA O DSBC ES INDUCIDA ANTES DE LA INDUCCION DE LA EXPRESION DEL ACIDO NUCLEICO QUE CODIFICA EL POLIPEPTIDO HETEROLOGO, Y BAJO CONDICIONES POR LAS QUE TANTO EL POLIPEPTIDO HETEROLOGO Y LA PROTEINA DSBA O DSBC SON SEGREGADAS EN EL PERIPLASMA DE LA…

PROCEDIMIENTO DE PRODUCCION DE UN POLIPEPTIDO MEDIANTE FERMENTACION BACTERIANA.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(16/05/2005). Solicitante/s: GENENTECH, INC.. Clasificación: C12Q1/02, C12P21/02, C12N15/01, C12M1/06.

SE DESCRIBE UN PROCESO PARA PRODUCIR UN POLIPEPTIDO DE INTERES DESDE LA FERMENTACION DE CELULAS HUESPED BACTERIALES COMPRENDIENDO EL ACIDO NUCLEICO QUE CODIFICA EL POLIPEPTIDO. EN ESTE METODO, LAS CELULAS HUESPED EMPLEADAS TIENEN UNA CADENA DE TRANSPORTE DE ELECTRON INACTIVADA. ADEMAS SE DESCRIBE UN METODO PARA DETERMINAR SI UN CULTIVO DE CELULA BACTERIAL PARTICULAR TIENE UNA PROPENSIDAD PARA LA INESTABILIDAD DE OXIGENO DISUELTO CUANDO SE FERMENTA A GRAN ESCALA.

ENSAYO QUE UTILIZA CEPAS DE CELULAS HOSPEDADORAS MICROBIANAS MARCADAS.

(16/09/2004) Procedimiento para analizar los contaminantes potenciales en un recipiente de cultivo utilizado para la fabricación de múltiples productos polipeptídicos, en donde los contaminantes potenciales son células huéspedes bacterianas, levaduras, o fúngicas que en la forma nativa utilizan carbohidratos, comprendiendo dicho procedimiento: (a) cultivar en el recipiente una cepa de células huésped que utilice más de una fuente de carbohidratos como sustrato, pero que esté marcada genéticamente para que carezca de su capacidad nativa para utilizar al menos un carbohidrato como sustrato y que comprenda el ácido nucleico que codifica el polipéptido…

PROCEDIMIENTO PARA LA RECUPERACION DE POLIPEPTIDOS HETEROLOGOS A PARTIR DE CELULAS BACTERIANAS.

(16/05/2004) Procedimiento para la recuperación de polipéptido heterólogo a partir de células bacterianas, que comprende: (a) cultivo de las células, que comprenden un primer ácido nucleico que codifica el polipéptido heterólogo que está unido a un primer promotor inducible, un segundo ácido nucleico que codifica la lisozima fágica, un tercer ácido nucleico que codifica una proteína que muestra actividad digestora de ADN bajo el control de una secuencia de señal para la secreción de la proteína digestora de ADN, y gen t, en el que, o bien: (i) dichos segundo y tercer ácido nucleico y dicho gen t están operativamente unidos a un segundo promotor inducible que es el mismo para los tres, y en el que los tres están unidos sobre el mismo constructo de ácido nucleico, o (ii) dichos segundo y tercer ácido nucleico están operativamente unidos a…

PROCEDIMIENTO PARA EL CONTROL DE LA PRODUCCION DE UN POLIPEPTIDO EN UNA BACTERIA.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(01/05/2004). Solicitante/s: GENENTECH, INC.. Clasificación: C12N15/12, C12N15/62, C12N15/70, C12N15/90, C12N15/55, C12N9/16.

SE PROPORCIONA ACIDO NUCLEICO QUE CODIFICA UNA MOLECULA QUE TIENE CIERTAS VARIACIONES DENTRO DE LA REGION DE ENLACE DE FOSFATO O E. COLI PSTS. ADICIONALMENTE SE PROPORCIONAN CELULAS BACTERIANAS QUE COMPRENDEN ESTE ACIDO NUCLEICO BAJO CONTROL DEL PROMOTOR DE GEN PSTS NATIVO, Y OPCIONALMENTE COMPRENDE ADEMAS ACIDO NUCLEICO QUE CODIFICA UN POLIPEPTIDO DE INTERES BAJO CONTROL DEL PROMOTOR DE FOSFATASA ALCALINA (AP). CELULAS BACTERIANAS QUE CONTIENEN AMBAS VARIANTES PSTS ACIDO NUCLEICO Y ACIDO NUCLEICO POLIPEPTIDO SE CULTIVAN EN UN MEDIO A UNA CONCENTRACION DE FOSFATO INORGANICO QUE EN TODAS LAS FASES DEL CRECIMIENTO CELULAR ESTA POR ENCIMA DEL NIVEL AL QUE LAS CELULAS CARECEN DE FOSFATO. ALTERNATIVAMENTE, LAS CELULAS SE CULTIVAN BAJO CONDICIONES POR LAS QUE LA CONCENTRACION DE FOSFATO INORGANICO EN EL MEDIO DE CULTIVO SE CONTROLA DURANTE EL PERIODO DE PRODUCCION PARA QUE EL POLIPEPTIDO SE PRODUZCA BAJO CONTROL DEL PROMOTOR AP PARCIALMENTE INDUCIDO.

PROCEDIMIENTO PARA EL REPLEGAMIENTO DE IGF-I A UNA CONFORMACION ACTIVA.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(01/08/1999). Solicitante/s: GENENTECH, INC.. Clasificación: C07K1/00, C12N15/16, C12N1/21.

ES PROVISTO UN METODO PARA REPLEGAR EL IGF-I MAL REPLEGADO, INSOLUBLE, EN DONDE EL IGF-I, PRECIPITADO DE CELULAS HUESPED PROCARIOTICOS, ES CONCURRENTEMENTE SOLUBILIZADO, DESPLEGADO, Y REPLEGADO DENTRO DE UNA CONFORMACION ACTIVA BIOLOGICAMENTE EN UN AMORTIGUADOR SIMPLE. EL AMORTIGUADOR CONTIENE AGENTE REDUCTOR Y AGENTE CAOTROPICO PARA SOLUBILIZAR EL IGF-I EN CONCENTRACIONES LO SUFICIENTEMENTE BAJAS PARA PERMITIR QUE SUCEDA LA SOLUBILIZACION Y EL REPLIEGUE. TAMBIEN ES PROVISTA UNA PROTEASA TRIPLE DEFICIENTE DE HUESPED E.COLI CONVENIENTE PARA EL USO EN EL PROCESO.

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