Reducción de la lixiviación de la proteína A durante la cromatografía de afinidad con proteína A.
(25/03/2020) Un método para reducir la lixiviación de proteína A en la purificación de un anticuerpo que comprende una región CH2/CH3 mediante cromatografía con proteína A, en donde el método comprende:
separar células hospedadoras recombinantes que expresan el anticuerpo del medio de cultivo celular para proporcionar una composición del fluido de cultivo celular recogido (FCCR) que comprende el anticuerpo y una o más impurezas;
reducir la temperatura de la composición del FCCR que se somete a cromatografía con proteína A a una temperatura en el intervalo de 3 ºC a 18 ºC; y
someter la composición del FCCR que tiene una temperatura en el intervalo de 3 ºC a 18 ºC a una cromatografía con proteína A para proporcionar una composición de anticuerpo purificada;
en donde la reducción de la temperatura de la composición del FCCR reduce la lixiviación de la…
Reducción de la lixiviación de la proteína A durante la cromatografía de afinidad con proteína A.
Sección de la CIP Química y metalurgia
(27/04/2016). Solicitante/s: GENENTECH, INC.. Clasificación: C07K16/06.
Un método de purificación de una proteína que comprende una región CH2/CH3 mediante cromatografía de afinidad con proteína A, en el que una cromatografía con proteína A inicial se lleva a cabo a temperatura ambiente de más de 20 ºC que da como resultado más de 20 ng de proteína A lixiviada por mg de proteína que está presente en una composición purificada, comprendiendo el método:
(a) someter una muestra de la proteína y una o más impurezas a una cromatografía de afinidad con proteína A, en donde la temperatura de la muestra está a una temperatura reducida en el intervalo de 3 ºC a 15 ºC,
(b) recuperar la composición purificada obtenida, y
(c) medir la proteína A lixiviada en dicha composición purificada,
en el que la lixiviación de la proteína A se reduce en la composición purificada obtenida a la temperatura reducida y dicha composición purificada contiene de 0 ng de proteína A a 15 ng de proteína A por mg de proteína.
PDF original: ES-2578933_T3.pdf
Precipitación con polielectrolito y purificación de anticuerpos.
(21/10/2013) Método de purificación de anticuerpos, que comprende:
(a) ajustar la acidez o la concentración de sales de una mezcla que contiene un anticuerpo en la que elanticuerpo deriva de un fluido de cultivo celular y el fluido de cultivo celular deriva de un cultivo celular demamífero;
(b) añadir un polielectrolito policatiónico cargado positivamente seleccionado entre poliarginina y polilisina a lamezcla, mediante lo cual se forma un precipitado que comprende el polielectrolito policatiónico cargadopositivamente e impurezas seleccionadas entre agregados de proteínas, fragmentos de proteínas,proteínas de célula huésped, insulina, gentamicina y ADN; y
(c)…
PRECIPITACIÓN CON POLIELECTROLITO Y PURIFICACIÓN DE ANTICUERPOS.
(15/02/2012) Método de purificación de anticuerpos que comprende: (a) ajustar la acidez o concentración de sal de una mezcla que contiene un anticuerpo donde el anticuerpo deriva de un fluido de cultivo celular recogido y el fluido de cultivo celular recogido deriva de un cultivo de células de mamífero; (b) añadir un polielectrolito cargado negativamente seleccionado entre ácido polivinilsulfónico, polivinilsulfonato, ácido poliestirensulfónico, y ácido poliacrílico y donde el polielectrolito cargado negativamente tiene un peso molecular de aproximadamente 1000 a aproximadamente 1.000.000 Da, mediante lo cual se forma un precipitado de proteína-polielectrolito que comprende el polielectrolito cargado negativamente y el anticuerpo; (c) separar el precipitado de proteína-polielectrolito…
PURIFICACION DE PROTEINAS.
Sección de la CIP Química y metalurgia
(11/05/2009). Ver ilustración. Solicitante/s: GENENTECH, INC.. Clasificación: C07K1/22.
Procedimiento para purificar una proteína, que comprende una región C H2/C H3, de una solución contaminada de la misma mediante cromatografía de Proteína A, que comprende: #(a) adsorber la proteína de dicha solución contaminada a la Proteína A inmovilizada en una fase sólida; #(b) eliminar los contaminantes mediante el lavado de la fase sólida con una composición que comprende detergente en una concentración entre aproximadamente 0,01% y aproximadamente 5% y sal a una concentración de entre aproximadamente 0,1 M y aproximadamente 2 M, teniendo la composición un pH de aproximadamente pH 4,5 a aproximadamente 5,5; y #(c) recuperar la proteína de la fase sólida con un tampón de elución que tiene un pH en el intervalo de aproximadamente 2 a aproximadamente 5.
PURIFICACION DE MOLECULAS.
Sección de la CIP Química y metalurgia
(01/12/2003). Ver ilustración. Solicitante/s: GENENTECH, INC.. Clasificación: C07K1/20, C07K14/65.
Procedimiento para la purificación de una molécula seleccionada de entre el grupo que consiste en un péptido, un polipéptido y un compuesto no peptidil biológicamente activo, que comprende cargar una mezcla que contiene la molécula en una columna de cromatografía líquida en fase inversa y eluir la molécula de la columna con un tampón que contiene hexilenglicol.