Secuencia cubierta de conversión de ADN y métodos de detección.

Un método para la detección de un ácido nucleico diana en una muestra,

comprendiendo dicho método poner en contacto dicha muestra con:

un oligonucleótido horquillado que comprende en la dirección 5' a 3', una primera secuencia arbitraria, un sitio de reconocimiento de la endonucleasa, una secuencia complementaria de dicha primera secuencia arbitraria, una secuencia complementaria del extremo 3' de un ácido nucleico diana, una modificación del extremo 3' que evita el inicio de reacciones de extensión no específicas a partir del extremo 3' del oligonucleótido horquillado;

una polimerasa; y

una endonucleasa para una reacción de mellado;

para formar una mezcla de reacción;

permitir que la secuencia del extremo 3' del ácido nucleico diana se hibride con el oligonucleótido horquillado en la secuencia complementaria del extremo 3' del ácido nucleico diana;

iniciar la replicación por desplazamiento de cadena en el extremo 3' del ácido nucleico diana por la ADN polimerasa generando una secuencia de extensión de cadena doble que incluye un sitio de reconocimiento de la endonucleasa de doble cadena

y una secuencia de oligonucleótido de señal que es complementaria de la primera secuencia arbitraria; mellar la secuencia de extensión de doble cadena mediante la endonucleasa para generar una secuencia de oligonucleótido de señal que se desplaza desde la horquilla mediante la ADN polimerasa; y

detectar el ADN de señal, donde la presencia del ADN de señal detecta la presencia del ácido nucleico diana en la muestra.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/IB2015/000726.

Solicitante: ABBOTT LABORATORIES.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 100 ABBOTT PARK ROAD ABBOTT PARK, IL 60064 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: YOSHIMURA,TORU, KOMIYA,KEN, KOMORI,MAKOTO.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/68 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2754251_T3.pdf

 

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