Diacuerpos covalentes y sus usos.

Una molécula de diacuerpo que comprende una primera, segunda, tercera y cuarta cadena polipeptídica, en la que:

(A) dicha primera cadena polipeptídica comprende en el extremo N-terminal en sentido hacia el extremo Cterminal:

(i) un dominio (A) que comprende una región de unión de un dominio variable de cadena ligera de una primera inmunoglobulina (VL1) específica de un epítopo (1);

(ii) un dominio (B) que comprende una región de unión de un dominio variable de cadena pesada de una segunda inmunoglobulina (VH2) específica de un epítopo (2); y

(iii) un dominio (C) que comprende un dominio de región constante de cadena ligera (CL);

en la que dichos dominios (A) y (B) están enlazados covalentemente entre sí por un enlazador peptídico de 1- 9 restos de aminoácido, de modo que dichos dominios (A) y (B) no se asocian para formar un sitio de unión al epítopo;

(B) dicha segunda cadena polipeptídica comprende en el extremo N-terminal en sentido hacia el extremo Cterminal:

(i) un dominio (D) que comprende una región de unión de un dominio variable de cadena ligera de una segunda inmunoglobulina (VL2) específica de dicho epítopo (2);

(ii) un dominio (E) que comprende una región de unión de un dominio variable de cadena pesada de la primera inmunoglobulina (VH1) específica de dicho epítopo (1);

(iii) un dominio (F) que comprende un dominio de región constante de cadena pesada 1 (CH1), una región bisagra, una región constante de cadena pesada 2 (CH2) y una región constante de cadena pesada 3 (CH3);

en la que dichos dominios (D) y (E) están enlazados covalentemente entre sí por un enlazador peptídico de 1- 9 restos de aminoácido, de modo que dichos dominios (D) y (E) no se asocian para formar un sitio de unión al epítopo;

en la que dichos dominios (A) y (E) se asocian formando un sitio de unión que se une dicho epítopo (1); dichos dominios (B) y (D) se asocian formando un sitio de unión que se une dicho epítopo (2); y dichos dominios (C) y (F) están enlazados covalentemente entre sí a través de un enlace disulfuro;

(C) dicha tercera cadena polipeptídica comprende en el extremo N-terminal en sentido hacia el extremo Cterminal: (i) un dominio (G) que comprende una región de unión de un dominio variable de cadena ligera de una tercera inmunoglobulina (VL3) específica de un epítopo (3);

(ii) un dominio (H) que comprende una región de unión de un dominio variable de cadena pesada de una cuarta inmunoglobulina (VH4) específica de un epítopo (4); y

(iii) un dominio (I) que comprende un dominio de región constante de cadena ligera (CL); en la que dichos dominios (G) y (H) están enlazados covalentemente entre sí por un enlazador peptídico de 1-9 restos de aminoácido, de modo que dichos dominios (G) y (F) no se asocian para formar un sitio de unión al epítopo;

(D) dicha cuarta cadena polipeptídica comprende en el extremo N-terminal en sentido hacia el extremo Cterminal:

(i) un dominio (J) que comprende una región de unión de un dominio variable de cadena ligera de una cuarta inmunoglobulina (VL4) específica de dicho epítopo (4);

(ii) un dominio (K) que comprende una región de unión de un dominio variable de cadena pesada de la tercera inmunoglobulina (VH3) específica de dicho epítopo (3);

(iii) un dominio (L) que comprende un dominio de región constante de cadena pesada 1 (CH1), una región bisagra, una región constante de cadena pesada 2 (CH2) y una región constante de cadena pesada 3 (CH3);~

en la que dichos dominios (J) y (K) están enlazados covalentemente entre sí por un enlazador peptídico de 1- 9 restos de aminoácido, de modo que dichos dominios (J) y (K) no se asocian para formar un sitio de unión al epítopo;

en la que dichos dominios (G) y (K) se asocian formando un sitio de unión que une dicho epítopo (3); dichos dominios (H) y (J) se asocian formando un sitio de unión que une dicho epítopo (4); dichos dominios (I) y (L) están enlazados covalentemente entre sí a través de un enlace disulfuro; y

dicha región constante de cadena pesada 2 (CH2) y dicha región constante de cadena pesada 3 (CH3) de dichas segunda y cuarta cadena polipeptídica se asocian para formar una región Fc.