Determinación de constantes de unión por desplazamiento del equilibrio.
Procedimiento para determinar constantes de unión de una sustancia o de una mezcla de sustancias con referencia a una diana disuelta y una diana inmovilizada,
que comprende las etapas de
• incubación de una primera muestra de la sustancia o de la mezcla de sustancias con una diana inmovilizada en un vehículo sólido, preferentemente de partículas, en un primer recipiente de muestras, que contiene una solución tampón y una diana disuelta,
• incubación de una segunda muestra de la sustancia o de la mezcla de sustancias con la diana inmovilizada en un vehículo sólido, preferentemente de partículas, en un segundo recipiente de muestras, que contiene solución tampón y diana disuelta,
• incubación de una tercera muestra de la sustancia o de la mezcla de sustancias con la diana inmovilizada en un vehículo sólido, preferentemente de partículas, en un tercer recipiente de muestras, que contiene solución tampón y diana disuelta,
• incubación de una cuarta muestra de la sustancia o de la mezcla de sustancias con la diana inmovilizada en un vehículo sólido, preferentemente de partículas, en un cuarto recipiente de muestras, que contiene solución tampón y diana disuelta,
en el que
la primera y la segunda muestra de la sustancia se incuban con cantidades de material diferentes de la diana inmovilizada y la misma cantidad de material de la diana disuelta, la tercera y la cuarta muestra de la sustancia se incuban con las cantidades de material de la diana inmovilizada como la primera y la segunda muestra de la sustancia y con una cantidad de material idéntica de la diana disuelta, en el que la cantidad de material de la diana disuelta en los recipientes de muestra tres y cuatro difiere de la cantidad de material de la diana disuelta en los recipientes de muestra uno y dos
y
los recipientes de muestra en la incubación contienen el mismo volumen de fase líquida, que consiste en solución tampón, diana disuelta y muestra de sustancia,
comprendiendo además las etapas de
• separación del vehículo sólido, preferentemente de partículas, de los lotes de incubación respectivos, • medida de la concentración de la sustancia que no está unida a la diana inmovilizada o de la mezcla de sustancias que no está unida a la diana inmovilizada (concentración APA) en el sobrenadante del lote de incubación respectivo,
• determinación de una constante de unión de la sustancia o de la mezcla de sustancias a la diana inmovilizada y de una constante de unión de la sustancia o de la mezcla de sustancias a la diana disuelta con la ayuda de las concentraciones APA medidas,
• en el que las constantes de unión son constantes de disociación y la determinación de las constantes de disociación se consigue con la ayuda de la ecuación I**Fórmula**
en el que
APA denota la concentración de la sustancia que no está unida a la diana inmovilizada, es decir, sustancia libre y sustancia unida a la diana disuelta,
**Fórmula** denota la constante de disociación a partir de la diana inmovilizada,
**Fórmula** la constante de disociación a partir de la diana disuelta,
c0 la concentración de sustancia añadida constantemente total,
[inmoT] la concentración de la diana inmovilizada y
[P] la concentración de la diana disuelta.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2015/073902.
Solicitante: 3B Pharmaceuticals GmbH.
Nacionalidad solicitante: Alemania.
Dirección: Magnusstrasse 11 12489 Berlin ALEMANIA.
Inventor/es: BORISS,HINNERK.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- G01N33/543 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › con un soporte insoluble para la inmovilización de compuestos inmunoquímicos.
- G01N33/92 G01N 33/00 […] › en los que intervienen lípidos, p. ej. colesterol.
PDF original: ES-2728118_T3.pdf
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