Procedimiento cromatográfico para aislar y purificar albúmina sérica humana recombinante de alta pureza.

Un procedimiento para aislar y purificar albúmina sérica humana recombinante de alta pureza,

que comprende secuencialmente las etapas siguientes de:

a) someter el extracto bruto de albúmina sérica humana recombinante a cromatografía de intercambio catiónico, añadiendo etanol en los tampones para eliminar la endotoxina, para obtener producto primario I; dichos tampones comprenden un tampón de lavado, un tampón de equilibrio I y un tampón de equilibrio II; el tampón de lavado comprende etanol anhidro al 10-20 % en volumen, el tampón de equilibrio I comprende etanol anhidro al 0-10 % en volumen, el tampón de equilibrio II comprende etanol anhidro al 5-15 % en volumen;

equilibrando la columna cromatográfica con tampón de equilibrado I, cargando la muestra, equilibrando la columna cromatográfica con tampón de equilibrado II, eluyendo la impurezas con tampón de lavado, eluyendo la proteína objetivo con el tampón de elución;

la cromatografía de intercambio catiónico se realiza sobre una resina compuesta catiónica/hidrofóbica seleccionada de entre Capto-MMC o Bestarose Diamond MMC;

b) someter el producto primario I a cromatografía de intercambio aniónico para obtener producto secundario II;

la cromatografía de intercambio aniónico se realiza sobre una resina compuesta aniónica/hidrofóbica seleccionada de entre Capto-Adhere o Bestarose Diamond MMA;

c) someter el producto secundario II a cromatografía hidrofóbica para obtener albúmina sérica humana recombinante de alta pureza;

la cromatografía hidrofóbica se realiza sobre una resina seleccionada de entre Phenyl Sepharose HP, Phenyl Sepharose FF, Phenyl Bestarose HP o Phenyl Bestarose FF.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/CN2013/075405.

Solicitante: Wuhan Healthgen Biotechnology Corp.

Inventor/es: Yang,Daichang, SHI,Bo, LIU,JINGRU, OU,JIQUAN, SHI,QIANNI.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C07K1/18 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02;   proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 1/00 Procedimientos generales de preparación de péptidos. › Cromatografía de intercambio iónico.
  • C07K14/765 C07K […] › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › Seroalbúmina, p. ej. HSA.

PDF original: ES-2687250_T3.pdf

 

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