Procedimiento para la detección y para la identificación de una cepa de C. difficile variante en una muestra.

Procedimiento in vitro para la detección y para la identificación de una cepa de C.

difficile variante, productora de LCT, virulenta en una muestra, caracterizado por las siguientes etapas de procedimiento:

(a) poner en contacto una muestra de excreción o secreción corporal y/o de tejido corporal con en cada caso al menos un anticuerpo de al menos tres de los grupos de anticuerpos grupo I, grupo II, grupo III, grupo IV, grupo V y grupo VI, en el que

el grupo I comprende los siguientes anticuerpos:

anticuerpo monoclonal 2CV (DSM ACC 2321), anticuerpo monoclonal TGC 35 (DSM ACC2918) y anticuerpos pan-TcdB,

el grupo II comprende los siguientes anticuerpos: anticuerpos monoclonales TGC23 (DSM ACC2917) y anticuerpos que reaccionan con las toxinas TcdB-10463 y TcdB-017, pero no con las toxinas TcdB-8864 y TcdB-027,

el grupo III comprende los siguientes anticuerpos: anticuerpos monoclonales TGC41 (DSM ACC2919) y anticuerpos que reaccionan con TcdB-10463, pero no con las toxinas TcdB-8864, TcdB-017 y TcdB-027, el grupo IV comprende los siguientes anticuerpos: anticuerpos monoclonales TGC 16 (DSM ACC2915) y anticuerpos que reaccionan con las toxinas TcdB-8864, TcdB-017 y TcdB-027, pero no con la toxina TcdB- 10463,

el grupo V comprende los siguientes anticuerpos: anticuerpos monoclonales TGC 19 (DSM ACC2916) y anticuerpos que reaccionan con las toxinas TcdB-8864 y TcdB-027, pero no con las toxinas TcdB-10463 y TcdB-017,

el grupo VI comprende los siguientes anticuerpos: anticuerpos monoclonales TTC8 (DSM ACC 2322) y anticuerpos pan-TcdA;

y en el que se cumple que:

TcdB-10463 representa la toxina B de la cepa de C. difficile VPI-10463,

TcdB-8864 representa la toxina B de la cepa de C. difficile 8864,

TcdB-017 representa la toxina B de cepas de C. difficile con el ribotipo 017, en particular para la toxina B de la cepa de C. difficile 1470,

TcdB-027 representa la toxina B de cepas de C. difficile con el ribotipo 027, en particular para la toxina B de la cepa de C. difficile 7002/8

(b) detectar la reacción de anticuerpo y crear el patrón de reacción, en el que a cada anticuerpo utilizado en (a) de cada grupo de anticuerpos I a VI se asocia un símbolo positivo (por ejemplo "+") para una reacción de anticuerpo positiva detectada y un símbolo negativo (por ejemplo "-") para una reacción de anticuerpo negativa detectada, y

(c) comparar el patrón de reacción obtenido en (b) con patrones de referencia de modo que de las cepas de C. difficile Rx1, Rx2, Rxi conocidas en el estado de la técnica y que se examinan en la prueba de detección para determinar su presencia se utiliza al menos una de sus toxinas clostridiales grandes respectivas (LCT) LCT-Rx1, LCT-Rx2, LCT-Rxi en una prueba de reacción con los anticuerpos seleccionados en la etapa (a) de los al menos tres de los grupos de anticuerpos I a VI, y de modo que los resultados de reacción obtenidos para cada LCT y los al menos tres de los grupos de anticuerpos I a IV se registran a modo de patrón de tal manera que a cada grupo de anticuerpos se asocia o bien un símbolo positivo (por ejemplo "+") en el caso de una reacción de anticuerpo positiva detectada o un símbolo negativo (por ejemplo "-") en el caso de una reacción de anticuerpo negativa detectada,

(d) evaluar una coincidencia entre el patrón de reacción obtenido en (b) con un patrón de referencia como indicio de que en la muestra está presente la cepa de C. difficile del patrón de referencia en cuestión.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/DE2009/001044.

Solicitante: BioDics GmbH.

Inventor/es: MOOS, MICHAEL, BRAUN,VEIT, VON EICHELSTREIBER,CHRISTOPH, GISCH,KARINA.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C07K14/33 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02;   proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › de Clostridium (G).
  • C07K16/12 C07K […] › C07K 16/00 Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales. › contra materiales bacterianos.
  • G01N33/569 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › para microorganismos, p. ej. protozoarios, bacterias, virus.

PDF original: ES-2589606_T3.pdf

 

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