Identificación de resistencia antibiótica en microorganismos.

Método para la identificación simultánea de una célula bacteriana individual y la detección de una resistencia antibiótica en dicha célula bacteriana individual en una muestra biológica,

que comprende las etapas:

(a) poner en contacto dicha célula bacteriana individual con un primer ácido nucleico capaz de hibridarse selectivamente con un ácido nucleico en dicha célula bacteriana en condiciones in situ, en donde el primer ácido nucleico se hibrida selectivamente con el ácido nucleico, y en el que el primer ácido nucleico se marca con un primer marcador,

(b) identificar la célula bacteriana por la detección de la presencia del primer marcador en dicha célula bacteriana individual,

(c) poner en contacto dicha misma célula bacteriana individual con al menos una sonda para la detección de una resistencia antibiótica en la célula bacteriana en las mismas dichas condiciones in situ, en el que dicha al menos una sonda se selecciona de

(i) anticuerpos y fragmentos de los mismos, siendo capaces los anticuerpos y fragmentos de los mismos de unirse selectivamente a un factor de resistencia, y en el que el anticuerpo y los fragmentos de los mismos se marcan con un segundo marcador, en donde dicha célula bacteriana individual se pone en contacto con el anticuerpo y/o dicho fragmento del mismo en condiciones en donde el anticuerpo y/o el fragmento del mismo se une selectivamente al factor de resistencia,

(ii) segundos ácidos nucleicos capaces de hibridarse con un ARN que codifica para un factor de resistencia, en el que el segundo ácido nucleico se marca con un tercer marcador, en donde dicha célula bacteriana individual se pone en contacto con el segundo ácido nucleico bajo condiciones en las que el segundo ácido nucleico se hibrida selectivamente con el ARN,

(iii) knottins, proteínas cistina-nudo o/y aptámeros capaces de unirse selectivamente a un factor de resistencia, y en el que los knottins, las proteínas cistina-nudo o/y los aptámeros se marcan con un cuarto marcador, en donde dicha célula bacteriana individual se pone en contacto con el knottin, proteína de cistina-nudo y/o aptámero en condiciones en las que el knottin, la proteína de cistina- nudo y/o el aptámero se unen selectivamente al factor de resistencia, y

(iv) nitrocefina, en donde dicha célula bacteriana individual se pone en contacto con dicha nitrocefina en condiciones en las que beta-lactamasa modifica a dicha nitrocefina, y

(d) determinar la resistencia a los antibióticos de la célula bacteriana por la detección de la presencia de uno o más marcadores, el segundo marcador, el tercer marcador, el cuarto marcador, o/y la nitrocefina modificada en la célula bacteriana individual,

en donde las etapas (b) y (d) se realizan simultáneamente en dicha célula bacteriana individual.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E11158836.

Solicitante: MIACOM DIAGNOSTICS GMBH.

Nacionalidad solicitante: Alemania.

Dirección: MEROWINGERPLATZ 1A 40225 DUSSELDORF ALEMANIA.

Inventor/es: FREIHERR VON STEIN,WALTER, STANGE,MIRKO.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12N15/82 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › para células vegetales.
  • C12Q1/18 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › Investigación o análisis de la actividad antimicrobiana de un material.
  • C12Q1/68 C12Q 1/00 […] › en los que intervienen ácidos nucleicos.
  • G01N33/569 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › para microorganismos, p. ej. protozoarios, bacterias, virus.

PDF original: ES-2608313_T3.pdf

 

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