Ensayo de protección de epítopos y método para detectar conformaciones de proteínas.
Método de detección de si un polipéptido candidato que incluye un epítopo diana está en i) una conformación de tipo natural o ii) una conformación de tipo no natural,
que comprende:
poner en contacto el polipéptido con un agente de bloqueo seleccionado de peroxinitrito, peróxido de hidrógeno, anhídrido succínico, conduritol-B-epóxido, 1,2-epoxi-3-(p-nitrofenoxi)propano, pirocarbonato de dietilo y 4-hidroxinonenal (4HNE) que bloquea selectivamente un epítopo diana accesible, en el que en la conformación de tipo natural, el epítopo diana es accesible y reacciona con el agente de bloqueo, y en el que en la conformación de tipo no natural, el epítopo diana es inaccesible porque el polipéptido candidato está agregado y el epítopo diana no puede reaccionar con el agente de bloqueo;
retirar el agente de bloqueo sin reaccionar del contacto con el polipéptido;
desnaturalizar y/o desagregar el polipéptido candidato para convertir cualquier epítopo diana inaccesible en un epítopo diana accesible; y
poner en contacto el polipéptido con un anticuerpo que se une selectivamente al epítopo diana que se convirtió de un epítopo diana inaccesible en un epítopo diana accesible, en el que la unión entre anticuerpo y epítopo diana convertido indica que el polipéptido candidato estaba en una conformación de tipo no natural y en el que la ausencia de unión entre el anticuerpo y el epítopo diana indica que el polipéptido estaba en una conformación de tipo natural
en el que el polipéptido candidato comprende polipéptido amiloide-beta, proteína APP, SOD1 o alfa-sinucleína.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/CA2004/001503.
Solicitante: ProMIS Neurosciences Inc.
Nacionalidad solicitante: Canadá.
Dirección: 1920 Yonge Street, Suite 200 Toronto, ON M4S 3E2 CANADA.
Inventor/es: CASHMAN,NEIL, LEHTO,MARTY.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- G01N33/53 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto.
- G01N33/569 G01N 33/00 […] › para microorganismos, p. ej. protozoarios, bacterias, virus.
- G01N33/68 G01N 33/00 […] › en los que intervienen proteínas, péptidos o aminoácidos.
PDF original: ES-2566565_T3.pdf
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