Preparación de lipasa en polvo, método para la producción de la misma y uso de la misma.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/JP2008/054448.
Solicitante: THE NISSHIN OILLIO GROUP, LTD..
Nacionalidad solicitante: Japón.
Dirección: 23-1, SHINKAWA 1-CHOME CHUO-KU TOKYO 104-8285 JAPON.
Inventor/es: NEGISHI,Satoshi, SUZUKI,JUNKO, YAMAUCHI,YOSHIE, MANABE,TAMAMI.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N9/16 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › actúan sobre los enlaces éster (3.1).
- C12P7/62 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › C12P 7/00 Preparación de compuestos orgánicos que contienen oxígeno. › Esteres de ácidos carboxílicos.
PDF original: ES-2537325_T3.pdf
Fragmento de la descripción:
DESCRIPCION
Preparación de lipasa en polvo, método para la producción de la misma y uso de la misma
Campo de la técnica de la invención
La presente invención se refiere a una preparación de lipasa en polvo que preferiblemente se puede utilizar en varias reacciones de esterificación o transesterificación, y una preparación de lipasa en polvo que comprende 5 ésteres y/o ácidos grasos; un método para producir las mismas; y un método de transesterificación utilizando dichas preparaciones de lipasa en polvo.
Antecedentes de la invención
Las lipasas se utilizan ampliamente en la esterificación de varios ácidos carboxílicos tales como ácidos grasos con alcoholes tales como monoalcoholes y polialcoholes, transesterificación entre ésteres de varios ácidos carboxílicos, 10 y similares. Entre ellas, la reacción de transesterificación es una tecnología importante no sólo como método para la modificación de grasas y aceites animales y vegetales, sino también como método para producir ésteres de varios ácidos grasos tales como ésteres de azúcar y ésteres de esterol. Cuando una lipasa, que es una enzima que hidroliza grasas y aceites, se usa como un catalizador en las reacciones mencionadas, la reacción de transesterificación se puede realizar bajo condición suave, por ejemplo desde temperatura ambiente hasta alrededor 15 de 70ºC. Por tanto, las reacciones en las que se utiliza una lipasa pueden inhibir mejor reacciones adversas y reducir costes energéticos en comparación con las reacciones químicas convencionales. Además, ya que la lipasa como catalizador es un producto natural, es altamente segura. Además, se pueden producir eficazmente compuestos deseados utilizando una lipasa debido a la especificidad del sustrato y especificidad posicional de la misma. Sin embargo, ni siquiera si se utiliza una lipasa en polvo en la reacción de transesterificación sin 20 modificación, se manifiesta completamente la actividad de la misma. Además, es difícil dispersar uniformemente una lipasa soluble básicamente en agua en materias primas oleosas y recoger tal lipasa.
Por tanto, generalmente, es común inmovilizar una lipasa en algunos vehículos, tales como una resina intercambiadora aniónica (Documento de Patente 1) , una resina de adsorción fenólica (Documento de Patente 2) , un vehículo hidrofóbico (Documento de Patente 3) , una resina intercambiadora catiónica (Documento de Patente 4) y 25 una resina quelato (Documento de Patente 5) y utilizarlos en reacciones tales como la esterificación y la transesterificación. Además, se propone el método para producir partículas de lipasa inmovilizadas, que comprende las etapas de producir una emulsión en la que una fase acuosa disuelve una lipasa y una sustancia que actúa como vehículo de una lipasa se dispersa en una fase hidrofóbica; y separar el agua de la emulsión para convertir la fase acuosa en partículas sólidas de la misma cubiertas con la lipasa (Documento de Patente 6) . 30
Como se ha mencionado anteriormente, convencionalmente una lipasa se inmoviliza y se utiliza en la reacción de transesterificación. Sin embargo, la lipasa inmovilizada pierde la actividad lipasa original a través de la inmovilización. Además, cuando se utiliza un vehículo poroso, una materia prima o un producto se queda atascado en los poros finos y, como resultado, la velocidad de transesterificación disminuye. Además, en la reacción de transesterificación en que se utiliza la lipasa inmovilizada convencional, el agua retenida por el vehículo, entra en el 35 sistema de reacción y, por lo tanto, es difícil evitar reacciones adversas, tales como la producción de diglicéridos y monoglicéridos en la reacción de transesterificación de grasas y aceites.
A la luz de las situaciones anteriores, se han desarrollado varias tecnologías utilizando una lipasa en polvo. Por ejemplo, se propone el método de reacción de transesterificación, que comprende las etapas de dispersar una lipasa en polvo, en presencia o ausencia de uno o más disolventes orgánicos inactivos, en una materia prima que 40 comprende uno o más ésteres para que el 90% o más de las partículas de lipasa en polvo dispersas mantengan un diámetro de partícula de 1-100µm durante la reacción; y transesterificar dicha mezcla (Documento de Patente 7) . Además, se propone también el uso de un polvo enzimático, donde dicho polvo enzimático es obtenido por secado de una solución de enzimas que comprende fosfolípidos y vitaminas liposolubles (Documento de Patente 8) .
Sin embargo, se desea una lipasa en polvo cuya actividad lipasa sea aún mejor. 45
Por otro lado, se propone el método para producir una preparación de enzima inmovilizada, que comprende las etapas de añadir un polvo granulado o un polvo granulado y azúcares, a una solución que comprende una o más enzimas, y secar la solución que comprende una o más enzimas (Documento de Patente 9) . La bibliografía describe que los ejemplos de enzimas utilizables incluyen una lipasa, una celulasa, una proteasa, una amilasa y una pectinasa, y que la preparación de la enzima inmovilizada obtenida por el método de producción arriba mencionado 50 puede inhibir la desactivación enzimática en presencia de una sustancia que reduce la actividad enzimática . Sin embargo, en ese documento no se describe una mejora de la actividad enzimática. Además, los ejemplos realmente producidos en la biografía son sólo aquellos ejemplos en los que un polvo de soja desgrasado que tiene poco contenido graso se aplica como celulasa o proteasa, y no hay ninguna descripción específica de un ejemplo en donde se utilice una lipasa. 55
Documento de Patente 1: JP-A 60-98984
Documento de Patente 2: JP-A 61-202688
Documento de Patente 3: JP-A 2-138986
Documento de Patente 4: JP-A 3-61485
Documento de Patente 5: JP-A 1-262795
Documento de Patente 6: JP-B 3403202 5
Documento de Patente 7: JP- B 2668187
Documento de Patente 8: JP-A 2000-1-6873
Documento de Patente 9: JP-A 2000-106873
Descripción de la invención
El objeto de la presente invención es proporcionar una preparación de una lipasa en polvo en la cual se mejora su 10 actividad enzimática.
El objeto adicional de la presente invención es proporcionar un método para la producción de la preparación de lipasa en polvo.
Otro objeto adicional de la presente invención es proporcionar un método de transesterificación o un método de transesterificación en el cual se utiliza la preparación de lipasa en polvo. 15
La presente invención se ha completado basándose en el hallazgo de que, cuando se granula una lipasa de origen específico en un polvo con un polvo de soja de alto contenido en grasa y se utiliza la preparación de la lipasa en polvo obtenida en la reacción de esterificación y/o la reacción de transesterificación, la actividad de la lipasa se mejora drásticamente.
Concretamente, la presente invención proporciona una preparación de lipasa en polvo, que es un material granulado 20 que contiene una lipasa derivada de Rhizopus or y zae y/o una lipasa derivada de Rhizopus delemar y un polvo de soja que tiene un contenido graso del 5% de la masa o más.
La presente invención proporciona también un método para producir una preparación de lipasa en polvo que comprende una etapa de secar una solución acuosa en la que están disueltas o dispersas una lipasa derivada de Rhizopus or y zae y/o una lipasa derivada de Rhizopus delemar y un polvo de soja que tiene un contenido graso del 25 5% de la masa o más.
La presente invención proporciona además un método para producir un producto transesterificado o un producto esterificado que comprende la etapa de transesterificar o esterificar una o más clases seleccionadas de ésteres de ácidos grasos, ácidos grasos y alcoholes, utilizando la preparación de lipasa en polvo mencionada anteriormente.
Según la presente invención, es posible proporcionar una preparación de lipasa en polvo que tiene una actividad 30 enzimática mejorada drásticamente, con la que la reacción de transesterificación o esterificación se puede realizar eficazmente y, dicha preparación de lipasa en polvo, se puede reutilizar por recogida después de la reacción.
Además, según la presente invención, es también posible obtener una preparación de lipasa en polvo que se puede utilizar de forma segura y económica en la preparación de alimentos o aditivos alimentarios para aquellos que, por razones religiosas o de salud, no pueden tomar proteínas o grasas ni aceites derivados de animales. 35
Breve descripción de los dibujos
La figura 1 muestra los cambios en el tiempo... [Seguir leyendo]
Reivindicaciones:
1. Una preparación de lipasa en polvo que es un material granulado que comprende una lipasa derivada de Rhizopus or y zae y/o una lipasa derivada de Rhizopus delemar y un polvo de soja que tiene un contenido graso del 5% en masa o más.
2. La preparación de lipasa en polvo según la reivindicación 1, en la que el contenido graso del polvo de soja 5 es del 10-25% en masa.
3. La preparación de lipasa en polvo según la reivindicación 1 o 2, en la que el polvo de soja es un polvo de soja de grasa entera.
4. La preparación de lipasa en polvo según cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde el 90% en masa o más de la preparación de lipasa en polvo tiene un tamaño de partícula de 1-100 µm. 10
5. La preparación de lipasa en polvo según cualquiera de las reivindicaciones 1-4 para transesterificación o esterificación.
6. Un método para producir una preparación de lipasa en polvo, que comprende la etapa de secar una solución acuosa en la que están disueltos o dispersos una lipasa derivada de Rhizopus or y zae y/o una lipasa derivada de Rhizopus delemar y un polvo de soja que tiene un contenido graso del 5% en masa o más. 15
7. El método según la reivindicación 6, que comprende la etapa de ajustar el pH de la solución acuosa a 7, 5-8, 5 antes del secado.
8. El método según la reivindicación 6 o 8, en donde el secado se realiza por secado de rocío.
9. El método según cualquiera de las reivindicaciones 6-8, que comprende ajustar la temperatura .
2. 40 °C de la solución acuosa que comprende la lipasa y el polvo de soja justo antes del secado de rocío; y pulverizar la 20 solución en atmósfera seca d.
7. 130°C.
10. Un método para producir un producto transesterificado o un producto esterificado que comprende la etapa de transesterificar o esterificar uno o más tipos seleccionados de ésteres de ácidos grasos, ácidos grasos, y alcoholes, utilizando la preparación de lipasa en polvo según cualquiera de las reivindicaciones 1-5.
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